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全リン脂質網羅的酵素蛍光定量法による疾患メカニズム解明とバイオマーカー探索

研究課題

研究課題/領域番号 15H05660
研究種目

若手研究(A)

配分区分補助金
研究分野 病態検査学
研究機関滋賀医科大学

研究代表者

森田 真也  滋賀医科大学, 医学部, 准教授 (20449870)

研究協力者 辻 徳治  
研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
23,920千円 (直接経費: 18,400千円、間接経費: 5,520千円)
2018年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円)
2017年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円)
2016年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円)
2015年度: 6,370千円 (直接経費: 4,900千円、間接経費: 1,470千円)
キーワードリン脂質 / 酵素蛍光定量法 / ホスファチジルイノシトール / ホスファチジルグリセロール / カルジオリピン / 細胞密度 / 脂質 / 酵素 / バイオテクノロジー / バイオマーカー
研究成果の概要

リン脂質は、細胞膜や血漿リポタンパクの主要構成成分である。リン脂質の構造により、ホスファチジルコリン(PC)やホスファチジルイノシトール(PI)などのクラスに分別される。しかし、これまで高感度かつハイスループットなリン脂質定量法は存在しなかった。本研究では、酵素蛍光法で定量できるリン脂質クラスを増やし、全主要リン脂質クラスに対する酵素蛍光定量法を完成させた。さらに、この全主要リン脂質クラス酵素蛍光定量法を利用して、培養細胞におけるリン脂質クラス組成に対する細胞密度変化や酵素発現の影響を詳細に評価した。また、肝臓から胆汁へのリン脂質排出メカニズムについて明らかにした。

研究成果の学術的意義や社会的意義

従来、リン脂質の定量は、TLC/リン定量法などにより行われてきたが、微量の生体試料に含まれているリン脂質をクラスごとに定量解析するには十分でなかった。そこで、これまでに研究代表者はリン脂質クラスのうちPA・PC・PE・PS・SMに対する酵素蛍光定量法を確立していた。本研究では、PIとPG・CLの酵素蛍光定量法の開発に成功した。これにより、主要な全リン脂質クラスに対する高感度・高精度かつハイスループットな網羅的一斉定量法がついに完成した。本定量法は、培養細胞実験に加えて動物実験や植物・微生物実験を含む生命科学研究全般ならびにバイオマーカー探索等の臨床研究に活用されることが期待できる。

報告書

(5件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 研究成果

    (55件)

すべて 2019 2018 2017 2016 2015 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 5件、 オープンアクセス 4件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (43件) (うち国際学会 5件、 招待講演 8件) 備考 (2件) 産業財産権 (4件) (うち外国 3件)

  • [雑誌論文] Molecular Mechanisms for Protection of Hepatocytes against Bile Salt Cytotoxicity2019

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tokuji Tsuji, Tomohiro Terada
    • 雑誌名

      CHEMICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN

      巻: 67 号: 4 ページ: 333-340

    • DOI

      10.1248/cpb.c18-01029

    • NAID

      130007621742

    • ISSN
      0009-2363, 1347-5223
    • 年月日
      2019-04-01
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Effects of lipid composition on the structural properties of human serum amyloid A in reconstituted high-density lipoprotein particles2019

    • 著者名/発表者名
      Hiroka Takase, Masafumi Tanaka, Yuki Nakamura, Shin-ya Morita, Toshiyuki Yamada, Takahiro Mukai
    • 雑誌名

      Chem. Phys. Lipids

      巻: 221 ページ: 8-14

    • DOI

      10.1016/j.chemphyslip.2019.03.001

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Cholesterol attenuates cytoprotective effects of phosphatidylcholine against bile salts2017

    • 著者名/発表者名
      Yoshito Ikeda, Shin-ya Morita, Tomohiro Terada
    • 雑誌名

      Sci. Rep.

      巻: 7 号: 1 ページ: 306-306

    • DOI

      10.1038/s41598-017-00476-2

    • NAID

      120006346599

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] 酵素蛍光定量法による細胞内リン脂質代謝機能解析2016

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 雑誌名

      膜

      巻: 41 号: 5 ページ: 202-208

    • DOI

      10.5360/membrane.41.202

    • NAID

      130005421183

    • ISSN
      0385-1036, 1884-6440
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 網羅的全リン脂質酵素蛍光定量法の開発とバイオマーカー探索2016

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 雑誌名

      薬学研究の進歩

      巻: 32 ページ: 115-120

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] Enzymatic measurement of phosphatidylglycerol and cardiolipin in cultured cells and mitochondria2015

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Tomohiro Terada
    • 雑誌名

      Sci. Rep.

