| 研究課題/領域番号 |
15591169
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
皮膚科学
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
小林 孝志 千葉大学, 医学部附属病院, 講師 (90234830)
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| 研究分担者 |
輪千 浩史 星薬科大学, 薬学部, 講師 (50318614)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2004年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2003年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | マトリックスメタロプロテイネイス-9 / アポトーシス / 分化 / HT1080細胞 / ケラチノサイト / 線維芽細胞 / レプトマシシンB / 中毒性表皮壊死症 / KRE-M9 / DRF-1 / 紫外線 / UVB / Leptomycin B / Toxic epidermal necrolysis / RNAi / マトリックスメタロプロテイネイス / MMP-9 / MMP-2 / TIMP-1 / TIMP-2 / TPA responsive element |
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| 研究概要 |
マトリックスメタロプロテイネイス(matrix metalloproteinase (MMP))-9発現の炎症など皮膚疾患病態への関わりが示され、またMMP-9遺伝子promoter中のKRE-M9がrepressorとしてdifferentiation repressing factor (DRF)-1と結合し、代謝に関わることが研究代表者により発見され、MMP-9および関連分子発現の制御による治療への基礎的研究を行なった。
1.DRF-1、MMP-9に対するRNAi、KRE-M9に対するdecoy oligonucleotide(ONs)の効果についての検討- HT1080やヒトケラチノサイト(KC)の培養細胞に対してDRF-1、またMMP-9に対するRNAiを施行したところ、前者ではアポトーシスが誘導されたのに対して後者では逆に抑制された。またMMP-9についてのdecoy ONsを遺伝子導入した結果、MMP-9発現が亢進し、アポトーシスが誘導された。
2.MMP-9発現阻害物質、および疾患モデルについての検討- 転写因子関連蛋白などの核外移送を制御するレプトマシシンBを投与した結果、1)KCでは、MMP-2と比較してMMP-9発現を選択的に抑制し、本転写活性抑制にはKRE-M9など多領域が関わることが判明し、2)紫外線照射マウスヘの本剤の投与により、表皮での異常角化および真皮、皮下組織の炎症性細胞浸潤の抑制、およびMMP-9発現誘導の抑制を確認、本剤の有用性が示唆された。
3.皮膚疾患でのMMP-9の関わりについての検討- 1)中毒性表皮類壊死症罹患者血中で、病初期に、MMP-2と比較してMMP-9発現の亢進を認めた。2)n situ zymograph法で、MMP-9活性によると考えられる酵素活性を有棘細胞癌の腫瘍浸潤部と角化亢進部に検出した。3)通常MMP-2のみを分泌しMMP-9を分泌しない線維芽細胞でアポトーシスや炎症を惹起するサイトカインでMMP-9分泌誘導を確認した。
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