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再生・移植医療用細胞・組織構築物の凍結保存・評価システムの開発

研究課題

研究課題/領域番号 15H03039
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 医用システム
研究機関国立研究開発法人国立成育医療研究センター

研究代表者

宮本 義孝  国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 細胞医療研究部, 上級研究員 (20425705)

研究分担者 池内 真志  東京大学, 大学院情報理工学系研究科, 講師 (90377820)
大和屋 健二  東京理科大学, 理工学部応用生物科学科, 助教 (80447309)
山下 紘正  日本大学, 総合科学研究所, 准教授 (00470005)
連携研究者 宮戸 健二  国立成育医療研究センター, 細胞医療研究部, 室長 (60324844)
八木 透  東京工業大学, 工学院, 准教授 (90291096)
寺本 直純  千葉工業大学, 工学部, 准教授 (80327163)
野口 洋文  琉球大学, 医学系研究科, 教授 (50378733)
研究協力者 生田 幸士  
三浦 巧  
研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
17,030千円 (直接経費: 13,100千円、間接経費: 3,930千円)
2017年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2016年度: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2015年度: 7,280千円 (直接経費: 5,600千円、間接経費: 1,680千円)
キーワード移植・再生医療 / 細胞・組織 / マイクロ・ナノデバイス / 組織構築物 / 凍結保存 / 凍結保護剤 / 機能評価 / システム / 再生医療 / 移植医療
研究成果の概要

本研究では、①DMSOフリー新規凍結保存液、②凍結保存用培養デバイス、③凍結装置の開発を行った。①DMSOの細胞毒性、および動物由来原料の抗原性変化や病原体混入の可能性等の課題を解決すべく、ヒト組織由来細胞に有効なDMSO-血清フリー細胞凍結保存液の組成を見出した。②3D培養デバイスTASCLを用いて、均一な大きさのヒト組織由来幹細胞・組織構築物を大量に創製すると共に、有効な保存液組成の決定からガラス化凍結に成功した。③細胞の凍結を制御するために、スターリングエンジンによる凍結装置の開発、および凍結条件の最適化に成功した。以上より、再生・移植医療用細胞・組織構築物の凍結保存システムを構築した。

報告書

(4件)
  • 2017 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 研究成果

    (32件)

すべて 2018 2017 2016 2015

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件、 オープンアクセス 6件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (25件)

  • [雑誌論文] Long-term Cryopreservation of Human and other Mammalian Cells at -80℃ for 8 Years2018

    • 著者名/発表者名
      Yoshitaka Miyamoto, Masashi Ikeuchi, Hirofumi Noguchi, Shuji Hayashi
    • 雑誌名

      Cell Medicine

      巻: -

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Ubiquitin-activating enzyme E1 inhibitor PYR-41 retards sperm enlargement after fusion to the egg.2018

    • 著者名/発表者名
      Yoshida K, Kang W, Nakamura A, Kawano N, Hanai M, Miyado M, Miyamoto Y, Iwai M, Hamatani T, Saito H, Miyado K and Umezawa A.
    • 雑誌名

      Reprod Toxicol.

      巻: 76 ページ: 71-77

    • DOI

      10.1016/j.reprotox.2018.01.001

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Birth weights and Down syndrome in neonates delivered after frozen-thawed embryo transfer: Six-year study (2007-2012) on the national assisted reproduction registry data in Japan2017

    • 著者名/発表者名
      Yamatoya K, Saito K, Saito T, Kang W, Nakamura A, Miyado M, Kawano N, Miyamoto Y, Umezawa A, Miyado K, Saito H
    • 雑誌名

      Reproductive Medicine and Biology

      巻: 16 号: 2 ページ: 228-234

    • DOI

      10.1002/rmb2.12033

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Long-term Cryopreservation of Human and Mammalian Cell at -80℃ for 8 years2017

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto Y, Ikeuchi M, Noguchi H, Hayashi S
    • 雑誌名

