癌細胞と抗原提示細胞の融合細胞ワクチンによる抗腫瘍効果の検討

• 研究課題/領域番号: 15790406
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 呼吸器内科学
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 鈴木 拓児 東北大学, 病院, 助手 (80344670)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円); 2004年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2003年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
• キーワード: 融合細胞ワクチン / 樹状細胞 / マクロファージ / 腫瘍免疫

研究概要

本研究では、マウスの系で抗原提示細胞と癌細胞との融合細胞を用いた癌免疫療法の抗腫瘍効果について検討した。抗原提示細胞(マウス骨髄由来樹状細胞(DC)および腹腔マクロファージ(Mφ))と癌細胞株(C26)をelectroporation法で細胞融合を行った。その際に、赤と緑の異なる蛍光色素で、あるいは各々の細胞のMHC分子に対する異なる抗体で二種の細胞を標識し、融合効率が約30%であることを確認した。次にin vivoにおける融合細胞による抗腫瘍効果を評価するために、あらかじめ皮下に腫瘍を接種形成したマウスに、3日目と10日目にDCあるいはMφと癌細胞の融合細胞を放射線照射(40Gy)後に2x106個注入したところ、PBS注入コントロール群に比べて有意な腫瘍増大抑制効果がみられ、その効果はDCを用いた系で強かった。また、DCおよびMφのstrainをsyngeneicなものとallogeneicなものの二つの条件で癌細胞と融合細胞を作成しその抗腫瘍効果を検討したところ、いずれの抗原提示細胞においてもallogeneicの系でより強い抗腫瘍効果が得られた。また、各々免疫したマウス脾臓細胞からはCTL活性が誘導された。興味深いことには、syngeneic DCを用いた融合細胞で免疫したマウス脾臓細胞からは、Th1・Th2の両サイトカイン産生が誘導されるのに対して、allogeneic DCを用いた融合細胞の場合はTh2サイトカインの産生は少なく、抗腫瘍効果の期待できるTh1サイトカインのみ誘導されることが示された。以上から、MφやDCを用いた癌細胞との融合細胞は腫瘍免疫療法として有効であり、特にallogeneicの細胞を利用することで、強力な抗腫瘍効果が期待されることが示唆された。次に、更に強い抗腫瘍免疫効果を惹起できるように、サイトカインIL-12遺伝子導入癌細胞とsyngeneicおよびallogeneic DCの融合細胞ワクチンを作成したところ、どちらでも更に強力な腫瘍抑制効果および脾臓細胞のCTL活性誘導を示し、本法におけるサイトカイン遺伝子導入の有用性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Antitumor immune response by CX3CL1 fractalkine gene transfer depends on both NK and T cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Xin H.et al.
  • 雑誌名: Eur, J.Immunol. 印刷中
• [雑誌論文] Vaccination of dendritic cells loaded with interleukin -12- secreting cancer cells augment in vivo antitumor immunity. (2005)
  • 著者名/発表者名: Suzuki T. et al.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res. 11 ページ: 58-66
• [雑誌論文] Systematic identification of human melanoma antigens using serial analysis of gene expression(SAGE). (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki Y. et al.
  • 雑誌名: J Immunother. 28 ページ: 10-19
• [雑誌論文] Adenovirus vector-mediated in vivo gene transfer of OX40 ligand to tumor cells enhances antitumor immunity of tumor -bearing hosts. (2004)
  • 著者名/発表者名: Andarini S. et al.
  • 雑誌名: Cancer Res. 64 ページ: 3281-3287
• [雑誌論文] Dendritic cells pulsed with live and dead Legionella pneumophila elicit distinct immune responses. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi T. et al.
  • 雑誌名: J Immunol. 172 ページ: 1724-1734
• [雑誌論文] Pharmacokinetic analysis of combination chemotherapy with carboplatin and etoposide in small-cell lung cancer patients undergoind hemodialysis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Inoue A. et al.
  • 雑誌名: Ann Oncol. 15 ページ: 51-54
• [文献書誌] Sita A, Kikuchi T, Nukiwa M, Pradono P, Suzuki T, et al.: "Adenovirus vector-mediated in vivo gene transfer of OX40 ligand to tumor cells enhances antitumor immunity of tumor-bearing hosts."Cancer Research. In press. (2004)
• [文献書誌] Kikuchi T, Kobayashi T, Gomi K, Suzuki T, et al.: "Dendritic cells pulsed with live and dead Legionella pneumophila elicit distinct immune responses."J Immunol.. 172. 1727-1734 (2004)
• [文献書誌] Inoue A, Saijo Y, Kikuchi T, Gomi K, Suzuki T, et al.: "Pharmacokinetic analysis of combination chemotherapy with carboplatin and etoposide in small-cell lung cancer patients undergoing hemodialysis."Ann Oncol. 15. 51-54 (2004)
• [文献書誌] Hashimoto SI, Nagai S, Sese J, Suzuki T, et al.: "Gene expression profile in human leukocytes."Blood. 101. 3509-3513 (2003)
• [文献書誌] Nakamura A, Mori Y, Hagiwara K, Suzuki T, et al.: "Increased susceptibility to LPS-induced endotoxin shock in secretory leukoprotease inhibitor (SLPI)-deficient mice."J Exp Med. 197. 669-674 (2003)
• [文献書誌] Hashimoto S, Morohoshi K, Suzuki T, Matsushima K: "Lipopolysaccharide-inducible gene expression profile in human monocytes."Scand J Infect Dis.. 35. 619-627 (2003)