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赤外分光法を用いた微生物型ロドプシンの水素結合環境解析

研究課題

研究課題/領域番号 15J06609
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 物理化学
研究機関名古屋工業大学

研究代表者

伊藤 奨太  名古屋工業大学, 工学研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2015-04-24 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
2016年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2015年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
キーワード光受容タンパク質 / 構造解析 / 赤外分光法 / 分子振動 / 微生物型ロドプシン / イオンポンプ / 非調和振動
研究実績の概要

近年、タンパク質の構造決定が発展しているが、水素結合供与基の環境まで詳細に調べることは未だに難しい。本研究では、(1)光受容膜タンパク質である様々なイオン輸送型微生物型ロドプシンの構造解析を行い、その機能発現と水素結合環境を明らかにすることを目的とする。また、(2)赤外分光法により得られる振動情報に着目し、分子振動情報をその倍音・結合音の成分にまで拡張し、タンパク質の機能発現との関係性を明らかにしたい。
(1)様々なイオン輸送タンパク質に対する系統的な赤外分光解析
計6種類のタンパク質に対して、系統的な構造解析を行った。選定したタンパク質は、輸送可能なイオン種やその方向性に多様性がある。プロトンポンプは非常に強い水素結合をした水分子が存在することで、機能を実現することは知られていたが、今回の系統的な赤外分光解析の結果、他の4種類においても強い水素結合を形成した水分子が存在していることが明らかとなった。さらにアミノ酸変異体を用いた構造解析の結果、その水分子の位置がずれていることが示唆された。このように、微生物型ロドプシンはそのイオン輸送の実現のために、活性中心の水素結合環境を柔らかに制御していることが明らかとされた。
(2)タンパク質における分子振動の倍音・結合音の振動解析
これまでのタンパク質の構造解析では、分子の伸縮振動・偏角振動の解析により、タンパク質の緻密な水素結合環境の解析が行われてきた。本研究では、タンパク質の分子振動の倍音・結合音の振動解析を行い、単純な伸縮振動との比較を行う。光駆動外向きプロトンポンプを対象にC-C伸縮振動・C-H偏角振動の解析を行った。倍音・結合音の振動モードは、その振動の非調和性のために振動数がシフトすることが想定されるが、今回の測定結果からは振動数シフトが全く見られず、タンパク質ならではの振動の非調和性と思われる信号が得られた。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 研究成果

    (17件)

すべて 2017 2016 2015 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (12件) (うち国際学会 6件、 招待講演 1件)

  • [国際共同研究] University of Guelph(Canada)

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] Solid-state NMR structural study of retinal-binding pocket in sodium ion pump rhodopsin.2017

    • 著者名/発表者名
      Arisu Shigeta, Shota Ito, Keiichi Inoue, Takashi Okitsu, Akimori Wada, Hideki Kandori, Izuru Kawamura*
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 56 号: 4 ページ: 543-550

    • DOI

      10.1021/acs.biochem.6b00999

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] FTIR analysis of a light-driven inward proton pumping rhodopsin at 77 K.2017

    • 著者名/発表者名
      Ito, S., Sugita, S., Inoue, K. and Kandori, H.
    • 雑誌名

      Photochemstry and Photobiology

      巻: 印刷中 号: 6 ページ: 1381-1387

    • DOI

      10.1111/php.12771

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] A natural light-driven inward proton pump2016

    • 著者名/発表者名
      Keiichi Inoue, Shota Ito, Yoshitaka Kato, Yurika Nomura, Mikihiro Shibata, Takayuki Uchihashi, Satoshi P. Tsunoda and Hideki Kandori
    • 雑誌名

      Nature Communications

      巻: 7 号: 1 ページ: 13415-13415

    • DOI

      10.1038/ncomms13415

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] A new group of eubacterial light-driven retinal-binding proton pumps with an unusual cytoplasmic proton donor2015

    • 著者名/発表者名
      A. Harris, M. Ljumovic, A. N. Bondar, Y. Shibata, S. Ito, K. Inoue, H. Kandori, L. S. Brown
    • 雑誌名

      Biochim. Biophys. Acta

      巻: 11 ページ: 39-45

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] 微生物型ロドプシンのプロトン輸送メカニズム2017

    • 著者名/発表者名
      伊藤奨太
    • 学会等名
      新学術領域 ”柔らかな分子系”第20回ワークショップ「構造変化で操る分子の機能」
    • 発表場所
      東京大学
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] FTIR study of sodium binding and photoreaction in KR22016

