糖鎖シグナルによる口腔硬組織形成の分子制御機構の解明

• 研究課題/領域番号: 15689025
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 矯正・小児系歯学
• 研究機関: 九州大学 (2004); 長崎大学 (2003)
• 研究代表者: 福本 敏 九州大学, 大学院・歯学研究科, 助教授 (30264253)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 30,030千円 (直接経費: 23,100千円、間接経費: 6,930千円); 2004年度: 8,710千円 (直接経費: 6,700千円、間接経費: 2,010千円); 2003年度: 21,320千円 (直接経費: 16,400千円、間接経費: 4,920千円)
• キーワード: 歯 / エナメル質 / 象牙質 / エナメルマトリックス / 基底膜 / 糖脂質 / 糖蛋白

研究概要

本研究では、歯の発生から脱落に至るまでの、糖鎖機能を解明することを目的としてきた。O型糖鎖結合蛋白であるアメロブラスチンは、ヘパラン硫酸プロテオグリカン結合領域を有し、そのドメインを利用して細胞接着活性をもつマトリックス蛋白として機能し、その結果、エナメル芽細胞の分化及び、エナメル質形成に必須の分子であることが、ノックアウトマウスの解析から明らかとなった。
具体的には、アメロブラスチンはP27の発現誘導を行うことで、エナメル芽細胞の細胞増殖を停止、一方でMsx2などの転写因子発現を制御することで、直接的にアメロジェニンなどのエナメルマトリックスの発現制御をおこなっている可能性が示唆された。従ってアメロブラスチンノックアウトマウスでは、エナメル芽細胞の異常増殖と、アメロジェニンの発現減少、およびこれらに伴うエナメル質の完全欠失が認められた。また、本ノックアウトマウスでは、加齢とともに歯原性腫瘍の生じることから、アメロブラスチンは単にエナメル形成にもならず、口腔硬組織内の歯原性上皮腫瘍形成にも重要な分子であることが明らかとなった。
細胞表面に存在する糖脂質は、様々な増殖因子受容体などの細胞表面局在や、そのシグナル制御に重要であることを明らかにしてきた。歯の発生過程において、この糖脂質の糖鎖構造を修飾するGD3合成酵素の発現に関して解析を進めてきた。その結果、GD3合成酵素遺伝子は、歯胚発生の初期過程において歯原性上皮細胞に強く発現し、その分化とともに発現が減少することが明らかになった。また、GD3合成酵素遺伝子を過剰発現させた歯原性上皮細胞では、細胞増殖因子によって誘導される細胞増殖が亢進することから、GD3合成酵素によって合成される糖鎖構造が、細胞の増殖・分化に重要な役割を演じていることが明らかになった。
以上の結果から、糖鎖シグナルは、歯及び口腔硬組織形成過程において、必須のメカニズムであり、今まで未知の領域であった分野の開拓に貢献できたものと考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Infection-induced up-regulation of the costimulatory molecule 4-1BB in osteoblastic cells and its inhibitor effect on M-CSF/RANKL-induced in vitro osteoclastogenesis (2005)
  • 著者名/発表者名: Saito K., Ohara N., Hotokezaka H., Fukumoto S.et al.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 279(14) ページ: 13555-13563
• [雑誌論文] Differential enhancing effects of alpha2,8-sialyltransferase on the cell proliferation and mobility (2005)
  • 著者名/発表者名: Kamimura Y., Furukawa K., Kittaka D., et al.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 26(2) ページ: 337-344
• [雑誌論文] GD3 synthase gene found expressed in dental epithelium and shown to regulate cell proliferation (2005)
  • 著者名/発表者名: Yamada A., Fukumoto E., Kamasaki Y., et al.
  • 雑誌名: Archives of Oral Biology (in press)
• [雑誌論文] Laminin alpha2 is essential for odontoblast differentiation regulating dentin sialoprotein expression (2004)
  • 著者名/発表者名: Yuasa K., Fukumoto S., Kamasaki Y., Yamada A.et al.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 279(11) ページ: 10289-10292
• [雑誌論文] Overexpressed GM1 suppresses nerve growth factor (NGF) signals by modulating the intracellular localization of NGF receptors and membrane fluidity in PC12 cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Nishio M., Fukumoto S., Furukawa K.et al.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 279(32) ページ: 33368-33378
• [雑誌論文] Ameloblastin is a cell adhesion molecule required for maintaining the differentiation state of ameloblasts (2004)
  • 著者名/発表者名: Fukumoto S., et al.
  • 雑誌名: The Journal of Cell Biology 165(5) ページ: 973-983
• [文献書誌] Nakamura T. et al.: "The Kruppel-like factor Epiprofin is expressed by epithelium of developing teeth, hair follicles, and limb buds and promotes cell proliferation"The Journal of Biological Chemistry. 279(1). 626-634 (2004)
• [文献書誌] Yuasa K. et al.: "Laminin alpha2 essential for odontoblast differentiation regulating dentin sialoprotein expression"The Journal of Biological Chemistry. In press. (2004)
• [文献書誌] Saito K. et al.: "Induction of the costimulatory molecule 4-1BB in Mycobacterium-infected osteoblastic cells and its inhibitory effect on M-CSF/RANKL-induced in vitro osteoclastgenesis"The Journal of Biological Chemistry. In press. (2004)