| 研究概要 |
【目的】C型慢性肝炎の病態は免疫反応によると考えられており、その進展にはウイルス特異的なCytotoxic T cell(CTL)レスポンスが重要である。一方最近では樹状細胞(DC)のC型慢性肝炎患者における機能低下が指摘され、C型肝炎ウイルス(HCV)がDCの機能異常を誘発し、ヘルパーT細胞機能・CTLレスポンスを障害していると考えられている。我々はHCV構成遺伝子含有プラスミド(g-core, g-NS2,g-NS3, g-NS4A, g-NS4B, g-NS5A, g-NS5B)をDCに導入した場合、リコンビナントHCV構成蛋白(p-core, p-NS3, p-NS4, p-NS5A, p-NS5B)を培養DCに添加した場合の、細胞表面マーカー・機能の変化について検討した。【方法】健常成人より末梢血リンパ球を分離し、磁気ビーズを用いてCD14陽性細胞を回収。GM-CSF、IL-4を加えて5日間培養後HCV構成タンパク質を含むプラスミド(Core, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, NS5B)をリポフェクション法にて導入した場合、HCV構成タンパク質を培養に添加した場合にコントロールとの間で細胞表面マーカー(HLAclassI, classII, CD40, CD80, CD86, CD81)の発現を比較、またPPD添加し、T細胞と混合リンパ球培養にて機能、サイトカイン産生能を比較した。【結果】g-NS4Bとg-NS5A導入時、p-NS4添加時にCD86についてMean fluorescence intensity(MFI)が低下した。一方PPD特異的T細胞刺激能ではg-NS4Aとg-NS4B導入時、p-NS4添加時に低下していた。サイトカインプロファイルはg-NS4A導入時,p-NS4添加時にTh1サイトカインの低下が見られた。しかしこの効果はリポポリサッカライド(LPS)により成熟させると認められなくなった。【結論】HCV構成タンパク質のうちNS4が樹状細胞機能に影響を与える可能性が示された。
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