胆管癌上皮間葉移行におけるTGF-β/miR-200ファミリーの直接交絡

• 研究課題/領域番号: 15K10199
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 水口 義昭 日本医科大学, 医学部, 助教 (70409217)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 中途終了 (2016年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2017年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2016年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: TGF-beta1 / microRNA 200 family / EMT / TGF-bta1 / microRNA-200

研究実績の概要

昨年度はサイトカインTGFbeta1が胆管細胞癌培養株においてmicroRNA200 familyの発現増大を転写レベルで直接コントロールしていることを確認した。また、TGFbeta1の投与により、細胞増殖が促進されることをスクラッチアッセイにて確認した。
我々はこれらの結果に基づき、TGFbeta1とmicroRNA200 familyの直接がEMTを促進していることを証明するために、TGF-beta1/microRNA200がコントロールし得るターゲットタンパクとしてOcculdin WIPF1をluciferase アッセイにて検討したが、予想される結果が得られなかった。
次にmicroRNA200 family の既知のターゲットタンパクであるZEB1が我々のEMT実験系においてどのような動きをしているかを確認した。まず、TGFbeta1投与後経時的に胆管細胞株のタンパクを回収し、Western blot法にてZEB1タンパクの発現量を測定した。結果：TGFbeta1投与　48-72時間後において、ZEB1タンパクの発現量が低下していることが確認された。これはTGFbeta1/microRNA200 familyのシグナルにより、ZEB1の発現量がコントロールされている可能性を示唆している。

研究成果

• [雑誌論文] Dysregulated microRNAs in progression of hepatocellular carcinoma: A systematic review. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizuguchi Y, Takizawa T, Yoshida H, Uchida E.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 巻: NA 号: 5 ページ: 391-406
  • DOI: 10.1111/hepr.12606
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Host cellular microRNA involvement in the control of hepatitis B virus gene expression and replication. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizuguchi Y, Takizawa T, Uchida E.
  • 雑誌名: World J Hepatol. 巻: 7(4) 号: 4 ページ: 696-702
  • DOI: 10.4254/wjh.v7.i4.696
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Breast tumor kinase/protein tyrosine kinase 6 (Brk/PTK6) activity in normal and neoplastic biliary epithelia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizuguchi Y, Specht S, Isse K, Sasatomi E, Lunz JG 3rd, Takizawa T, Demetris AJ.
  • 雑誌名: J Hepatol. 巻: 63(2) 号: 2 ページ: 399-407
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2015.02.047
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著