      Cell Medicine

      巻: -

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Enhanced Adipogenic Differentiation of Human Adipose-Derived Stem Cells in an In Vitro Microenvironment: The Preparation of Adipose-Like Microtissues Using a Three-Dimensional Culture2016

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto Y, Ikeuchi M, Noguchi H, Yagi T, Hayashi S
    • 雑誌名

      Cell Medicine

      巻: 9(1-2) 号: 1-2 ページ: 35-44

    • DOI

      10.3727/215517916x693096

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Enhanced Adipogenic Differentiation of Human Adipose-derived Stem Cells in an In Vitro Microenvironment: The Preparation of Adipose-like Microtissues using a Three-dimensional Culture2016

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto Y, Ikeuchi M, Noguchi H, Yagi T, Hayashi S
    • 雑誌名

      Cell Medicine

      巻: -

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Spheroid Formation and Evaluation of Hepatic Cells in a Three-Dimensional Culture Device2015

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto Y, Ikeuchi M, Noguchi H, Yagi T, Hayashi S
    • 雑誌名

      Cell Medicine

      巻: 8(1-2) 号: 1-2 ページ: 47-56

    • DOI

      10.3727/215517915x689056

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 三次元培養による神経細胞スフェ ロイドの創製2018

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志
    • 学会等名
      第17回日本再生医療学会総会, 横浜
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 独自開発した胚様体培養デバイスTASCLを用いた幹細胞クラスター長期培養法と分化誘導法の開発2018

    • 著者名/発表者名
      室伏善照、松下佐知、池内真志、林衆治
    • 学会等名
      第17回日本再生医療学会総会, 横浜
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 細胞塊量産・回収システムの開発2018

    • 著者名/発表者名
      池内真志、青山千裕、中西彩子
    • 学会等名
      第17回日本再生医療学会総会, 横浜
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 三次元培養によるヒト脂肪由来幹細胞からマイクロティッシュの作製2017

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、八木透、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第16回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      仙台国際センター, 宮城
    • 年月日
      2017-03-07
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 3次元培養デバイスTASCLを用いた胚様体形成プロセスの評価2017

    • 著者名/発表者名
      池内真志、青山千裕、本多和也、林衆治
    • 学会等名
      第16回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      仙台国際センター, 宮城
    • 年月日
      2017-03-07
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 胚様体大量培養デバイスTASCLを用いた幹細胞クラスターの長期間培養法の検討2017

    • 著者名/発表者名
      本多和也、池内真志、林衆治
    • 学会等名
      第16回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      仙台国際センター, 宮城
    • 年月日
      2017-03-07
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 再生医療・細胞医療におけるDMSOフリー、血清フリーの細胞凍結保存液の開発2017

    • 著者名/発表者名
      永井悠也、大和屋健二、寺本直純、中田一弥、八木透、宮本義孝
    • 学会等名
      2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017), 神戸
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] -80℃でのヒト脂肪組織由来幹細胞の長期凍結保存(8年間)2017

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、林衆治
    • 学会等名
      第44回日本臓器保存生物医学会学術集会, 大阪
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 胚様体大量培養デバイスTASCL (Tapered Stencil for Cluster Culture) を用いた幹細胞クラスター長期培養法2017

    • 著者名/発表者名
      室伏善照、本多和也、池内真志、林衆治
    • 学会等名
      第44回日本臓器保存生物医学会学術集会, 大阪
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Cryopreservation of human and mammalian cell by using DMSO-free freezing medium2017

    • 著者名/発表者名
      Yuya Nagai, Kenji Yamatoya, Naozumi Teramoto, Kazuya Nakata, Tohru Yagi, Yoshitaka Miyamoto
    • 学会等名
      第44回日本低温医学会総会, 千葉
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Differentiation evaluation in long-term cryopreserved human adipose tissue-derived stem/progenitor cells at -80°C2017

    • 著者名/発表者名
      Yoshitaka Miyamoto, Masashi Ikeuchi, Hirofumi Noguchi, Shuji Hayashi
    • 学会等名
      第44回日本低温医学会総会, 千葉
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] DMSOフリー細胞凍結保存液の開発と凍結融解が細胞に与える影響2017