    • 著者名/発表者名
      Shota Ito, Rei Abe Yoshizumi, Shinya Sugita, Keiichi Inoue, Tatsuya Iwata, Masayo Iwaki, Hideki Kandori
    • 学会等名
      EMBO Conference The 17th International conference on Retinal Proteins
    • 発表場所
      Potsdam, Germany
    • 年月日
      2016-10-02
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 全反射赤外分光法でみるKR2のNa+結合サイトの構造解析2016

    • 著者名/発表者名
      伊藤 奨太、杉田 真也、吉住 玲、井上 圭一、岩田 達也、岩城 雅代、神取 秀樹
    • 学会等名
      新学術領域”運動超分子が織りなす調和と多様性” 第4回領域全体会議
    • 発表場所
      長崎大
    • 年月日
      2016-06-08
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Unique hydrogen bonding structure of cation binding site in light-driven sodium pumping rhodopsin2016

    • 著者名/発表者名
      ○S. Ito, S. Sugita, R. Abe-Yoshizumi, K. Inoue, T. Iwata, M. Iwaki, H. Kandori
    • 学会等名
      日本化学会第96春季年会
    • 発表場所
      京田辺
    • 年月日
      2016-03-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Specific hydrogen bonding network of Na+ binding site in light-driven Na+ pumping rhodopsin2016

    • 著者名/発表者名
      ○S. Ito, S. Sugita, R. Abe-Yoshizumi, K. Inoue, T. Iwata, M. Iwaki, H. Kandori
    • 学会等名
      Gordon Research Conference on "Photosensory Receptors & Signal Transduction"
    • 発表場所
      Galveston, USA
    • 年月日
      2016-01-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ATR-FTIR Spectroscopy Reveal the Specific Hydrogen Bonding Network of Na+ binding site in Na+ Pumping Rhodopsin2016

    • 著者名/発表者名
      ○S. Ito, S. Sugita, R. Abe-Yoshizumi, K. Inoue, T. Iwata, M. Iwaki, H. Kandori
    • 学会等名
      Gordon Research Seminar on "Photosensory Receptors & Signal Transduction"
    • 発表場所
      Galveston, USA
    • 年月日
      2016-01-23
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Transport Mechanism of light-driven inward proton pump revealed by FTIR spectroscopy2016

    • 著者名/発表者名
      Shota Ito, Sahoko Tomida, Yoshitaka Kato, Yurika Nomura,Satoshi Tsunoda, Keiichi Inoue, Hideki Kandori
    • 学会等名
      The 54th Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • 発表場所
      Tsukuba
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] KR2のNa+結合サイトに見られる特異な水素結合構造2015

    • 著者名/発表者名
      ○伊藤奨太、杉田 真也、吉住 玲、井上 圭一、岩田 達也、岩城 雅代、神取 秀樹
    • 学会等名
      新学術領域研究「柔らかな分子系」第 4回全体合宿会議
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      2015-11-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] KR2 における Na+ 結合サイトの水素結合環境解析2015

    • 著者名/発表者名
      ○伊藤奨太、杉田 真也、吉住 玲、井上 圭一、岩田 達也、岩城 雅代、神取 秀樹
    • 学会等名
      新学術領域研究「柔らかな分子系」第11回ワークショップ「光駆動ナトリウムポンプからタンパク質の柔らかさと機能のつながりを考える」
    • 発表場所
      犬山
    • 年月日
      2015-10-28
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] タンパク質中で見られるチロシンの特異な水素結合状態の赤外分光解析2015

    • 著者名/発表者名
      ○伊藤奨太、杉田 真也、吉住 玲、井上 圭一、岩田 達也、岩城 雅代、神取 秀樹
    • 学会等名
      第8回分子科学討論会
    • 発表場所
      大岡山
    • 年月日
      2015-09-16
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Low-temperature FTIR study of Sodium Pumping Rhodopsin2015

    • 著者名/発表者名
      ○S. Ito, S. Sugita, R. Abe-Yoshizumi, K. Inoue, T. Iwata, H. Kandori
    • 学会等名
      The 53rd Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • 発表場所
      金沢
    • 年月日
      2015-09-13
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] FTIR Study of the K and M Intermediates in Light-driven Sodium Pumping Rhodopsin2015

    • 著者名/発表者名
      ○S. Ito, S. Sugita, R. Abe-Yoshizumi, K. Inoue, T. Iwata, M. Sheves, H. Kandori
    • 学会等名
      KAKENHI International Symposium on “Studying the Function of Soft Molecular Systems”
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-06-09
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会

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公開日: 2015-11-26   更新日: 2024-03-26  

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