進行性多巣性白質脳症のモデル動物の作製

• 研究課題/領域番号: 15659091
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 澤 洋文 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (30292006)
• 研究分担者: 本山 昇 国立長寿医療センター, 研究所・老年病研究部, 室長 (50277282)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2003年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
• キーワード: Jc virus / ヌードマウス / siRNA / JC virus / 感染モデルマウス / 脳内接種 / 転写調節因子

研究概要

進行性多巣性白質脳症(progressive multifocal leukoencephalopathy : PML)の原因ウイルスであるJC virus(JCV)の感染はその転写調節によって制御される事が予想される。しかしながらJCV感染は人以外の動物には起こらず、このことからPMLのモデル動物は現在存在していない。本研究では現在確実な治療法が確立されていないPMLに対する治療法の開発の礎として、JCV感染細胞脳内接種による感染マウスの作製およびJCVの転写調節因子を脳に発現するトランスジェニックマウスの作製を目的として、本研究を行なった。
その結果(1)JCV感染細胞をヌードマウスの脳内に接種し、JCV感染モデルマウスを作製することに成功した。さらにこのモデルマウスを用いて、in vitroで効果の有ったsiRNAをin vivoで用い、JCV感染細胞の増殖を抑制した。現在この結果をまとめて英文雑誌に投稿する予定である。(2)JCVの感染を制御する因子として、神経系細胞に特異的に発現する転写調節因子を単離する事を目的として、EMSAでJCV感染神経系細胞にのみ認められたbandをカラムを用いて抽出し、転写因子調節複合体の1因子としてCstFを単離した。しかしCstFは種々の細胞に発現を認めていたため、最終的にsubtracted cDNA libraryを用いたyeast two hybrid assayを行い、JCVの感染制御因子を単離することに成功した。現在その因子をoligodendrocyte特異的に発現させうるpromoter下流に発現させ得るベクターを構築し、トランスジェニックマウスに利用する事を計画している。

研究成果

• [雑誌論文] Synthetic double-stranded RNA [poly (I:C)] combined with mucosal vaccine protects against influenza virus infection. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ichinohe T, Watanabe I, Ito S, Moriyama M, Tamura S, Takahashi H, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: J Virol 79 ページ: 2910-2919
• [雑誌論文] Isolation of a monoclonal antibody recognizing a cell-surface molecule as a receptor for JC virus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Henmi C, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 327 ページ: 242-251
• [雑誌論文] Inhibition of virus production in JC virus-infected cells by postinfection RNA interference. (2004)
  • 著者名/発表者名: Orba Y, Sawa H et al.
  • 雑誌名: J Virol 78 ページ: 7270-7273
• [雑誌論文] Nuclear entry mechanism of the human polyomavirus JC virus like article : role of importins and the nuclear pore complex. (2004)
  • 著者名/発表者名: Qu Q, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem 279
• [雑誌論文] Investigation of simian virus 40 large T antigen in 18 autopsied malignant mesothelioma patients in Japan. (2004)
  • 著者名/発表者名: Jin M, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: J Med Virol 74 ページ: 668-676
• [雑誌論文] Variable patterns of varicella-zoster virus reactivation in Ramsay Hunt syndrome. (2004)
  • 著者名/発表者名: Aizawa H, Ohtani F, Furuta Y, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: J Med Virol 74 ページ: 355-360
• [雑誌論文] Protection against influenza virus infection by intranasal administration of HA vaccine with chitin microparticles as an adjuvant. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa H, Ichinohe T, Strong P, Watanabe I, Ito S, Tamura S-i, Takahashi H, Sawa H et al.
  • 雑誌名: J Med Virol 75 ページ: 130-136
• [雑誌論文] Topoisomerase I dissociates human immunodeficiency virus type 1 reverse transcriptase from genomic RNAs. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takahashi H, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 313 ページ: 1073-1078
• [雑誌論文] Nucleolin and the packaging signal, Ψ promote the budding of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1). (2004)
  • 著者名/発表者名: Ueno T, Tokunaga K, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: Microbiol Immunol 48 ページ: 111-118
• [雑誌論文] A novel dynamin-associating molecule, formin-binding Protein 17, induces tubular membrane invaginations and participates in endocytosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kamioka Y, Fukuhara S, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem 279 ページ: 40091-40099
• [雑誌論文] Crk associates with ERM proteins and promotes cell motility toward hyaluronic acid. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsuda M, Makino Y, Iwahara T, Nishihara H, Sawa H, et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem 279 ページ: 46843-46850
• [雑誌論文] JC virus (JCV) agnoprotein colocalizes with tubulin. (2003)
  • 著者名/発表者名: Endo S, Okada Y, Orba Y, Nishihara H, Tanaka S, Nagashima K, Sawa H
  • 雑誌名: J Neurovirol 9(Suppl 1) ページ: 10-14
• [図書] The JC virus-like particle overlay assay. In Methods in Molecular Biology (Lieberman PM (ed)) (2004)
  • 著者名/発表者名: Sawa H, Komagome R
  • 出版者: Humana Press, Totowa, NJ
• [産業財産権] JCウイルスの感染を抑制するAgnoproteinに対するsiRNA配列の決定 (2004)
  • 発明者名: 大場 靖子, 澤 洋文他
  • 権利者名: 科学技術振興機構 理事長 沖村 憲樹
  • 産業財産権番号: 2004-153170
  • 出願年月日: 2004-05-24
• [産業財産権] JCウイルスのVP-1に対するsiRNA、およびそれを含有してなる医薬組成物 (2004)
  • 発明者名: 大場 靖子, 澤 洋文他
  • 権利者名: 科学技術振興機構 理事長 沖村 憲樹
  • 産業財産権番号: 2004-153243
  • 出願年月日: 2004-05-24
• [文献書誌] Shoya Y, Tokunaga T, Sawa H.et al.: "Human topoisomerase I promotes HIV-1 proviral DNA synthesis"Proc Natl Acad Sci USA. 100. 8442-8447 (2003)
• [文献書誌] Ogita H, Kunimoto S, Kamioka K, Sawa H, et al.: "EphA4-mediated Rho activation via Vsm-RhoGEF expressed specifically in vascular smooth muscle cells."Circ Res. 93. 23-31 (2003)
• [文献書誌] Watanabe I, Ross TM, Tamura Si, Ichinohe T, Ito S, Takahashi H, Sawa H, et al.: "Protection against influenza virus infection by intranasal administration of C3d-fused hemagglutinin."Vaccine. 21. 4532-4538 (2003)
• [文献書誌] Ohnishi A, Sawa H, et al.: "Expression of the oligodendroglial lineage-associated markers Olig1 and Olig2 in different types of human gliomas."J Neuropathol Exp Neurol. 62. 1052-1059 (2003)
• [文献書誌] Ricciardiello L, Baglioni M, Giovannini C, Pariali M, Cenacchi G, Ripalti A, Landini MP, Sawa H, et al.: "Induction of Chromosomal Instability in Colonic Cells by the Human Polyomavirus JC Virus."Cancer Res. 63. 7256-7262 (2003)
• [文献書誌] Teramoto T, Kaneko H, Futano M, Sawa H, et al.: "Progressive multifocal leukoencephalopathy in a patient with X-linked agammaglobulinemia."Scand J Infect Dis. 35. 910-911 (2003)