Crispr/Cas9ゲノム編集技術を基盤とした抗原特異的免疫細胞療法の確立

• 研究課題/領域番号: 15K14404
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 腫瘍治療学
• 研究機関: 千葉大学 (2016); 東京大学 (2015)
• 研究代表者: 植松 智 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (50379088)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: CRISPR / Cas9 / ゲノム編集 / がん抗原 / 細胞傷害性T細胞 / Crispr / CRISPR/CAS9 / がん抗原特異的CTL / 抗原特異的な癌免疫細胞療法

研究成果の概要

マウスCD8+T細胞に、T細胞受容体を標的として、改良型SpCas9リコンビナントタンパク質/ gRNA複合体を電気穿孔法を用いて細胞内に導入し、TCR欠損CD8+T細胞を作成した。その細胞に、hgp100がん抗原特異的TCR遺伝子を導入し、hgp100がん抗原特異的CTLを作出した。この細胞は、悪性黒色腫に対して高い細胞傷害性を示した。我々は、CRISPR/Cas9ゲノム編集システムを用いて、TCR遺伝子の除去に成功した。そしてTCR欠損CD8+T細胞にがん抗原特異的TCRsを遺伝子導入することで、がん抗原特異的細胞傷害性T細胞を作成することに成功した。

研究成果

• [国際共同研究] パスツール研究所(フランス)
• [国際共同研究] ハーバード大学(米国)
• [雑誌論文] G-CSF-induced sympathetic tone provokes fever and primes antimobilizing functions of neutrophils via PGE2. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kawano Y, Fukui C, Shinohara M, Wakahashi K, Ishii S, Suzuki T, Sato M, Asada N, Kawano H, Minagawa K, Sada A, Furuyashiki T, Uematsu S, Akira S, Uede T, Narumiya S, Matsui T, Katayama Y.
  • 雑誌名: Blood 巻: 129 号: 5 ページ: 587-597
  • DOI: 10.1182/blood-2016-07-725754
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Fine Particles Induce Alveolar Macrophage Death and Interleukin-1α Release to Promote Inducible Bronchus-Associated Lymphoid Tissue Formation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kuroda E, Ozasa K, Temizoz B, Ohata K, Koo CX, Kanuma T, Kusakabe T, Kobari S, Horie M, Morimoto Y, Nakajima S, Kabashima K, Ziegler SF, Iwakura Y, Ise W, Kurosaki T, Nagatake T, Kunisawa J, Takemura N, Uematsu S, Hayashi M, Aoshi T, Kobiyama K, Coban C, Ishii KJ.
  • 雑誌名: Immunity. 巻: 45(6) 号: 6 ページ: 1299-1310
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2016.11.010
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] p53 is a Host Cell Regulator during Herpes Simplex Encephalitis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Maruzuru Y, Koyanagi N, Takemura N, Uematsu S, Matsubara D, Suzuki Y, Arii J, Kato A, Kawaguchi Y.
  • 雑誌名: J Virol. 巻: 90(15) 号: 15 ページ: 6738-6745
  • DOI: 10.1128/jvi.00846-16
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Epithelial glycosylation in gut homeostasis and inflammation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Goto, Y., Uematsu, S. and Kiyono, H.
  • 雑誌名: Nature Immunology 巻: 17 号: 11 ページ: 1244-1251
  • DOI: 10.1038/ni.3587
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Isolation and Fuctional Analysis of Lamina PropriaDendritic Cells from the Mouse Small Intestine. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takemura N, Uematsu S.
  • 雑誌名: Methods Mol Biol. 巻: 1422 ページ: 181-188
  • DOI: 10.1007/978-1-4939-3603-8_17
  • ISBN: 9781493936014, 9781493936038
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Toll様受容体を標的とした急性放射線性消化管症候群の新たな予防戦略. (2016)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀, 植松 智
  • 雑誌名: 臨床免疫 臨床免疫・アレルギー科 巻: 66 ページ: 267-273
  • NAID: 40020953204
• [雑誌論文] 放射線誘導性細胞死が引き起こす臓器障害に対する自然免疫学的治療戦略. (2016)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀, 植松 智
  • 雑誌名: 実験医学増刊号 巻: 34 ページ: 110-115
• [雑誌論文] Direct Melanoma Cell Contact Induces Stromal Cell Autocrine Prostaglandin E2-EP4 Receptor Signaling that Drives Tumor Growth, Angiogenesis and Metastasis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Inada M, Takita M, Yokoyama S, Watanabe K, Tominari T, Matsumoto C, Hirata M, Maru Y, Maruyama T, Sugimoto Y, Narumiya S, Uematsu S, Akira S, Murphy G, Nagase H, Miyaura C.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 巻: 290 号: 50 ページ: 29781-93
  • DOI: 10.1074/jbc.m115.669481
