| 研究課題/領域番号 |
15591694
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
泌尿器科学
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
関 成人 九州大学, 大学病院, 講師 (90294941)
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| 研究分担者 |
西村 淳二 九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (90237727)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
2004年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2003年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | 細胞内カルシウム / ヒト排尿筋 / カルシウム感受性 / Rho kinase / Protein kinase C / カルバコール / ヒト前立腺 / 過活動膀胱 |
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| 研究概要 |
ヒト膀胱平滑筋収縮におけるCa^<2+>感受性増加機序の関与、およびその情報伝達経路におけるRho kinase (ROCK)およびProtein kinase C (PKC)の関与について検討した。
1.Carbachol (CCh:ムスカリン受容体アゴニスト)収縮における[Ca^<2+>]_iと発生張力の同時測定
CCh(1μM)および脱分極刺激(60 mM K^+)に対する[Ca^<2+>]_i変化と発生張力の同時測定記録結果から、CCh刺激よる[Ca^<2+>]_i上昇は脱分極刺激のそれと比較して同程度であったが、発生張力はCCh刺激の方が3倍程大きかった。
2.Carbachol収縮におけるCa^<2+>感受性の増加(α-toxin脱膜化標本)
α-toxin脱膜化標本を用いて、CChがヒト膀胱平滑筋のCa^<2+>感受性に与える影響について検討した。300nM Ca^<2+>と10μM GTPにより惹起された収縮反応が安定したところでCChを投与すると、[Ca^<2+>]_iが一定の条件にもかかわらず、さらなる収縮反応を生じた。また、[Ca^<2+>]_i-収縮反応曲線はCCh投与によって有意に左にシフトした。
3.平滑筋Ca^<2+>感受性増加に関与するタンパクの発現
Western blot法を用いて検討した結果、RhoA, ROCK I, ROCK II, CPI-17の発現が確認された。
4.Ca^<2+>感受性増加の細胞内情報伝達
CCh収縮の持続相にY-27632(ROCK阻害薬:3μM)あるいはGF109203X(PKC阻害薬:3μM)を投与すると、[Ca^<2+>]_iはほとんど低下しないにも関わらず、張力が大きく低下した。また、α-toxin脱膜化標本においても、300nM Ca^<2+>と10μM GTPおよび1μM CChにより惹起された収縮反応が安定したところでY-27632(3μM)あるいはGF109203X(3μM)を投与すると、[Ca^<2+>]_iが一定の条件にもかかわらず、弛緩反応を生じた。
以上の結果から、ヒト膀胱平滑筋の収縮にはRhoA-ROCK pathwayあるいはPKC-CPI-17 pathwayを介したCa^<2+>感受性調節機序も関与していることが示唆された。これらの機序の調節は、新たな排尿障害治療薬のターゲットとなる可能性が考えられた。
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