不死化ヒトストローマ細胞を用いた人工骨髄の開発

• 研究課題/領域番号: 15591014
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 松永 卓也 札幌医科大学, 医学部, 講師 (70260768)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2003年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
• キーワード: 不死化ヒト骨髄ストローマ細胞 / 人工骨髄 / 臍帯血 / CD34陽性細胞 / 赤血球 / 血小板 / 不死化ヒトストローマ細胞

研究概要

hTERT導入ストローマ細胞を用いて増幅させた臍帯血由来のCD34陽性細胞を血小板に分化/増殖させる実験を行った。血小板への分化増殖は2段階によった。1st phase(day0-14)では、hTERT導入ストローマ細胞と共に、SCF, TPO, FL, IL-11の存在下で14日間培養した。2nd phase(day15-28)では、SCF, TPO, FL, IL-11の存在下で14日間液体培養した。得られた血小板の機能を(i)ADP添加によりP-selectin(CD62p)とactivated GPIIbIIIa(PAC1)の発現変化で解析する方法(FACS)および(ii)ADPとfibrinogenを添加して血小板凝集を観察する方法(位相差顕微鏡)を用いて検討した。臍帯血CD34陽性細胞5×10^2個から、CD41陽性細胞、巨核球、血小板をそれぞれ(2.9±0.5)×10^5個、(2.8±0.2)×10^4個、(3.6±0.4)×10^6個得ることが可能であった。この結果は1単位に相当する臍帯血(CD34陽性細胞5×10^6個)から1.8単位の濃厚血小板製剤に相当する数(3.6×10^<10>個)の産生が可能なことを示唆する。また作成した血小板の機能は健常人のそれと同等であることが確認された。

