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昆虫工場におけるタンパク質糖鎖修飾の解析と改変

研究課題

研究課題/領域番号 15H04612
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 昆虫科学
研究機関九州大学

研究代表者

LEE JAEMAN  九州大学, 農学研究院, 准教授 (50404083)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
15,860千円 (直接経費: 12,200千円、間接経費: 3,660千円)
2018年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2017年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2016年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2015年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
キーワード糖鎖修飾 / バキュロウイルス発現系 / N型糖鎖 / O型糖鎖 / N-型糖鎖 / O-型糖鎖 / N-結合型糖鎖 / O-結合型糖鎖 / 難分泌性糖タンパク質 / 糖鎖 / タンパク質 / 昆虫 / 糖鎖構造改変 / ヒト酸性糖タンパク質 / ヒト由来糖転移酵素
研究成果の概要

優れた組換え分泌タンパク質発現系として知られている昆虫細胞では、糖鎖付加も起こるが、糖鎖の構造が哺乳類由来細胞とは異なることが知られており、創薬分野では昆虫細胞で発現したタンパク質糖鎖のヒト型化が求められている。
糖鎖修飾にはN型、O型の2種の糖鎖修飾があるが、N型糖鎖については、複数のヒト由来糖転移酵素を導入した昆虫細胞株を作製し、バキュロウイルス発現系により発現した組換え糖タンパク質のヒト型化に部分的にではあるが成功した。また、これまでほとんど知見がなかった昆虫細胞O型糖鎖修飾の第1、第2反応に関わる遺伝子を同定し、その諸性質を明らかにした。

研究成果の学術的意義や社会的意義

タンパク質糖鎖の役割については、未解明の部分も多いが、一部は、タンパク質の構造や安定性、生理活性などに重要な役割を果たしていることが報告されている。優れた難分泌性糖タンパク質発現系である昆虫細胞発現系で糖鎖修飾機構の理解が深まり、これを制御できるようになれば、糖鎖の生物学的機能における基礎研究を強力に推進できる上、これまで必要十分な活性を有する組換えタンパク質が生産できないだけの理由で医薬品化されていない難分泌性糖タンパク質の産業利用が可能となる。また、人工糖鎖の付加により、天然型タンパク質を越える活性を有するスーパータンパク質の生産につながる可能性を秘めている。

報告書

(5件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて 2019 2018 2017 2016 2015

すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 3件) 学会発表 (7件) (うち国際学会 4件)

  • [雑誌論文] Expression, purification, and characterization of highly active endo-α-N-acetylgalactosaminidases expressed by silkworm-baculovirus expression system2019

    • 著者名/発表者名
      Morio Akihiro、Xu Jian、Masuda Akitsu、Kinoshita Yurie、Hino Masato、Morokuma Daisuke、Goda Hatsumi M.、Okino Nozomu、Ito Makoto、Mon Hiroaki、Fujita Ryosuke、Kusakabe Takahiro、Lee Jae Man
    • 雑誌名

      Journal of Asia-Pacific Entomology

      巻: 22 号: 2 ページ: 404-408

    • DOI

      10.1016/j.aspen.2019.01.009

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] A functional polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase (PGANT) initiates O-glycosylation in cultured silkworm BmN4 cells2018

    • 著者名/発表者名
      Xu Jian、Morio Akihiro、Morokuma Daisuke、Nagata Yudai、Hino Masato、Masuda Akitsu、Li Zhiqing、Mon Hiroaki、Kusakabe Takahiro、Lee Jae Man
    • 雑誌名

      Applied Microbiology and Biotechnology

      巻: 102 号: 20 ページ: 8783-8797

    • DOI

      10.1007/s00253-018-9309-6

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] A truncated form of human alpha 1-acid glycoprotein is useful as a molecular tool for insect glycobiology2018

    • 著者名/発表者名
      Daisuke Morokuma, Masato Hino, Miho Tsuchioka, Akitsu Masuda, Hiroaki Mon, Kazuhito Fujiyama, Hiroyuki Kajiura, Takahiro Kusakabe and Jae Man Lee
    • 雑誌名

      International Journal of Industrial Entomology

      巻: 36(1) ページ: 15-24

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Human and Silkworm glycoproteins as reporter protein for O-glycosylation analysis in insect cells2017

    • 著者名/発表者名
      Akihoro Mori, Jian Xu, Yurie Kinoshita, Akitsu Masuda, Noriko Karasaki, Tsuneyuki Tatsuke, Hiroaki Mon, Jae Man Lee, Takahiro Kusakabe
    • 学会等名
      The 5th Asia-Pacific Congress of Sericulture and Insect Biotechnology (国際学会)
    • 発表場所
      Bangkok, Thailand
    • 年月日
      2017-02-28
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Characterization of proprotein convertase-furin expressed by using the silkworm-baculovirus expression system2017

    • 著者名/発表者名
      Yurie Kinoshita, Akitsu Masuda, Akihoro Mori, Noriko Karasaki, Tsuneyuki Tatsuke, Hiroaki Mon, Jae Man Lee, Takahiro Kusakabe
    • 学会等名
      The 5th Asia-Pacific Congress of Sericulture and Insect Biotechnology (国際学会)
    • 発表場所
      Bangkok, Thailand
    • 年月日
      2017-02-28
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Exploring high-efficient purification method for endo-a-n-acetylgalactosaminidase from enterococcus faecalis (Endo EF) expressed by baculovirus expression system2017

    • 著者名/発表者名
      Akihiro Morio, Yurie Kinoshita, Akitsu Masuda, Noriko Karasaki, Daisuke Morokuma, Jae Man Lee and Takahiro Kusakabe
    • 学会等名
      International Symposium on Agricultural, Food, Environmental and Life Sciences in Asia, 2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ヒト糖転移酵素の導入によるカイコ培養細胞の N型糖鎖修飾改変の試み2016

    • 著者名/発表者名
      諸熊大輔, 徐剣, 門宏明, 李在萬, 日下部宜宏
    • 学会等名
      蚕糸・昆虫機能利用学術講演会 日本蚕糸学会第86回大会
    • 発表場所
      京都工芸繊維大学、京都市
    • 年月日
      2016-03-17
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] カイコバキュロウイルス発現系を用いたヒト糖転移酵素の大量生産2015

    • 著者名/発表者名
      諸熊大輔, 門宏明, 李在萬, 伴野豊, 日下部宜宏
    • 学会等名
      第38回 日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] カイコ培養細胞におけるBmNPV 136遺伝子のプロモーター活性2015

    • 著者名/発表者名
      山下 真実、徐 剣、季 明明、門 宏明、李 在萬、日下部 宜宏
    • 学会等名
      蚕糸・昆虫機能利用学術講演会 日本蚕糸学会第85回大会
    • 発表場所
      北海道大学、札幌市
    • 年月日
      2015-09-26
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Characterization of BmNPV Promoters for Improving Exogenous Genes Expression in Bombyx Cells2015

    • 著者名/発表者名
      Mami Yamashita, Masato Hino, Kazuma Hirata, Jian Xu, Mingming Ji, Daisuke Morokuma, Hiroaki Mon, JaeMan Lee, Takahiro Kusakabe
    • 学会等名
      The 4th Asia-Pacific Congress of Sericulture and Insect Biotechnology
    • 発表場所
      Haeundae Grand Hotel, Busan, Korea
    • 年月日
      2015-04-22
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会

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公開日: 2015-04-16   更新日: 2020-03-30  

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