内耳機能における内向き整流K^+チャネルの分子生物学的・生理的解析

• 研究課題/領域番号: 15790134
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 日比野 浩 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70314317)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円); 2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2003年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
• キーワード: 内向き整流K^+チャネル / 内耳蝸牛 / 内耳高電位 / K^+循環 / 螺旋靱帯 / 線維芽細胞 / 螺旋靭帯

研究概要

聴覚は人や動物にとって不可欠な感覚である。音情報を受容するため高度に分化した器官が内耳蝸牛である。蝸牛は内リンパ液という特殊な液体で満たされている。それは細胞外液であるにも関わらず、約150mMのK^+イオンを含んでおり、電位は約+80mVと非常に高い(内耳高電位)。内リンパ液には、聴覚一次受容器である有毛細胞の感覚毛が触れている。音刺激により内リンパ液のK^+イオンは有毛細胞へ流入し、細胞を興奮させるが、内耳高電位はK^+イオン流入のdriving forceを増大し、音に対する高感受性を形成している。よって、内耳高電位は、聴覚機能にとって必須である。以前より内リンパ液の高K^+・高電位の成立には、蝸牛側壁の、螺旋靱帯と呼ばれる線維芽細胞群や血管状と呼ばれる上皮細胞群に分布する、K^+チャネルを介したK^+イオン動態が深く関わっているとされてきたが、その役割や分子実体は、未だ大部分が不明である。本研究では、K^+チャネルの分子レベルでの同定と生理的機能の解明を目的にした。我々は以前に、内向き整流性K^+チャネルKir4.1が血管状に発現し、側壁を介したK^+イオンの循環を促進させ、高電位の成立に必須であることを報告していた。更に昨年度、別のK^+チャネルKir5.1が、螺旋靱帯の特殊な線維芽細胞に局在していることを明らかにし、K^+イオンの循環を負に制御している可能性を見出した。本年度は、Kir5.1の蝸牛における生理機能を解析する目的で、ノックアウトマウスの作成を開始し、ヘテロマウスを得ることができた。また、新たにK^+イオン循環を制御するトランスポーター分子も見出しつつある。内耳蝸牛のK^+イオンの循環は、Kir4.1、Kir5.1、トランスポーター等のイオン輸送体によって、精密に制御されており、それにより内リンパ液の高K^+・高電位が恒常的に保たれているということが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Differential assembly of inwardly rectifying K^+ channel subunits, Kir4.1 and Kir5.1, in brain astrocytes. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hibino, H. et al.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 279・42 ページ: 44065-44073
  • NAID: 130005446853
• [雑誌論文] Mutation in nucleotide-binding domains of sulfonylurea receptor 2 evokes Na-ATP-dependent activation of ATP-sensitive K^+ channels : implication for dimerization of nucleotide-binding domains to induce channel opening. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yamada, M. et al.
  • 雑誌名: Molecular Pharmacology 66・4 ページ: 807-816
• [雑誌論文] Expression of an inwardly rectifying K^+ channel, Kir5.1, in specific types of fibrocytes in the cochlear lateral wall suggests its functional importance in the establishment of endocochlear potential. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hibino, H. et al.
  • 雑誌名: European Journal of Neuroscience 19・1 ページ: 76-84
• [雑誌論文] Association of β-catenin with the α-subunit of neuronal large-conductance Ca^<2+>-activated K^+ channels. (2004)
  • 著者名/発表者名: Lesage et al.
  • 雑誌名: The Proceeding of National Academy of Science U.S.A. 101・2 ページ: 671-675
• [文献書誌] Hibino, H.et al.: "Expression of an inwardly rectifying K^+ channel, Kir5.1, in specific types of fibrocytes in the cochlear lateral wall suggests its functional importance in the establishment of endocochlear potential."European Journal of Neuroscience. 19・1. 76-84 (2004)
• [文献書誌] Lesage, F.et al.: "Association of β-catenin with the α subunit of neuronal large-conductance Ca^<2+>-activated K^+ channels."The Proceeding of National Academy of Science U.S.A.. 101・2. 671-675 (2004)
• [文献書誌] Keresztes, G.et al.: "Analysis of expression of the RGS9-1 anchoring protein R9AP in the chicken and mouse suggests multiple roles in the nervous system."Molecular and Cellular Neuroscience. 24・3. 687-695 (2003)
• [文献書誌] Ishii, M.et al.: "Differential expression and distribution of Kir5.1 and Kir4.1 inwardly rectifying K^+ channels in retina."American Journal of Physiology ; Cell Physiology. 285・2. C260-C267 (2003)
• [文献書誌] Hibino, H.et al.: "Direct interaction with a nuclear protein and regulation of gene silencing by a variant of the Ca^<2+>-channel β_4 subunit."The Proceeding of National Academy of Science U.S.A.. 100・1. 307-312 (2003)