| 研究課題/領域番号 |
15790418
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
呼吸器内科学
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
山田 稚子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50317137)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2004年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2003年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | TLR 4遺伝子変異 / 急性肺損傷 / ペプチドグリカン / エンドトキシン / 肺内シグナル伝達 / KC / CXCL10 / NF-κB / Toll like receptor 4 / C3H / HeJマウス / CD14 |
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| 研究概要 |
【目的】これまでにToll-like receptor 4(TLR4)遺伝子変異を有するマウスで、グラム陰性桿菌の細胞膜成分である大腸菌エンドトキシン(LPS)急性肺損傷が減弱することを報告した。今回、グラム陽性球菌である黄色ブドウ球菌由来のペプチドグリカン(PGN)を気道内に投与し、その後の炎症機転、肺内シグナル伝達にTLR4遺伝子変異が及ぼす影響を比較検討した。
【方法】TLR4遺伝子変異を有するマウスC3H/HeJ(J)と野生型のC3H/HeN(N)を用い、LPS(100μg)またはPGN(30μg)を気管内投与した。6時間後に気管支肺胞洗浄(BAL)を施行した。BAL液中の総細胞数、好中球分画を測定し、また上清中のKC、CXCL10などの各種ケモカイン濃度をELISA法で測定した。また気管内投与3時間後に摘出した肺から核蛋白を抽出し、ゲルシフトアッセイ法によりNF-κB、STATの活性化を評価した。
【結果】LPS投与後にNではBAL液中の総細胞数、好中球分画の有意な増加が見られたが、JではNと比較して有意に減少していた。PGN投与後にはBAL液中の総細胞数、好中球分画の有意な増加が見られ、両系統の間に差はなかった。またBAL液中のCXCL10はNにLPSを投与した場合にのみ、著明に上昇した。KCについても、LPS投与後JはNと比較して低値を示した。LPS投与後のNF-κBの活性はNで有意に上昇したが、JではNと比較して有意に抑制されていた。PGN投与後のNF-κB活性化には両系統で差がなかった。STATはLPS、PGNの投与後に活性化されたが、マウスの系統による差はなかった。
【結論】TLR4遺伝子変異によりLPS投与後の肺内シグナル伝達が抑制されたが、PGNへの反応には差がなかった。菌体成分への生体反応の差にCXCL10などのケモカインが関与している可能性が示唆された。
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