      巻: 5 号: 1 ページ: 11737-11737

    • DOI

      10.1038/srep11737

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 新規全リン脂質クラス酵素蛍光定量法の開発と生命科学・臨床研究への応用2019

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 学会等名
      第5回医療と介護の総合展メディカルジャパン大阪
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 新規全主要リン脂質クラス酵素蛍光定量法の開発と臨床研究への応用2019

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 学会等名
      日本薬学会第139年会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Novel enzymatic fluorometric measurements of all major cellular phospholipid classes2018

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Tokuji Tsuji, Yoshito Ikeda, Tomohiro Terada
    • 学会等名
      59th International Conference on the Bioscience of Lipids
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 主要リン脂質クラス一斉定量法の開発と応用2018

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 学会等名
      第58回日本臨床化学会年次学術集会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 主要リン脂質クラス一斉定量法の開発と基礎研究・臨床研究への応用2018

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 学会等名
      第73回国立循環器病研究センター(NCVC)研究者交流会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ABCB4リン脂質排出を促進する分子の探索とメカニズムの解明2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      日本膜学会第40年会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] タウロヒオデオキシコール酸によるABCB4リン脂質排出の促進2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第60回日本脂質生化学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 酵素蛍光定量法を用いた細胞小器官における主要リン脂質組成の分析2018

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      第60回日本脂質生化学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 全主要リン脂質クラスを網羅的に解析する酵素蛍光定量法の開発2018

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      医療薬学フォーラム2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] タウロヒオデオキシコール酸によるリン脂質排出トランスポーターABCB4の活性化2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第13回トランスポーター研究会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] ABCB4によるリン脂質排出を強力に促進する分子の探索2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第12回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 胆汁リン脂質促進作用による新規肝機能改善薬の探索2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第28回日本医療薬学会年会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 胆汁酸肝組織障害に対する新規治療薬開発を目指したリン脂質トランスポーターABCB4の機能解明2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第35回滋賀医科大学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Enhancing effects of bile salts on ABCB4-mediated phospholipid efflux2018

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tokuji Tsuji, Tomohiro Terada
    • 学会等名
      7th FEBS Special Meeting ABC Proteins
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトールに対する新規定量法の開発と細胞内全リン脂質クラスの定量的解析2018

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      第8回学際的脂質創生研究部会講演会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール定量法の新規開発と細胞内主要リン脂質クラスの定量的解析2018

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      日本農芸化学会2018年度大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトールに対する酵素蛍光定量法の開発と細胞内リン脂質クラスの網羅的定量2018

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      日本薬学会第138年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] タウリン抱合型ヒオデオキシコール酸によるABCB4を介したリン脂質排出の促進2018

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      日本薬学会第138年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 胆汁酸に対するリン脂質の細胞保護作用のコレステロールによる低下2017

    • 著者名/発表者名
      森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      医療薬学フォーラム2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] リン脂質排出トランスポーターABCB4を活性化する胆汁酸の探索とメカニズムの解明2017

    • 著者名/発表者名
      森田真也、池田義人、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      次世代を担う創薬・医療薬理シンポジウム2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール酵素蛍光定量法の開発によるリン脂質一斉定量法の完成2017

    • 著者名/発表者名
      森田真也、辻徳治、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      膜シンポジウム2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 胆汁酸によるABCB4リン脂質排出の促進2017

    • 著者名/発表者名
      森田真也、池田義人、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      日本薬物動態学会第32回年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] リン脂質が有する胆汁酸細胞毒性減弱作用に及ぼすコレステロールの影響2017

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      日本膜学会第39年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 胆汁酸毒性に対するリン脂質の細胞保護作用に及ぼすコレステロールの影響2017

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第59回日本脂質生化学会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ABCB4によるリン脂質排出を促進するアクセプター分子の探索2017

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第12回トランスポーター研究会年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 毛細胆管膜トランスポーターABCB4によるリン脂質排出を促進する分子の探索2017

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 全主要リン脂質クラスを網羅的に解析する酵素蛍光定量法の開発2017