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Roles of mPGES-1, an inducible prostaglandin E synthase, in enhancement of LPS-induced lymphangiogenesis in a mouse peritonitis model. (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsuda H, Hosono K, Tsuru S, Kurashige C, Sekiguchi K, Akira S, Uematsu S, Okamoto H, Majima M.
  • 雑誌名: Life Sci. 巻: 142 ページ: 1-7
  • DOI: 10.1016/j.lfs.2015.10.008
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Soluble flagellin co-immunization attenuates Th1 priming to Salmonella and clearance by modulating dendritic cell activation and cytokine production. (2015)
  • 著者名/発表者名: Flores-Langarica A, Bobat S, Marshall JL, Yam-Puc JC, Cook CN, Serre K, Kingsley RA, Flores-Romo L, Uematsu S, Akira S, Henderson IR, Toellner KM, Cunningham AF.
  • 雑誌名: Eur J Immunol. 巻: 45 号: 8 ページ: 2299-311
  • DOI: 10.1002/eji.201545564
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] 5-azacytidine-induced protein 2 (AZI2) regulates bone mass by fine-tuning osteoclast survival. (2015)
  • 著者名/発表者名: Maruyama K, Fukasaka M, Uematsu S, Takeuchi O, Kondo T, Saitoh T, Martino M, Akira S.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 290 号: 15 ページ: 9377-9386
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.631374
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 粘膜免疫応答を誘導する新規アジュバントの開発 (2017)
  • 著者名/発表者名: 植松智
  • 学会等名: 第10回次世代アジュバント研究会
  • 発表場所: 大阪府豊中市新千里東町1-4-2 千里ライフサイエンスセンター
  • 招待講演
• [学会発表] 慢性放射線腸障害における好酸球の必須の役割 (2016)
  • 著者名/発表者名: 植松智
  • 学会等名: 第40回日本リンパ学会総会 シンポジウム発表
  • 発表場所: 東京都文京区本郷7-3-1 伊藤国際学術研究センター
  • 招待講演
• [学会発表] 急性、慢性放射線腸障害における自然免疫の役割 (2016)
  • 著者名/発表者名: 植松智
  • 学会等名: 第53回日本消化器免疫学会総会 特別講演
  • 発表場所: 大阪市中央区城見1-4-1 ホテルニューオータニ大阪
  • 招待講演
• [学会発表] 急性、慢性放射線腸障害における ダイイングコードの解明 (2016)
  • 著者名/発表者名: 植松智
  • 学会等名: 第25回日本Cell Death学会学術集会
  • 発表場所: 東京都品川区 品川区立総合区民会館 きゅりあん
  • 招待講演
• [学会発表] Acute and chronic radiation injury in small intestine. (2015)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Uematsu.
  • 学会等名: 第４４回日本免疫学会学術集会.シンポジウム.
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（北海道札幌市）
  • 年月日: 2015-11-18
  • 招待講演
• [学会発表] Resident myofibroblasts and eosinophils create a mutual activation loop for submucosal fibrosis in small intestine after abdominal irradiation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Uematsu.
  • 学会等名: Toll 2015
  • 発表場所: マルベラ、スペイン
  • 年月日: 2015-09-30
  • 国際学会
• [学会発表] 消化管自然免疫からみた食物アレルギーの成立機構. (2015)
  • 著者名/発表者名: 植松智
  • 学会等名: 第４６回日本職業・環境アレルギー学会総会・学術大会シンポジウム
  • 発表場所: 東京大学伊藤国際学術研究センター（東京都文京区）
  • 年月日: 2015-07-03
  • 招待講演
• [図書] 次世代アジュバント開発のためのメカニズム解明と安全性評価 (2017)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀、植松 智
  • 総ページ数: 9
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] 炎症と免疫「放射線誘導性腸管上皮傷害におけるTLR3の役割」 (2016)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀, 植松 智.
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 先端医学社
• [図書] 臨床免疫・アレルギー科「小腸粘膜固有層の自然免疫細胞が担う腸管免疫応答. 」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀, 植松 智.
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 科学評論社
• [図書] 臨床免疫・アレルギー科「放射線誘導性小腸上皮傷害におけるTLR3の役割.」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀, 植松 智.
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 科学評論社
• [図書] 医学のあゆみ「Toll様受容体と急性放射線性消化管症候群.」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 武村 直紀, 植松 智.
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 医歯薬出版株式会社
• [備考] 千葉大学大学院医学研究院・医学部粘膜免疫学
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/mucosa/
• [備考] 東京大学医科学研究所 国際粘膜ワクチン開発研究センター 自然免疫制御分野
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/shizenmenekiseigyo/
• [産業財産権] ワクチン用アジュバント、ワクチン組成物、及び免疫誘導方法 (2016)
  • 発明者名: 植松智、武村直紀
  • 権利者名: 植松智、武村直紀
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2016-06-10
  • 外国
• [産業財産権] ワクチン用アジュバント、ワクチン組成物、及び免疫誘導方法 (2015)
  • 発明者名: 植松智 武村直紀
  • 権利者名: 植松智 武村直紀
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2015-117871
  • 出願年月日: 2015-06-10