    • 著者名/発表者名
      永井悠也、大和屋健二、寺本直純、中田一弥、八木透、宮本義孝
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会, 東京
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] -80℃下における細胞の長期凍結保存: 保存温度が細胞に与える影響2017

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会, 東京
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 培養デバイス TASCL を用いたヒト脂肪様細胞組織体の創製2017

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、鈴木聡、八木透、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      シンポジウム:細胞アッセイ技術の現状と将来
    • 発表場所
      東京大学生産技術研究所コンベンションホール, 東京
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] -80℃条件下における細胞株の長期凍結保存2016

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第43回日本臓器保存生物医学会
    • 発表場所
      東京薬科大学, 東京
    • 年月日
      2016-11-26
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] The long-term cryopreservation of various cell lines at -80.DEG.C.2016

    • 著者名/発表者名
      MIYAMOTO Yoshitaka, IKEUCHI Masashi, NOGUCHI Hirofumi, HAYASHI Shuji
    • 学会等名
      第43回日本低温医学会総会
    • 発表場所
      国立スポーツ科学センター, 東京
    • 年月日
      2016-10-17
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ヒト脂肪由来幹細胞からマイクロティッシュの大量作製2016

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、八木透、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第52回日本移植学会総会
    • 発表場所
      グランドプリンスホテル新高輪, 東京
    • 年月日
      2016-09-29
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 3次元培養によるヒト脂肪由来幹細胞の脂肪への分化とマイクロティッシュの作製2016

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、八木透、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第68回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      富山国際会議場, 富山
    • 年月日
      2016-09-28
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 神経インタフェースの現状と将来2015

    • 著者名/発表者名
      八木透、宮本義孝、菅原路子、中谷裕教
    • 学会等名
      第24回日本コンピュータ外科学会大会
    • 発表場所
      東京大学, 東京
    • 年月日
      2015-11-21
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 胎児治療のための子宮内でのゼラチン複合体細胞シート移植2015

    • 著者名/発表者名
      Sobhan Ubaidus、石井理絵、蛇口達造、小澤秀登、山下紘正、澤芳樹、田畑泰彦、土岐彰、千葉敏雄
    • 学会等名
      第37回日本バイオマテリアル学会大会
    • 発表場所
      京都テルサ, 京都
    • 年月日
      2015-11-09
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 培養デバイスTASCLを用いた肝細胞組織体の創製2015

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、鈴木聡、八木透、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第22 回HAB研究機構学術年会
    • 発表場所
      昭和大学, 東京
    • 年月日
      2015-06-26
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 脊髄髄膜瘤に対する細胞シート移植を応用した胎児治療2015

    • 著者名/発表者名
      石井理絵、ソブハン・ウバイダス、蛇口達造、佐藤智夫、山下紘正、田畑泰彦、土岐彰、千葉敏雄
    • 学会等名
      第52回日本小児外科学会学術集会
    • 発表場所
      神戸国際会議場, 神戸
    • 年月日
      2015-05-28
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 培養デバイスTASCLによる初代肝細胞スフェロイド培養、および均一・大量生産系の確立2015

    • 著者名/発表者名
      宮本義孝、池内真志、野口洋文、鈴木聡、八木透、生田幸士、林衆治
    • 学会等名
      第54回日本生体医工学会大会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場, 名古屋
    • 年月日
      2015-05-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 培養筋細胞を用いたアクチュエータに関する研究2015

    • 著者名/発表者名
      増田洋一、宮本義孝、八木透
    • 学会等名
      第54回日本生体医工学会大会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場, 名古屋
    • 年月日
      2015-05-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 気液透過性を付与したTASCLによるhiPS胚様体の高効率生産2015

    • 著者名/発表者名
      池内真志、豊田悠司、林衆治、生田幸士
    • 学会等名
      第54回日本生体医工学会大会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場, 名古屋
    • 年月日
      2015-05-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書

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公開日: 2015-04-16   更新日: 2019-03-29  

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