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哺乳類精子の室温保存法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 15681014
研究種目

若手研究(A)

配分区分補助金
研究分野 資源保全学
研究機関独立行政法人理化学研究所

研究代表者

若山 照彦  独立行政法人理化学研究所, ゲノム・リプログラミング研究チーム, チームリーダー (40360672)

研究期間 (年度) 2003 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
29,770千円 (直接経費: 22,900千円、間接経費: 6,870千円)
2004年度: 7,540千円 (直接経費: 5,800千円、間接経費: 1,740千円)
2003年度: 22,230千円 (直接経費: 17,100千円、間接経費: 5,130千円)
キーワード精子 / 遺伝資源の保存 / 顕微受精 / 室温保存 / 不妊治療 / 非凍結保存 / 生殖細胞 / 核移植 / ES細胞 / 胚移植
研究概要

卵子及び精子の凍結保存には定期的な液体窒素の補充が不可欠であり、長期間安全に維持するためには膨大な経費が必要である。そこで我々は精子および卵子の簡便な室温(非凍結)保存法の開発を試みた。従来の凍結保存に使われている試薬(グリセロールなど)は非凍結保存では毒性を示し、保存後の精子から産子を作ることはできなかった。しかし我々は高濃度のNaClを保存液に加えると精子の保存性が促進されることを発見した。この「塩漬け」方法では、保存中の精子の先体部が破けるなどのダメージが生じ、すべての精子が保存直後に死滅してしまうが、顕微受精技術によってそれらの精子を卵子内へ注入することで室温では10日間、4℃では2ヶ月間保存しても高率に産子へ発育させることが可能になった(Thaun et al., 2005)。これは従来の記録(室温で3日、4℃で1週間)を大幅に塗り替えている。以前我々は精子の凍結乾燥法を開発したが、今回の方法は高価な凍結乾燥機を必要とせず、より簡便な方法である。一方我々はこの方法が卵子にも効果があるかどうか検討してみた。その結果室温で24時間保存した卵子から顕微受精によって産子を作出することに世界で始めて成功した(Wakayama et al., 2004)。これまで卵子の室温保存は数時間が限度とされていたことから、本方法は精子だけでなく卵子においても有効であることが示されている。これらの研究から生殖細胞の保存にはDNAにダメージがなければ、細胞の生き死には重要ではないことが明らかとなった。また我々は生殖細胞を持たない不妊マウスからでも、体細胞核移植技術などを利用して子孫を作出する方法も開発中である(Wakayama et al., 2005)。

報告書

(2件)
  • 2004 実績報告書
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (11件)

すべて 2005 2004 その他

すべて 雑誌論文 (6件) 文献書誌 (5件)

  • [雑誌論文] New Preservation Method for Mouse Spermatozoa Without Freezing.2005

    • 著者名/発表者名
      Van Thuan N, et al.
    • 雑誌名

      Biology of Reprodction 72

      ページ: 444-450

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Propagation of an Infertile Hermaphrodite Mouse Lacking Germ Cells, Using Nuclear Transfer and Embryonic Stem Cell Technology.2005

    • 著者名/発表者名
      Wakayama et al.
    • 雑誌名

      Proc.Natl.Acad.Sci.USA (Cover article of issue) 102

      ページ: 29-33

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Round spermatids stained with Mito Tracker can be used to produce offspring more efficiently.2005

    • 著者名/発表者名
      Hikichi et al.
    • 雑誌名

      Zygote (In press)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Production of offspring from one-day-old oocytes stored at room temperature.2004

    • 著者名/発表者名
      Wakayama et al.
    • 雑誌名

      Journal of Reprodction and Development 50

      ページ: 627-637

    • NAID

      10027323645

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Production of fertile offspring from genetically infertile male mice.2004

    • 著者名/発表者名
      Yanagimachi et al.
    • 雑誌名

      Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101

      ページ: 1691-1695

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Full-term development of offspring using ectopically produced haploid germ cells from fetal male germ cells.2004

    • 著者名/発表者名
      Ohta et al.
    • 雑誌名

      Journal of Reprodction and Development 50

      ページ: 429-437

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [文献書誌] Wakayama S, et al.: "Effect of timing of the removal of oocyte chromosomes before or after injection of somatic nucleus on development of NT embryos"Cloning and stem cells. 5. 181-189 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Ohta H et al.: "Full-term development of offspring using ectopically produced haploid germ cells from fetal male germ cells"Journal of Reproduction and Development. (In press). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Yanagimachi R et al.: "Production of fertile offspring from genetically infertile male mice."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (In press). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Ohta H, et al.: "Commitment of Fetal Male Germ Cells to Spermatogonial Stem Cells During Mouse Embryonic Development."Biology of Reproduction. (In press). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Kishigami S et al.: "Similar time restriction for ICSI and ROSI into activated oocytes for efficient offspring production"Biology of Reproduction. (In press). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

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公開日: 2003-04-01   更新日: 2016-04-21  

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