| 研究概要 |
aldosteroneとNHE活性亢進の調節機序を解明するため,ratの培養血管平滑筋細胞(VSMC)を準備し,pH感受性色素を用いて細胞内pH(pH_i)を測定した.NHE活性は塩化アンモニウム(NH_4Cl)付加と細胞外Na^+除去後の酸負荷から,細胞外Na^+を元に戻したときのpH_iの回復速度と細胞内緩衝力(β)の積で求められるプロトンの細胞内から細胞外への排泄量(J_H)で評価した.溶液はすべてCO_2/HCO_3^--free溶液を用いた.我々のグループは,ratの培養VSMCにaldosterone(10^<-6>M)を添加すると,3時間後からNHE活性が亢進し24時間まで持続すること,3時間後の作用は核を介さない非genome作用,24時間後の作用は核を介するゲノム作用であることを証明していた.今回,さらに,細胞外Na^+濃度を変化させNa^+依存性pH_i回復からの酸排泄量を指標とするNHE活性から,Lineweaber-Burk plotの解析をすると,K_mが変化せずV_<max>が増加することから,aldosferone投与3時間後,24時間後のNHE活性亢進は細胞膜上のNHEの数が増加すること,aldosterone投与3時間後の非genome作用によるNHE活性亢進はmineralocorticoid受容体の選択的拮抗薬であるeplerenoeneで抑制されないが,24時間のgenome作用は抑制されること,を証明した.また,spironolactoneよりeplerenoneがより低濃度でNHE活性を抑制することも証明した.
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