研究成果

• [雑誌論文] Decrease of Smad4 gene expression in patients with essential thrombocythaemia may cause an escape from suppression of megakaryopoiesis by transforming growth factor-b1 (TGF-b1). (2004)
  • 著者名/発表者名: Kuroda H, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Br J Haematol 124 ページ: 211-220
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Indian hedgehog gene transfer augments hematopoietic support of human stromal cells including NOD/SCID-β2m-/- repopulating cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kobune M, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Blood 104 ページ: 1002-1009
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Fas-mediated apoptosome formation is dependent on reactive oxygen species derived from mitochondrial permeability transition in jurkat cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: J Immunol 173 ページ: 285-296
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Recovery of neutrophil count by ganciclovir in patients with chronic idiopathic neutropenia associated with cytomegalovirus infection in bone marrow stromal cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Hirayama Y, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Int J Hematol 79 ページ: 337-339
  • NAID: 10013082044
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Glutathione-S-transferase P1-1 protects aberrant crypt foci from apoptosis induced by deoxycholic acid. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nobuoka A, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 428-443
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Chemoprevention of colorectal cancer. (2004)
  • 著者名/発表者名: Niitsu Y, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Cancer Chemother Pharmacol 54 Suppl 1
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Plasma GSTP1-1 as a prognostic factor in patients with advanced non-Hodgkin's lymphoma (stages III and IV). (2004)
  • 著者名/発表者名: Katahira T, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 10 ページ: 7934-7940
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Decrease of Smad4 gene expression in patients with essential thrombocythaemia may cause an escape from suppression of megakaryopoiesis by transforming growth factor-(31 (TGF-β1) (2004)
  • 著者名/発表者名: Kuroda H, Matsunaga T, Terui T, Tanaka I, Takimoto R, Fujikawa K, Takayama T, Kato J, Hirayama Y, Sakamaki S, Kohda K, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Br J Haematol 124 ページ: 211-220
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Indian hedgehog gene transfer augments hematopoietic support of human stromal cells including NOD/SCID-β32m-/- repopulating cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Kobune M, Ito Y, Kawano Y, Sasaki K, Uchida H, Nakamura K, Dehari H, Chiba H, Takimoto R, Matsunaga T, Terui T, Kato J, Niitsu Y, Hamada H.
  • 雑誌名: Blood 104 ページ: 1002-1009
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Fas-mediated apoptosome formation is dependent on reactive oxygen species derived from mitochondrial permeability transition in jurkat cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Machida, T, Takahashi S, Iyama S, Sato Y, Kuribayashi K, Takada K, Oku T, Kawano Y, Okamoto T, Takimoto R, Matsunaga T, Takayama T, Takahashi M, Kato J, Niitsu Y.
  • 雑誌名: J Immunol 173 ページ: 285-296
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Recovery of neutrophil count by ganciclovir in patients with chronic idiopathic, neutropenia associated with cytomegalovirus infection in bone marrow stromal cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Hirayama Y, Sakamaki S, Tsuji Y, Chiba H, Matsunaga T, Takimoto R, Kato J, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Int J Hematol 79 ページ: 337-339
  • NAID: 10013082044
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Glutathione-S-transferase P1-1 protects aberrant crypt foci from apoptosis induced by deoxycholic acid (2004)
  • 著者名/発表者名: Nobuoka A, Takayama T, Miyanishi K, Sato T, Takanashi K, Hayashi T, Kukitsu T, Sato Y, Takahashi M, Okamoto T, Matsunaga T, Kato J, Oda M, Azuma T, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 428-443
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Chemoprevention of colorectal cancer (2004)
  • 著者名/発表者名: Niitsu Y, Takayama T, Miyanishi K, Nobuoka A, Hayashi T, Kukitsu T, Takanashi K, Ishiwatari H, Abe T, Kogawa T, Takahashi M, Matsunaga T, Kato J.
  • 雑誌名: Cancer Chemother Pharmacol 54 Suppl 1
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Plasma GSTP1-1 as a prognostic factor in patients with advanced non-Hodgkin's lymphoma (stages III and IV) (2004)
  • 著者名/発表者名: Katahira T, Takayama T, Miyanishi K, Hayashi T, Ikeda T, Takahashi Y, Takimoto R, Matsunaga T, Kato J, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 10 ページ: 7934-7940
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Ex vivo expansion of human umbilical cord blood hematopoietic progenitor cells using a co-culture system with human telomerase catalytic subunit (hTERT) transfected human stromal cell. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kawano Y, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Blood 101 ページ: 532-540
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Telomerized human multipotent mesenchymal cells can differentiate into hematopoietic and cobblestone area-supporting cells. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kobune M, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Exp Hematol 31 ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Thrombopoietin concentrations in peripheral blood correlated with platelet numbers in two patients with thrombocytopenia by chronic graft-versus-host disease. (2003)
  • 著者名/発表者名: Hirayama Y, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Am J Hematol 73 ページ: 285-289
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Inhibition of type I procollagen production by tRNAVa1CTE-HSP47 ribozyme. (2003)
  • 著者名/発表者名: Hagiwara S, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: J Gene Med 5 ページ: 784-794
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Interaction between the leukemic cell VLA4 with stromal fibronectin is a decisive factor for minimal residual disease of acute myelogenous leukemia. (2003)
  • 著者名/発表者名: Matsunaga T, Takemoto N et al.
  • 雑誌名: Nature Med 9 ページ: 1158-1165
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of PIG3 and NOXA through Acetylation of p53 at 320 and 373 Lysine Residues as a Mechanism for Apoptotic Cell Death by Histone Deacetylase Inhibitors. (2003)
  • 著者名/発表者名: Terui T, Matsunaga T et al.
  • 雑誌名: Cancer Res 63 ページ: 8948-8954
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Ex vivo expansion of human umbilical cord blood hematopoietic progenitor cells using a co-culture system with human telomerase catalytic subunit (hTERT) transfected human stromal cell (2003)
  • 著者名/発表者名: Kawano Y, Kobune M, Yamaguchi M, Nakamura K, Ito Y, Sasaki K, Matsunaga T, Kato J, Chiba H, Ikebuchi K, Niitsu Y, Hamada H.
  • 雑誌名: Blood 101 ページ: 532-540
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Telomerized human multipotent mesenchymal cells can differentiate into hematopoietic and cobblestone area-supporting cells (2003)
  • 著者名/発表者名: Kobune M, Kawano Y, Ito Y, Chiba H, Nakamura K, Tsuda H, Sasaki K, Dehari H, Uchida H, Honmou O, Takahashi S, Bizen A, Takimoto R, Matsunaga T, Kato J, Kato K, Houkin K, Niitsu Y, Hamada H.
  • 雑誌名: Exp Hematol 31 ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Thrombopoietin concentrations in peripheral blood correlated with platelet numbers in two patients with thrombocytopenia by chronic graft-versus-host disease (2003)
  • 著者名/発表者名: Hirayama Y, Sakamaki S, Tsuji Y, Sagawa T, Chiba H, Matsunaga T, Kuroda H, Kusakabe T, Akiyama T, Kato J, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Am J Hematol 73 ページ: 285-289
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Inhibition of type I procollagen production by tRNAValCTE-HSP47 ribozyme (2003)
  • 著者名/発表者名: Hagiwara S, Nakamura K, Hamada H, Sasaki K, Ito Y, Kuribayashi K, Sato T, Sato Y, Takahashi M, Kogawa K, Kato J, Terui T, Takayama T, Matsunaga T, Taira K, Niitsu Y.
  • 雑誌名: J Gene Med 5 ページ: 784-794
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Interaction between the leukemic cell VLA4 with stromal fibronectin is a decisive factor for minimal residual disease of acute myelogenous leukemia (2003)
  • 著者名/発表者名: Matsunaga T, Takemoto N, Sato T, Takimoto R, Tanaka I, Fujimi A, Akiyama T, Kuroda H, Kawano Y, Kobune M, Kato J, Hirayama Y, Sakamaki S, Kohda K, Miyake K, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Nature Med 9 ページ: 1158-1165
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of PIG3 and NOXA through Acetylation of p53 at 320 and 373 Lysine Residues as a Mechanism for Apoptotic Cell Death by Histone Deacetylase Inhibitors (2003)
  • 著者名/発表者名: Terui T, Murakami K, Takimoto R, Takahashi M, Takada K, Murakami T, Minami S, Matsunaga T, Takayama T, Kato J, Niitsu Y.
  • 雑誌名: Cancer Res 63 ページ: 8948-8954
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より