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クロマチンループによる形態形成遺伝子の発現制御メカニズム

研究課題

研究課題/領域番号 15J06985
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 発生生物学
研究機関国立遺伝学研究所

研究代表者

毛利 亘輔  国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 特別研究員(PD) (60719491)

研究期間 (年度) 2015-04-24 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2017年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワード構造多型 / マウス / エンハンサー / クロマチンループ / ESCO2 / コヒーシン
研究実績の概要

昨年度から解析を行っていたHammer toe (Hm)マウスについて、ゲノム編集と遺伝子発現解析を組み合わせることで、新規エンハンサーが発生関連遺伝子の発現を誘導するためのゲノム構造が明らかになった。1つのエンハンサー配列ではなく複数のエンハンサーが協調的に働くことと、その並び方あるいは方向が発現量に影響することが明らかになった。これらの分子生物学的試薬について、試薬を購入した。
また、特別研究員として3年間取り組んだ成果を論文として発表するに至った。その際のレビュワーとのやりとりにおいて要求された確認実験のために試薬を購入し、使用している。掲載誌はProceedings of the National Academy of Sciences of the United States of Americaで、本年度12月にオンライン上に、1月に誌面に掲載された。
昨年度から準備していたESCO2を試薬誘導的にノックアウトする系統については、qPCR解析による発現解析を行い、ESCO2遺伝子の欠失に伴う発生関連遺伝子群の発現変動を調べた。Creタンパク質を核内に局在させるためのTamoxifenは母体腹腔内にE12.5で投与し、24時間後のE13.5で解剖、前肢および後肢での発現を定量した。Hoxd10およびHoxd13が微増していたものの、ESCO2の有意な発現低下は認められず、四肢の形態にも明白な変化は見られなかった。ESCO2の発現低下についてはNonsense Mediated Decayが起きていない可能性も依然としてあり、断定はできない。一方、ゲノムPCRでは欠失アリルが検出されている。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2017 2016 2015

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 3件)

  • [雑誌論文] Enhancer adoption caused by genomic insertion elicits interdigitalShhexpression and syndactyly in mouse2017

    • 著者名/発表者名
      Mouri Kousuke、Sagai Tomoko、Maeno Akiteru、Amano Takanori、Toyoda Atsushi、Shiroishi Toshihiko
    • 雑誌名

      Proceedings of the National Academy of Sciences

      巻: 115 号: 5 ページ: 1021-1026

    • DOI

      10.1073/pnas.1713339115

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] A new cis-regulatory element acquired by inter-chromosomal translocation changes of mouse limb morphology2017

    • 著者名/発表者名
      Kousuke Mouri
    • 学会等名
      50th Annual Meeting of the Japanese Society of Developmental Biologists
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Orientation-dependent enhancer evoked by chromosomal translocation in mouse Hm2017

    • 著者名/発表者名
      Kousuke Mouri
    • 学会等名
      18th International Congress of Developmental Biology
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] エンハサーの転座による遺伝子発現調節変化2016

    • 著者名/発表者名
      毛利亘輔
    • 学会等名
      第88回日本遺伝学会
    • 発表場所
      三島市
    • 年月日
      2016-09-07
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Genetic analysis of mouse Hammer toe (Hm) mutant reveals long-range enhancer modulation2015

    • 著者名/発表者名
      毛利亘輔
    • 学会等名
      第29回 モロシヌス研究会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-07-03
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Genetic analysis of mouse Hammer toe (Hm) mutant reveals long-range enhancer modulation2015

    • 著者名/発表者名
      毛利亘輔
    • 学会等名
      第48回 日本発生生物学会
    • 発表場所
      つくば
    • 年月日
      2015-06-02
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会

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公開日: 2015-11-26   更新日: 2024-03-26  

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