| 研究課題/領域番号 |
15591596
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
整形外科学
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
朴木 寛弥 (2004) 奈良県立医科大学, 医学部, 助手 (40336863)
森下 亨 (2003) 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (80326321)
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| 研究分担者 |
三井 宣夫 (三井 宜夫) 奈良県立医科大学, 医学部, 名誉教授 (70145845)
朴木 寛弥 奈良県立医科大学, 医学部, 助手 (40336863)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2004年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2003年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
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| キーワード | 骨肉腫 / 悪性線維性組織球腫 / tyrosine kinase inhibitor / CDK inhibitor / 2-methoxyestradiol / histone deasethylase inhibitor / mitochondria / hypoxia inducible factor / 肉腫 / 酸素分圧 / 微小環境 |
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| 研究概要 |
1)ラット骨肉腫およびMFH細胞に対するtyrosine kinase inhibitor STI571の効果
ラット骨肉腫およびMFH細胞に対しtyrosine kinase inhibitor STI571は、いずれの細胞株に対しても、濃度・時間依存性に増殖抑制効果を示した。抑制率は、10μM・72時間処置で骨肉腫が約20%にとどまったのに対し、MFHでは約40%の抑制効果を認めた。関連するtyrosine kinaseの発現を検索したところ、PDGFRαの発現がMFHで有意に高かったのに比しPDGFRβ発現は同等に認め、c-kit発現はいずれにおいても認められなかった。
2)ラット骨肉腫、MFHおよび肺腺癌細胞におけるp16^<INK4a>発現とflavopiridol (HMR1275)の効果
ラット骨肉腫およびMFH細胞ではp16^<INK4a>発現を認めたが、肺腺癌細胞では発現は認められなかった。Methylation specific-PCRでは、肺腺癌にのみmethylated DNAを認め、bisulfite sequencingでは骨肉腫細胞でcoding regionのすぐ上流のCpG islandsが高メチル化されているのに対し、肺腺癌においてはTATA box近傍のCpG islandsが一貫してメチル化されていた。いずれの細胞に対してもflavopiridol (HMR1275)は時間・濃度依存性に増殖を抑制したが、p16^<INK4a>の発現を認めない肺腺癌細胞に対する効果が最も強く300nM-72時間処置で増殖抑制率は約80%に達し、骨肉腫、MFHに対しても約60%の抑制率を示した。肺腺癌、骨肉腫に対しては、5-aza 2'-deoxycytidineによるp16^<INK4a> inductionにより、100nMの濃度で500nMに匹敵する効果が得られた。
3)ラット骨肉腫およびMFH細胞に対する2-methoxyestradiol及びhistone deasethylase inhibitorの効果
いずれの薬剤も濃度・時間依存性に細胞増殖を抑制した。現在、その抑制メカニズムと上記薬剤も含めてhypoxia inducible factorの発現変化に関し検討を重ねている。
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