| 研究課題/領域番号 |
15H05782
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| 研究種目 |
基盤研究(S)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
動物生産科学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
前多 敬一郎 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (30181580)
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| 研究分担者 |
武内 ゆかり 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (10240730)
松山 秀一 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 畜産研究部門, 主任研究員 (50455317)
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| 研究期間 (年度) |
2015-05-29 – 2020-03-31
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| 研究課題ステータス |
採択後辞退 (2018年度)
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| 配分額 *注記 |
150,150千円 (直接経費: 115,500千円、間接経費: 34,650千円)
2018年度: 36,660千円 (直接経費: 28,200千円、間接経費: 8,460千円)
2017年度: 36,920千円 (直接経費: 28,400千円、間接経費: 8,520千円)
2016年度: 38,610千円 (直接経費: 29,700千円、間接経費: 8,910千円)
2015年度: 37,960千円 (直接経費: 29,200千円、間接経費: 8,760千円)
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| キーワード | フェロモン / 生体分子 / 牛 / 獣医学 / 繁殖学 |
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| 研究実績の概要 |
本年度は実施計画に基づいて研究を実施し、以下の成果を得た。
①雄牛フェロモン活性に対するバイオアッセイ系の確立
鋤鼻神経細胞を用いた生物検定：2年6か月齢の交雑種雌牛の鋤鼻組織から確立した不死化細胞100個以上のクローンからのtotal RNA抽出とcDNA合成を完了した。鋤鼻神経細胞のマーカーであるolfactory marker proteinおよびG protein（Gi）を発現する細胞を検索し、35個のクローンを得た。受容体強制発現系を用いた生物検定：フェロモン受容体の膜発現を実現するため、腎臓由来の細胞株を用いて繊毛発現シグナルの検討を行った。LHパルスを指標とした生物検定：農研機構畜産研究部門において、卵巣除去牛にエストロジェンのインプラントを投与後LHパルスを観察し、フェロモン検定のためのモデルを検討した結果、エストロジェン投与後徐々に負のフィードバック効果が薄れていくことを明らかにした。MUA記録システムを用いた生物検定：農研機構畜産研究部門の牛脳定位固定装置を用いて3頭の雄牛の弓状核に電極を植え込み、東京大学附属牧場にて電気活動を記録することができた。現在LHパルスと同期するMUAボレーは得られていないが、術技と記録法を確立することができた。
②雄牛フェロモンのリガンド分子同定
現時点では雄牛フェロモンの産生部位が特定できていないため、農研機構畜産研究部門において雄牛頭部のヘッドスペース捕集方法の改良を行うとともに、1歳における雄牛去勢前後のサンプルについて比較を試みたところ、精巣由来アンドロジェン依存性のピークが複数存在することが明らかとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
①雄牛フェロモン活性に対するバイオアッセイ系の確立・MUA記録システムを用いた生物検定に際し、機器トラブルが生じたために、2頭分の正常データを得ることができなかった。
②牛におけるLH分泌に対するエストロジェンの負のフィードバック効果がヤギなどと違い、長続きしないことから長期にわたって用いることができるモデルを作成することが困難であることがわかった。
③培養細胞の細胞膜上に何らかの理由でフェロモン受容体がうまく発現せず、in vitroの評価系ができない。
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| 今後の研究の推進方策 |
引き続きin vivoおよびin vitroのフェロモン検定系を確立することを重点的に推進する。MUA記録システムについては随時機器の状況をモニターすることで早急にバイオアッセイシステムを確立する予定である。LHパルスを指標とした検定については、エストロジェン投与後徐々に負のフィードバック効果が薄れていくことが明らかとなったため、プロジェステロンを用いるなど新たな方法について検討を行う予定である。In vitroでは、鋤鼻神経細胞由来と考えられる35個の不死化細胞株を用いてフェロモン検定系を確立することを目指す。
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