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生体内遊離ヘムの濃度測定と動態解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K01825
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 ケミカルバイオロジー
研究機関九州工業大学

研究代表者

坂本 寛  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (70309748)

研究分担者 平 順一  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 助教 (20549612)
小松 英幸  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 准教授 (90253567)
連携研究者 末田 慎二  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (00325581)
東元 祐一郎  久留米大学, 医学部, 教授 (40352124)
森松 博史  岡山大学, 医学部, 教授 (30379797)
清水 裕子  岡山大学, 医学部, 客員研究員 (80423284)
近澤 征史朗  北里大学, 獣医学部, 助教 (80566547)
菅井 学  福井大学, 医学部, 教授 (90303891)
研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2017年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2016年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2015年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
キーワードヘム / センサー / 生体分子 / 酵素 / 計測 / 分析科学 / 定量
研究成果の概要

ヘムはヘムタンパク質の補欠分子族として種々の生体反応に関与する一方で,タンパク質と結合していない遊離ヘムが様々な生理活性や疾患に関わっている。我々はこれまでに、ヘムオキシゲナーゼ1(HO-1)に蛍光団を導入したヘム特異的センサーを開発し,ラット肝ミクロソーム画分中の遊離ヘムの定量を試みたが,遊離ヘムが生体物質に非特異的に吸着されることが示唆された。そこで,界面活性剤等を用いた遊離処理方法を検討した。また,HO-1と蛍光蛋白質との融合タンパク質を発現・精製し,ヘムセンサーとしての有用性を検討するとともに,この融合タンパク質を培養細胞内に発現し,細胞内遊離ヘムの定量に向けた基礎的な検討を行った。

報告書

(4件)
  • 2017 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実施状況報告書
  • 2015 実施状況報告書
  • 研究成果

    (32件)

すべて 2018 2017 2016 2015 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 4件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (25件) (うち国際学会 1件) 図書 (2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] In silico structure-based drug screening of novel antimycobacterial pharmacophores by DOCK-GOLD tandem screening2017

    • 著者名/発表者名
      Aoki Shunsuke、Taira Junichi、Ito Takashi、Nakatani Hitomi、Umei Tomohiro、Baba Hiroki、Kawashima Shotaro、Maruoka Taira、Komatsu Hideyuki、Sakamoto Hiroshi
    • 雑誌名

      The International Journal of Mycobacteriology

      巻: 6 号: 2 ページ: 142-142

    • DOI

      10.4103/ijmy.ijmy_24_17

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Phosphorylation of clustered serine residues in the N-terminus of BPS domain negatively regulates formation of the complex between human Grb14 and insulin receptor.2017

    • 著者名/発表者名
      1.J. Taira, Y. Kida, K. Inatomi, H. Komatsu, Y. Higashimoto, H. Sakamoto.
    • 雑誌名

      J. Biochemistry

      巻: 印刷中 ページ: 113-122

    • DOI

      10.1093/jb/mvx007

    • NAID

      40021299788

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書 2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Identification of a novel class of small compounds with anti-tuberculosis activity by in silico structure-based drug screening2017

    • 著者名/発表者名
      Taira Junichi、Morita Koji、Kawashima Shotaro、Umei Tomohiro、Baba Hiroki、Maruoka Taira、Komatsu Hideyuki、Sakamoto Hiroshi、Sacchettini James C、Aoki Shunsuke
    • 雑誌名

      The Journal of Antibiotics

      巻: 70 号: 11 ページ: 1057-1064

    • DOI

      10.1038/ja.2017.106

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Improvement of heme oxygenase-1-based heme sensor for quantifying free heme in biological samples2015

    • 著者名/発表者名
      Junichi Taira, Yukinori Nakashima, Shun Yoshihara, Shinya Koga, Shinji Sueda, Hideyuki Komatsu, Yuichiro Higashimoto, Toru Takahashi, Nohito Tanioka, Hiroko Shimizu, Hiroshi Morimatsu, Hiroshi Sakamoto
    • 雑誌名

      Analytical Biochemistry

      巻: 489 ページ: 50-52

    • DOI

      10.1016/j.ab.2015.08.004

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 沈降平衡法によるheme oxygenase-1とNADPH-cytochrome P450 reductaseの相互作用解析2017

    • 著者名/発表者名
      相良達哉, 平 順一, 杉島正一, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      平成29年度日本生化学会九州支部例会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 細胞内ヘム定量に向けた蛍光蛋白質とラットヘムオキシゲナーゼ-1の融合蛋白質の機能評価2017

