| 研究課題/領域番号 |
15790875
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 山形大学 |
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研究代表者 |
五十嵐 秀樹 山形大学, 医学部, 助手 (80333970)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2004年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2003年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
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| キーワード | 加齢 / カルシウム / ATP / マウス / Ca^<2+>オシレーション / 加齢卵 |
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| 研究概要 |
マウスにて加齢卵モデル(排卵後の卵の加齢:遅延受精モデル)を作成した。加齢卵は受精率の低下、受精後の異常発育が多いことが知られており、これまで我々はこの加齢卵で受精時のカルシウムオシレーションのパターンが変化することを報告した。その原因の一つに細胞内ATPが大きく関与すると仮定し、本研究では加齢にともなう細胞内ATPの変化について検討した。従来、細胞内ATP濃度の測定にはルシフェリン・ルシフェラーゼ法が用いられていたが、これは生細胞での測定が極めて困難な測定法であった。そこで細胞内ATPの変化をMagnesium-Greenにより間接的に評価することにより、生細胞での細胞内ATPのリアルタイムでの測定法を開発した。これにより細胞内カルシウム濃度とATP濃度を同時測定することが可能となった。この方法を用い、受精時のカルシウムオシレーションと細胞内ATP濃度の関係を検討したところ、マウス新鮮卵では受精直後(カルシウムオシレーション開始直後)から、細胞内ATP産生が起こることが明らかとなった。このATP産生の亢進は受精後60分以上も持続した。一方、加齢卵ではこの細胞内ATP産生は抑制されていた。この加齢卵での細胞内ATPの産生低下がカルシウムオシレーションのパターンを変化させ、直接あるいは間接的に胚発育異常を惹起していると推測された。今後、この細胞内ATP濃度測定法は、卵細胞の質の新しい評価法になりうると考えられる。また、将来的に卵細胞の質の改善をターゲットとした不妊治療の開発の一助になると考えられる。
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