NNKによる肝癌発症ラットをモデルとした脱メチル化による発癌抑制および抗癌作用

• 研究課題/領域番号: 15590667
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 佐々木 茂 札幌医科大学, 医学部, 助手 (10305229)
• 研究分担者: 山本 博幸 札幌医科大学, 医学部, 助手 (40332910)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2004年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円); 2003年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: メチル化 / NNK / DNAアレイ / 肝癌 / 脱メチル化剤 / NNKラット

研究概要

1.NNK(4-methylnitrosamino-1-(3-pyridyl)-1-butanoneによる肝癌の作成
Fischer 344ラットを用い、NNK(50mg/kg)を週3回投与し、ラット肝癌を作成した。
2.NNKラット肝癌組織における癌関連遺伝子のDNAアレイ解析
NNK投与により作成したラット肝癌組織における癌関連遺伝子のmRNAレベルでの発現の変化を検討した。結果は43遺伝子のmRNAの発現低下が認められた。
3.NNKラット肝癌組織における癌関連遺伝子のメチル化
これらの発現低下を認めた遺伝子について、MSP法を用い、メチル化の有無を検討した。結果はp16およびE-cadherinのメチル化を認めたのみであった。なお、これらの蛋白発現について、免疫組織学的に検討したところ、いずれも蛋白発現の低下も認めた。
4.ラット肝癌に対する脱メチル化剤による発癌抑制および抗癌効果
脱メチル化剤5-aza-2'deoxycytidineによる肝発癌抑制効果の検討では、NNKを投与開始し、これと同時に脱メチル化剤(1mg/kg)を週1回5週腹腔内に投与し、NNKによる肝発癌が抑制されるか否かの検討を行なったが、コントロールに比較して、発癌抑制効果は認められなかった。さらに、NNKを20週先行投与し肝癌を作成し、その後、脱メチル化剤を投与し、肝癌の進行阻止が可能かどうかの検討を行ったが、やはり有意な効果は見られなかった。また、脱メチル化剤投与による癌関連遺伝子の変化についてDNAアレイで解析を行ったが、有意な相違は見出せなかった。特に、p16およびE-cadherinの遺伝子メチル化に対する脱メチル化剤の効果は認められなかった。一方、脱メチル化剤によると思われる臓器障害は組織学的には認められなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Monoclonal antibodies as effective therapeutic agents for solid tumors. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hinoda Y. et al.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 95 ページ: 621-625
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Monoclonal antibodies as effective therapeutic agents for solid tumors (2004)
  • 著者名/発表者名: Hinoda Y, Sasaki S, Ishida T, Imai K.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 95(8) ページ: 621-625
  • NAID: 80016809427
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Integration of interferon-α/β signaling to p53 responses in tumour suppression and antiviral defence. (2003)
  • 著者名/発表者名: Takaoka A. et al.
  • 雑誌名: Nature 424 ページ: 516-523
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Differential roles of alterations of p53, p16, and SMAD4 expression in the progression of intraductal papillary-mucinous tumors of the pancreas. (2003)
  • 著者名/発表者名: Sasaki S. et al.
  • 雑誌名: Oncol Rep. 10 ページ: 21-25
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Integration of interferon-α/β signaling to p53 responses in tumour suppression and antiviral defence (2003)
  • 著者名/発表者名: Takaoka A, Hayakawa S, Yanai H, Stoiber D, Negishi H, Kikuchi H, Sasaki S, Imai K, Shibue T, Honda K, Taniguchi T.
  • 雑誌名: Nature 424(6948) ページ: 516-523
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Differential roles of alterations of p53, p16, and SMAD4 expression in the progression of intraductal papillary-mucinous tumors of the pancreas (2003)
  • 著者名/発表者名: Sasaki S, Yamamoto H, Kaneto H, Ozeki I, Adachi Y, Takagi H, Matsumoto T, Itoh H, Nagakawa T, Miyakawa H, Muraoka S, Fujinaga A, Suga T, Satoh M, Itoh F, Endo T, Imai K.
  • 雑誌名: Oncol Rep. 10(1) ページ: 21-25
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Takaoka A., Sasaki S., et al.: "Integration of interferon-alpha/beta signaling to p53 in tumour suppression and antiviral defence."Nature. 424. 516-523 (2003)
• [文献書誌] Sasaki S., et al.: "Differential roles of alterations of p53, p16, and SMAD4 expression in the progression of intraductal papillary-mucinous tumors of the pancreas."Oncol.Rep.. 10. 21-25 (2003)