膵島移植における分離膵島の二層法による機能回復に関する研究

• 研究課題/領域番号: 15659313
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 黒田 嘉和 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70178143)
• 研究分担者: 鈴木 康之 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (40304092) ; 谷岡 康喜 神戸大学, 大学院・医学系研究科, COE研究員 (00372649)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2004年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2003年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
• キーワード: 膵島移植 / 二層法 / 膵島培養 / 膵島障害

研究概要

膵島移植において、膵島分離後24〜48時間の培養(例えばRPMI,37℃で培養)を行ったのちに移植することを推奨する報告が多い。我々はこの移植前の膵島に対する培養に二層法を組み合わせ、成績向上を目指した。Wister ratの膵島を分離後、種々の条件で24時間の培養あるいは保存を行い、膵島のviability評価をin vitroで行った。1群:培養・保存なし(control)、2群:RPMI,37℃で培養、3群:二層法(RPMI/PFC)37℃で培養、4群:二層法(RPMI/PFC)4℃で培養、5群:UW,4℃で保存、6群:二層法(UW/PFC)、4℃で保存。Stimulation Indicesはそれぞれ1.3,2.6,3.7,1.2,1.4,2.4で2、3、6群ではインスリン刺激に対する膵島の反応性が良好であった。これら3群における膵島をFDA/PI染色でそのviabilityを比較した結果、2、3、6群でそれぞれ88%,92%,76%で、有意差を認めないものの、二層法(RPMI/PFC)37℃が最も良好な結果を示した。以上より、分離膵島の培養に二層法を応用する手法の有用性を証明した(Hepato-Gastroenterol, in press)。

研究成果

• [雑誌論文] Rescue purification maximized the use of human islet preparations for transplantation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ichii H.
  • 雑誌名: Am J Transplant 5・1 ページ: 21-30
• [雑誌論文] Influence of pancreas preservation on human islet isolation outcomes : impact of the two-layer method (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsujimura T
  • 雑誌名: Transplantation 78・1 ページ: 96-100
• [雑誌論文] Short-term storage of the ischemically damaged human pancreas by the two-layer method prior to islet isolation (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsujimura T.
  • 雑誌名: Cell Transplant 13・1 ページ: 67-73
• [雑誌論文] Superiority of the two-layer method prior to islet isolation confirmed in vivo viability assessment.
  • 著者名/発表者名: Kakinoki K.
  • 雑誌名: Transplantation (未定)(in press)
• [雑誌論文] Impact of the two-layer method on the quality of isolated pancreatic islets.
  • 著者名/発表者名: Takahashi T.
  • 雑誌名: Hepato-Gastroenterol (未定)(in press)
• [文献書誌] Matsuda T, Suzuki Y, Tanioka Y, Toyama H, kakinoki K, Hiraoka K, Fujino Y, Matsumoto S, Kuroda Y: "Pancreas preservation by the two-layer cold storage method before islet isolation protects isolated islets against apoptosis through the mitochondrial pathway"Surgery. 134・3. 437-445 (2003)
• [文献書誌] Takada M, Toyama H, Tanaka T, Suzuki Y, Kuroda Y.: "Augmentation of interleukin-10 expression in islets after brain death"Transplant Proc. (in press).
• [文献書誌] Toyama H, Takada M, Suiuki Y, Kuroda Y.: "Brain death induced expression of ICAM-1 and VCAM-1 on rat hepatocytes."Hepato-Gastroenterol. 50. 1854-1856 (2003)
• [文献書誌] Tsujimura T, Kuroda Y, Shapiro AMJ: "The influence of pancreas preservation on human islet isolation outcomes : Impact of the two-layer method"Transplantation. (in press).
• [文献書誌] Tsujimura T, Kuroda Y, Lakey JRT: "Short-term storage of the ischemically damaged human pancreas by the two-layer method prior to islet isolation"Cell Transplant. (in press).