| 研究課題/領域番号 |
15K06585
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生物機能・バイオプロセス
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| 研究機関 | 静岡県立大学 |
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研究代表者 |
河原崎 泰昌 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 准教授 (80303585)
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| 連携研究者 |
伊藤 圭祐 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 准教授 (40580460)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2017年度)
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| 配分額 *注記 |
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2017年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2016年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2015年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
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| キーワード | protein expression / Recombinant protein / yeast expression system / protein synthesis / molecular biotechnology / bimolecular engineering / 遺伝子工学 / 難生産性蛋白質 / 菌体高密度化 / Ygr067C / Adr1 / 糖鎖修飾 / 組換え蛋白質生産 / 組換え酵母 / 菌体密度 / 遺伝子発現 / 分泌蛋白質 / 高度糖鎖修飾 |
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| 研究成果の概要 |
難生産性蛋白質の活性型発現に関わる遺伝子群の同定・解析・応用を目的として研究を行った。遺伝子の調節因子としてAdr1、Ygr067Cを同定した。両者は非常に類似したDNA結合領域をもち、同一の標的遺伝子群を競合的に発現調節している可能性が示唆された。両遺伝子欠損株を作製し、下流遺伝子の発現に与える影響を定量的に調べた。また発現蛋白質の過剰糖鎖付加に着目し、予想糖鎖付加部位の多重置換体を作製した。これらの結果、Ygr067Cが難生産性蛋白質の生産に関係していた。
一方、アミノ酸置換を伴わない、低使用頻度コドンへのサイレント変異が蛋白質の発現量を増大させることを明らかにした。
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