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腎間質線維化の進展におけるHIF-1を中心とした低酸素応答の関与

研究課題

研究課題/領域番号 15590854
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 腎臓内科学
研究機関奈良県立医科大学

研究代表者

岩野 正之  奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (20275324)

研究分担者 斎藤 能彦  奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (30250260)
研究期間 (年度) 2003 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2004年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2003年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
キーワード間質線維化 / HIF-1α / VHL / FSP1 / 低酸素
研究概要

本研究の目的は、低酸素応答で中心的な役割を果たすことが知られているhypoxia inducible factor-1 (HIF-1)が腎間質線維化の進展に関与することを明らかにすることである。
1.低酸素刺激と腎間質線維化の進展
C57BL/6マウスの一側尿管を結紮し、腎間質線維化モデルであるUUOマウスを作製した。Sham operation群、尿管結紮後4日目、8日目、12日目、および16日目の結紮側腎を摘出した後、Hypoxyprobe (Chemicon社)を用いて、腎組織中の低酸素領域を検出した。尿管結紮後8日目、12日目、および16日目の近位尿細管上皮細胞に強いHypoxyprobeの集積が認められた。したがって、間質線維化の進展に伴って尿細管上皮細胞は低酸素状態になることが明らかとなった。
2.初代培養の尿細管上皮細胞におけるEMTの誘導
Cre-loxPシステムを用いて、尿細管上皮細胞をLacZでパーマネント標識した遺伝子改変マウスの摘出腎を用いて、尿細管上皮細胞の初代培養を行った。1%O2培養下でEMTの誘導について検討した。蛍光抗体法で、LacZをCy3(赤)、FSP1をCy2(緑)で標識し、Cy3+.Cy2+細胞をEMT由来の線維芽細胞と判定した。低酸素培養3日後には、20%O2培養下に比して1%O2培養下では、EMT由来の線維芽細胞数が有意に増加していた。
3.Von Hippel-Lindau tumor suppressor (VHL)遺伝子改変マウスにおける腎間質線維化の検討
Cre-loxPシステムを用いて、尿細管上皮細胞で特異的にVHL遺伝子を欠損させたマウスを作製した。VHLは、HIF-1αのユビキチンリガーゼとして作用することが知られている。尿細管上皮細胞でVHL遺伝子をターゲッテイングすることで、尿細管上皮細胞特異的にHIF-1が安定化される。UUOマウスでVHL遺伝子改変マウスに腎間質線維化を誘導し、HIF-1が間質線維化の進展に関与するか否かを検討した。左腎尿管結紮後8日目に、両腎を摘出し、抗FSP1抗体を用いた酵素抗体法を実施した。結紮側腎でのFSP1陽性細胞数は著明に増加していたが、コントロールマウスにおけるFSP1陽性細胞数も増加しており、有意差が認められなかった。非結紮側におけるFSP1陽性細胞数は、コントロールマウスに比してVHL遺伝子改変マウスで有意に増加していた。

報告書

(3件)
  • 2004 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2005 2004 その他

すべて 雑誌論文 (7件) 文献書誌 (1件)

  • [雑誌論文] Fibroblast-specific protein 1 is a specific prognostic marker for renal survival in patients with IgA nephropathy2005

    • 著者名/発表者名
      Nishitani Y, Iwano M et al.
    • 雑誌名

      Kidney Int (In press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Mechanisms of tubulointerstitial fibrosis2004

    • 著者名/発表者名
      Iwano M et al.
    • 雑誌名

      Curr Opin Nephrol Hypertens 13(3)

      ページ: 279-284

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] 線維芽細胞を中心とした間質線維化の発症機構について2004

    • 著者名/発表者名
      岩野正之
    • 雑誌名

      関西実験動物研究会会報 25

      ページ: 3-6

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] 組織の線維化と筋線維芽細胞:起源とその運命2004

    • 著者名/発表者名
      岩野正之
    • 雑誌名

      炎症と免疫 12(6)

      ページ: 35-40

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Mechanisms of tubulointerstitial fibrosis2004

    • 著者名/発表者名
      Masayuki Iwano
    • 雑誌名

      Curr Opin Nephrol Hypertens 13(4)

      ページ: 279-284

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Mechanisms of tubulointerstitial fibrosis2004

    • 著者名/発表者名
      Masayuki Iwano
    • 雑誌名

      Curr Opin Nephrol Hypertens 13(3)

      ページ: 279-284

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Fibroblast-specific protein 1 is a specific prognostic marker for renal survival in patients with IgA nephropathy

    • 著者名/発表者名
      Yoshiharu Nishitani, Masayuki Iwano et al.
    • 雑誌名

      Kidney Int (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iwano M, Neilson EG: "Mechanisms of tubulointerstitial fibrosis"Current Opinion in Nephrology and Hypertension. in press.

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

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公開日: 2003-04-01   更新日: 2016-04-21  

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