| 研究課題/領域番号 |
15591750
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
三春 範夫 (2004) 広島大学, 病院, 講師 (30253082)
大濱 紘三 (2003) 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (20034118)
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| 研究分担者 |
佐村 修 広島大学, 病院・助手 (90314757)
三春 範夫 広島大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (30253082)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2004年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2003年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
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| キーワード | 胞状奇胎 / hCG / Short tendem repeat marker / 母体血 / 絨毛由来DNA / 定量的PCR / 蛍光PCR / SRY / Short tandem repeat marker / 定量的PCR法 / 蛍光PCR法 / 起源解析 |
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| 研究概要 |
【目的】奇胎絨毛から産生されるDNA(父親由来)を母体血中から検出し、これが全胞状奇胎の続発症発生予知に有用なマーカーとして使用出来るか否かを検討した。その準備段階として絨毛が産生するhCGと胎児DNAが相関を認めるかどうか、そして、各染色体上の多型領域であるShort tandem repeat(STR) markerを用い母体血清中に胎児絨毛由来DNAの検出が可能であるかどうかを目的とした。さらに妊娠28週で分娩した胞状奇胎合併妊婦において母体血中の胎児絨毛由来DNAの検出が可能かさらに臨床的に絨毛性疾患のマーカーとして検出可能かどうか検討した。【対象および方法】男児を妊娠している正常妊婦20名より,血液を採取し血清部分からDNAを抽出し、これによって得られたDNAをY染色体上に特異的なSRY遺伝子領域のプライマーを用いてTaqman法を利用した定量的PCR法を行い検体1mlあたりのY領域のコピー数を検討した。同時に血清中のHCGを測定しその相関を調べた。また、女児を妊娠している妊婦から同様に血清からDNAを抽出し、そのDNAをShort tandem repeat(STR) marker領域の蛍光PCRで増幅し、その増幅産物をDNAシークエンサーに電気泳動し胎児絨毛由来DNAの検出を行った。46,XX女児と46,XY胞状奇胎の合併妊婦の母体血中の胎児絨毛由来DNAの検出をSRY遺伝子領域の定量化し行い、母体血中のβHCGとの相関を調べた。また、分娩後いつまで胞状奇胎由来のDNAが検出できるか検討した。【結果】男児を妊娠している正常妊婦において血清中のHCGとSRY遺伝子濃度は相関関係を認めた。女児を妊娠した症例においても、胎児絨毛由来のDNAが母体血清中に確認された。胞状奇胎合併妊婦から絨毛由来DNAの検出が可能であり。血中のHCGの推移と同様な動きを示した。妊娠20週に時点で絨毛由来DNAは最も高値を示し、分娩後5週まで検出された。【結論】胎児絨毛由来DNAが母体血中に明らかに存在し、検出できることが確認された。また、奇胎娩出後の再発マーカーとして使用されるhCGと相関関係を示すことから胞状奇胎の続発症予知のマーカーとして同様に用いることができる可能性が示唆された。
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