    • 著者名/発表者名
      松田 和也, 中島 音海, 松田 祥子, 平 順一, 小松 英, 坂本 寛
    • 学会等名
      平成29年度日本生化学会九州支部例会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] CK2とGSK-3による共役的なGrb14BPSドメインのリン酸化はGrb14-インスリン湯様態の複合体形成に影響を与えるか2017

    • 著者名/発表者名
      吉田圭佑, 平 順一, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      平成29年度日本生化学会九州支部例会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ヘム分解関連酵素間の複合体形成由来の分子内FRETを利用したヘムプローブの開発2017

    • 著者名/発表者名
      松田和也, 平 順一, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      第54回化学関連支部合同九州大会・外国人研究者交流国際シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 高ヘム親和性血漿タンパク質ヘモペキシンを用いたヘムセンサーの開発2017

    • 著者名/発表者名
      池永康幸, 平 順一, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      第54回化学関連支部合同九州大会・外国人研究者交流国際シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Heme oxygenase-1を基盤としたヘムセンサーによる生体サンプル中のヘムの精密定量及び既存の高感度検出法との比較2017

    • 著者名/発表者名
      松本準, 平 順一, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      第54回化学関連支部合同九州大会・外国人研究者交流国際シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] HO-1とEGFP融合タンパク質の細胞内遊離ヘムプローブとしての機能評価2017

    • 著者名/発表者名
      平 順一, 中島音海, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      第41回蛋白質渡航その構造と機能に関する九州シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Development of Rat Heme Oxygenase-1 Based Gene Encoded Heme Probe for Intracellular Heme Detection2017

    • 著者名/発表者名
      Junichi Taira, Otomi Nakashima, Hideyuki Komatsu, Hiroshi Sakamoto
    • 学会等名
      第54回ペプチド討論会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 細胞内の遊離ヘムの定量に向けたタンパク質性バイオプローブの開発2017

    • 著者名/発表者名
      中島音海, 平順一, 松田祥子, 小松英幸, 坂本寛
    • 学会等名
      2017年度生命科学系学会合同年次大会(第90回日本生化学会大会)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ヘム定量における非特異的に吸着したヘムの遊離処理法の検討2017

    • 著者名/発表者名
      吉村崇志, 中島幸徳, 平 順一, 小松英幸, 谷岡野人, 清水裕子, 森松 博, 坂本寛
    • 学会等名
      2017年度生命科学系学会合同年次大会(第90回日本生化学会大会)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] GSK-3はGrb14のBPSドメインのリン酸化を介してインスリン受容体とGrb14の複合体形成に関与する2017

    • 著者名/発表者名
      平順一, 吉田圭佑, 稲富孝平, 小松英幸, 坂本寛
    • 学会等名
      2017年度生命科学系学会合同年次大会(第90回日本生化学会大会)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ラット肝ミクロソーム中のヘム定量における非特異的ヘム吸着とその遊離処理の検討2016

    • 著者名/発表者名
      12.吉村崇志, 中島幸徳, 平 順一, 小松英幸, 谷岡野人, 清水裕子, 森松 博, 坂本 寛
    • 学会等名
      第23回日本生物工学会九州支部飯塚大会
    • 発表場所
      九州工業大学飯塚キャンパス, 飯塚市
    • 年月日
      2016-12-03
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 細胞内ヘム動態の検出に向けた新規バイオプローブの開発2016

    • 著者名/発表者名
      中島音海, 平 順一, 小松英幸, 末田慎二, 坂本 寛
    • 学会等名
      第23回日本生物工学会九州支部飯塚大会
    • 発表場所
      九州工業大学飯塚キャンパス, 飯塚市
    • 年月日
      2016-12-03
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Phosphorylation of Serine Residues in Grb14 BPS Domain Involves in the Complex Forming of Grb14 with Insulin Receptor2016

    • 著者名/発表者名
      平 順一, 稲富孝平, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      第53回ペプチド討論会
    • 発表場所
      京都テルサ, 京都市
    • 年月日
      2016-10-26
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Effect of Surfactants on Quantification of Heme in Biological Samples Using Heme Sensor Based on Fluorescently Labeled Heme Oxygenase-12016

    • 著者名/発表者名
      吉村崇志, 中島幸徳, 平 順一, 小松英幸, 谷岡野人, 清水裕子, 森松 博, 坂本 寛
    • 学会等名
      第53回ペプチド討論会
    • 発表場所
      京都テルサ, 京都市
    • 年月日
      2016-10-26
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Development of Fluorescence Protein Fused Heme Oxygenase-1 as Intracellular Free Heme Detection Probe2016

