ゲノム編集によるバイシストロニックCreドライバーマウスの開発

• 研究課題/領域番号: 15K14359
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 杉山 文博 筑波大学, 医学医療系, 教授 (90226481)
• 研究分担者: 水野 聖哉 筑波大学, 医学医療系, 助教 (10633141)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: Bicistronic / CRISPR/Cas9 / Mice / バイシストロニック / creドライバーマウス / マウス / Cre / Ins1 / bicistronic

研究成果の概要

本プロジェクトはCRISPR/Cas9システムを用いたゲノム編集方法を利用し、興味ある内在性遺伝子を傷つけることなくCre遺伝子を同時に発現させるバイシストロニックCre発現システムによりCreドライバーマウスの開発を短期間で行うことを試みた。Ins1遺伝子終止配列直上に2A-Cre遺伝子をノックインしたマウスをCRISPR/Cas9とドナーDNAの前核期卵導入にて作製した。作製されたマウスは膵島β細胞でのみCre-loxP遺伝子組換えする能力があること、耐糖能異常は示さないことが確認され、本方法がCreドライバーマウス作製に有効な方法であることが明らかとなった。

研究成果

• [国際共同研究] Suez Canal University(Egypt)
• [国際共同研究] Suez Canal University(Egypt)
• [雑誌論文] Generation of CRISPR/Cas9-mediated bicistronic knock-in <i>ins1-cre</i> driver mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshikazu Hasegawa, Yoshikazu Hoshino, Abdelaziz E. Ibrahim, Kanako Kato, Yoko Daitoku1, Yoko Tanimoto, Yoshihisa Ikeda, Hisashi Oishi, Satoru Takahashi, Atsushi Yoshiki, Ken-ichi Yagami, Hiroyoshi Iseki, Seiya Mizuno, Fumihiro Sugiyama
  • 雑誌名: Experimental Animals 巻: 65 号: 3 ページ: 319-327
  • DOI: 10.1538/expanim.16-0016
  • NAID: 130006882371
  • ISSN: 0007-5124, 1341-1357, 1881-7122
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] CRISPR/Cas9を用いた膵β細胞特異的にCre酵素を発現するバイシストロニックCreドライバーマウスの開発 (2016)
  • 著者名/発表者名: 長谷川賀一、星野貴一、アブデラジーイブラヒム、加藤花名子、大徳陽子、谷本陽子、池田祥久、大石久史、高橋智、八神健一、伊関大敬、水野聖哉、杉山文博
  • 学会等名: 第６３回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: ミューザ川崎シンフォニーホール（神奈川県 川崎市）
  • 年月日: 2016-05-18