子宮内膜症の発生増殖に関与する遺伝子のDNAメチル化による発現調節機構の解明

• 研究課題/領域番号: 15790903
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 小柴 寿人 京都府立医科大学, 医学研究科, 助手 (30347455)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円); 2004年度: 500千円 (直接経費: 500千円); 2003年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
• キーワード: 子宮内膜症 / アロマターゼ

研究概要

子宮内膜症を有する症例の正所性子宮内膜において接着因子(integrin)、増殖因子(VEGF)、サイトカイン(interleukin-6)、酵素(metalloproteinase、17β-hydroxysteroid dehydrogenase type 2、glutathione peroxidase、cyclooxygenase-2)、アポトーシス関連蛋白(Bcl-2)などが強く発現しているが、子宮内膜症を有しない症例の正所性子宮内膜ではそれらの発現はないか弱い。それらの遺伝子のプロモータ領域のDNAメチル化の有無を子宮内膜症を有する症例の正所性子宮内膜と有しない症例の正所性子宮内膜において検討した。遺伝子のプロモータ領域のDNAにメチル化があると転写が抑制され、mRNAとタンパクの発現が減少または消失する。研究方法は、子宮内膜よりゲノムDNAを抽出し、バイサルフェイト処理の後、接着因子、増殖因子、サイトカイン、酵素、アポトーシス関連蛋白のプロモータ領域をPCRで増幅し、ダイレクトシークエンス法によりシークエンスを解読した。CG配列中のCはメチル化がないとバイサルフェイト処理によってTに変換されるが、メチル化があるとTに変換されない。それによって、遺伝子がメチル化されているかどうか判定した。結果は、子宮内膜症を有しない症例でアロマターゼなどの遺伝子のプロモータ領域のDNAメチル化があることが確認され、それが転写を抑制している可能性が示唆された。現在、子宮内膜症を有する症例で研究中である。

研究成果

• [雑誌論文] Genetic contribution of tumor necrosis factor (TNF)-alpha gene promoter (-1031,-863 and -857) and TNF receptor 2 gene polymorphisms in endometriosis susceptibility (2004)
  • 著者名/発表者名: Teramoto M, Kitawaki J, Koshiba H, Kitaoka Y, ObayashiH, Hasegawa G, Nakamura N, Yoshikawa T, Matsushita M, Maruya E, Saji H, Ohta M, Honjo HTeramoto M, Kitawaki J, Koshiba H, Kitaoka Y, ObayashiH, Hasegawa G, Nakamura N, Yoshikawa T, Matsushita M, Maruya E, Saji H, Ohta M, Honjo H
  • 雑誌名: Am J Reprod Immunol Vol.51,No.5 ページ: 352-357
• [雑誌論文] Interferon-gamma gene dinucleotide (CA) repeat and interleukin-4 promoter region (-590C/T) polymorphisms in Japanese patients with endometriosis (2004)
  • 著者名/発表者名: Kitawaki J, Koshiba H, Kitaoka Y, Teramoto M, Hasegawa G, Nakamura N, Yashikawa T, Ohta M, Obayashi H, Honjo H
  • 雑誌名: Hum Reprod Vol.19,No.8 ページ: 1765-1769
• [雑誌論文] Aromatase cytochrome P450 and estrogen and progesterone receptors in uterine sarcons: coitelation with clinical parameters (2004)
  • 著者名/発表者名: Kitaoka Y, Kitawaki J, Koshiba H, Inoue S, Ishihara H, Teramoto M, Honjo H
  • 雑誌名: J Steroid Biochem Mol Biol Vol.88,No.2 ページ: 183-189
• [雑誌論文] Relationships between the serum levels of soluble leptin receptor and free and bound leptin in nopregnant women of reproductive age and women undergoing controlled ovarian hyperstimulation (2003)
  • 著者名/発表者名: Kado N, Kitawaki J, Koshiba H, IshiharaH, Kitaoka Y, Teramoto M, Honjo H
  • 雑誌名: Hum Reprod Vol.18,No4 ページ: 715-720
• [雑誌論文] Giant ovarian tumor removed after preoperative drainage, with abdominoplasty. A case report. (2003)
  • 著者名/発表者名: Koshiba H, Kitawaki J, Fujita H, Honjo H, Okumura J
  • 雑誌名: J Reprod Med Vol.48,No.8 ページ: 652-654