    • 著者名/発表者名
      中島音海, 平 順一, 小松英幸, 末田慎二, 坂本 寛
    • 学会等名
      第53回ペプチド討論会
    • 発表場所
      京都テルサ, 京都市
    • 年月日
      2016-10-26
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] GSK-3によるインスリンシグナル抑制因子Grb14のBPSドメインのリン酸化はインスリン受容体との複合体形成に影響する2016

    • 著者名/発表者名
      平 順一, 東元祐一郎, 小松英幸, 坂本 寛
    • 学会等名
      第40回タンパク質の構造と機能に関する九州シンポジウム
    • 発表場所
      指宿ベイテラス, 指宿市
    • 年月日
      2016-08-26
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] ヘム特異的センサーを利用した生体サンプル中の非特異的に吸着したヘムの定量2016

    • 著者名/発表者名
      吉村崇志, 中島幸徳, 平 順一, 小松英幸, 末田慎二, 谷岡野人, 清水裕子, 森松博史, 坂本 寛
    • 学会等名
      第53回化学関連支部合同九州大会
    • 発表場所
      北九州国際会議場, 北九州市
    • 年月日
      2016-07-02
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] ヘムオキシゲナーゼ-1とシトクロムP450還元酵素の相互作用の超遠心解析2016

    • 著者名/発表者名
      相良達哉, 平 順一, 杉島正一, 小松英幸, 坂本寛
    • 学会等名
      第53回化学関連支部合同九州大会
    • 発表場所
      北九州国際会議場, 北九州市
    • 年月日
      2016-07-02
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 細胞内遊離ヘム検出における蛍光蛋白質融合型heme oxygenase-1の評価2016

    • 著者名/発表者名
      中島音海, 平 順一, 小松英幸, 末田慎二, 坂本 寛
    • 学会等名
      第53回化学関連支部合同九州大会
    • 発表場所
      北九州国際会議場, 北九州市
    • 年月日
      2016-07-02
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] NADPH- シトクロムP450 還元酵素からヘムオキシゲナーゼへの電子移動反応の生化学的検討2016

    • 著者名/発表者名
      杉島正一, 平 順一, 佐藤秀明, 野口正人, 山本 健, 坂本 寛
    • 学会等名
      第16回日本蛋白質学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場, 福岡市
    • 年月日
      2016-06-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 生体サンプル中のヘム定量における非特異結合型ヘム遊離処理の検討2016

    • 著者名/発表者名
      吉村崇志, 中島幸徳, 平 順一, 小松英幸, 末田慎二, 谷岡野人, 清水裕子, 森松博史, 坂本 寛
    • 学会等名
      平成28年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      鹿児島大学郡元キャンパス, 鹿児島市
    • 年月日
      2016-05-14
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光蛋白質融合型heme oxygenase-1の発現・精製とヘムセンサーとしての応用に向けた検討2016

    • 著者名/発表者名
      中島音海, 平 順一, 小松英幸, 末田慎二, 坂本 寛
    • 学会等名
      平成28年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      鹿児島大学郡元キャンパス, 鹿児島市
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Quantification of free heme by using a sensor based on fluorescently labeled heme oxygenase-12015

    • 著者名/発表者名
      Shinya Koga, Yukinori Nakashima, Yuichiro Higashimoto, Shinji Sueda, Hideyuki Komatsu, Junichi Taira, Hiroshi Sakamoto
    • 学会等名
      2015 環太平洋国際化学会議(PACIFICHEM 2015)
    • 発表場所
      ホノルル,ハワイ(米国)
    • 年月日
      2015-12-15
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ヘムオキシゲナーゼ-1を基盤としたヘムセンサーによる生体試料中の遊離ヘムの定量2015

    • 著者名/発表者名
      平 順一、中島幸徳、義原 俊、古賀真也、末田慎二、小松英幸、 東元祐一郎、坂本 寛
    • 学会等名
      日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      九州大学箱崎キャンパス,福岡
    • 年月日
      2015-05-16
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [図書] PEPTIDE SCIENCE 20172018

    • 著者名/発表者名
      Ikuo Fujii (Editor)
    • 総ページ数
      231
    • 出版者
      The Japanese Peptide Society
    • ISBN
      9784931541184
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [図書] ライフサイエンスのための化学2016

    • 著者名/発表者名
      安藤祥司, 熊本栄一, 坂本 寛, 弟子丸正伸
    • 総ページ数
      205
    • 出版者
      化学同人
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [備考] 坂本寛研究室ホームページ

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書

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公開日: 2015-04-16   更新日: 2019-03-29  

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