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ABCB4のリン脂質排出を促進する分子の探索2017

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
    • 学会等名
      第39回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール酵素蛍光定量法の開発と細胞内全リン脂質クラス組成に関する定量的解析2017

    • 著者名/発表者名
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • 学会等名
      第39回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Novel enzymatic fluorometric assays for quantifying cellular phospholipid classes2016

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tomohiro Terada
    • 学会等名
      12th International Congress of Cell Biology
    • 発表場所
      Prague, Czech Republic
    • 年月日
      2016-07-21
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ウルソデオキシコール酸及びその抱合体によるABCB4を介したリン脂質排出の促進2016

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第11回トランスポーター研究会年会
    • 発表場所
      宇治
    • 年月日
      2016-07-02
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 胆汁酸細胞毒性に対するウルソデオキシコール酸の細胞保護作用2016

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      医療薬学フォーラム2016
    • 発表場所
      大津
    • 年月日
      2016-06-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 胆汁酸とリン脂質の混合ミセル形成に及ぼすコレステロールの影響2016

    • 著者名/発表者名
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第58回日本脂質生化学会
    • 発表場所
      秋田
    • 年月日
      2016-06-09
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 酵素蛍光定量法による細胞内リン脂質代謝機能解析2016

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 学会等名
      日本膜学会第38年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2016-05-10
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 新規リン脂質酵素蛍光定量法を用いたミトコンドリア機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第37回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
    • 発表場所
      熊本
    • 年月日
      2015-11-19
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 新規リン脂質酵素蛍光定量法を用いたミトコンドリアPGS1機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第9回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
    • 発表場所
      千葉
    • 年月日
      2015-11-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] New enzyme-based fluorometric assay for quantifying cardiolipin and phosphatidylglycerol in cells and mitochondria2015

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Tomohiro Terada
    • 学会等名
      Cardiolipin as Key Lipid of Mitochondria in Health and Disease
    • 発表場所
      Florence, Italy
    • 年月日
      2015-09-30
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Quantitative analysis of cellular phospholipid classes by using enzymatic fluorometric assays2015

    • 著者名/発表者名
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tomohiro Terada
    • 学会等名
      13th Euro Fed Lipid Congress
    • 発表場所
      Florence, Italy
    • 年月日
      2015-09-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] リン脂質網羅的酵素蛍光定量法による細胞リン脂質代謝解析2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第10回トランスポーター研究会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-06-20
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 新規酵素蛍光法によるミトコンドリアのリン脂質定量分析2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      第57回日本脂質生化学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-05-28
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 新規ホスファチジルグリセロール・カルジオリピン酵素蛍光定量法2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      日本薬剤学会第30年会
    • 発表場所
      長崎
    • 年月日
      2015-05-21
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 新規ホスファチジルグリセロール・カルジオリピン酵素蛍光定量法の培養細胞実験への応用2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也、寺田智祐
    • 学会等名
      日本膜学会第37年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-05-14
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] リン脂質と疾患2015

    • 著者名/発表者名
      森田真也
    • 学会等名
      神戸薬科大学特別研究セミナー
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-05-08
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [備考] 滋賀医科大学 医学部附属病院 薬剤部

    • URL

      http://www.sums-pharm.jp/

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [備考] 滋賀医科大学 医学部附属病院 薬剤部

    • URL

      http://www.sums-pharm.jp/

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [産業財産権] ホスファチジルイノシトールの定量方法及び定量用キット2018

    • 発明者名
      森田真也
    • 権利者名
      国立大学法人 滋賀医科大学
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 外国
  • [産業財産権] ホスファチジルイノシトールの定量方法及び定量用キット2017

    • 発明者名
      森田真也
    • 権利者名
      国立大学法人 滋賀医科大学
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      2017-103714
    • 出願年月日
      2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [産業財産権] Method and kit for quantifying cardiolipin2016

    • 発明者名
      Shin-ya Morita
    • 権利者名
      Shiga Univ. Med. Sci.
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2016
    • 取得年月日
      2019
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 外国
  • [産業財産権] Method and kit for quantifying cardiolipin2016

    • 発明者名
      Shin-ya Morita
    • 権利者名
      Shiga Univ. Med. Sci.
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2016-09-30
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 外国

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公開日: 2015-04-16   更新日: 2020-03-30  

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