| 研究概要 |
アレルギー性鼻炎や鼻茸における肥満細胞の新たな役割を明らかにすることを目的に、Genechipを用いて以下のような実験を計画した。まずアレルギー性鼻炎患者、鼻茸を伴う副鼻腔炎患者、アスピリン喘息患者の下鼻甲介粘膜または鼻茸から分離した前駆細胞からMC(T)とMC(TC)肥満細胞の培養細胞系を作製した。次に、これらの培養細胞を用いて以下のような実験を行った。Genechipを使い、鼻粘膜MC(T)とMC(TC)のトランスクリプトームの比較解析を各疾患間で検討。各MC(T)MC(TC)において、FcεRIやTLRを介した刺激によるサイトカイン・ケモカインの比較検索。実験(2)で検索したサイトカイン・ケモカインが、蛋白レベルでも同じようにその発現を検討した。アレルギー性鼻炎やアスピリン喘息を伴う鼻茸にはFcεRIの発現を増加した。MC(TC)肥満細胞がCCR3,CCR5が発現しFcεRを介した刺激によってGMCSF, IL-4,IL-5,IL-6,IL-8,IL-13,IL-16,Eotaxinを発現した。TLRを介した刺激によってGMCSF, IL-5,IL-6,IL-8,IL-10,IL-13,IL-16,RANTESを発現した。
アレルギー性鼻炎患者の鼻粘膜上皮層には肥満細胞が顕著に増加していることは良く知られている。我々はアレルギー性鼻炎患者の鼻粘膜上皮層に増加するMC(T)肥満細胞の遊走因子がRANTESであること、またSCFはMC(TC)肥満細胞のキマーゼの発現を調節していることを明らかにしている。手術により採取した下鼻甲介からCD34+肥満細胞前駆細胞を、FACS sortingにて単離した。これをSCFとIL-6の存在かに96穴培養プレートでメチルセルロースを用いたcolony cultureした。約10^7個の各々の培養細胞からmRNAを分離し、Genechipより解析している。
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