琵琶湖固有魚種におけるin vitro 卵子分化培養法の開発

• 研究課題/領域番号: 15K14440
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物資源保全学
• 研究機関: 立命館大学
• 研究代表者: 高田 達之 立命館大学, 薬学部, 教授 (90206756)
• 研究分担者: 檜垣 彰吾 立命館大学, 薬学部, 助教 (70595256)
• 連携研究者: 酒井 則良 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 准教授 (50202081) ; 今村 公紀 京都大学, 霊長類研究所, 助教 (80567743)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2015年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 生殖細胞分化 / 固有魚種 / in vitro 分化 / 卵原細胞 / ホンモロコ / 琵琶湖 / 琵琶湖固有種 / in vitro培養 / 卵子形成 / n vitro培養 / 卵子培養

研究成果の概要

絶滅の危機にある琵琶湖固有種の保全、復元を目的として、琵琶湖固有種ホンモロコの卵子をin vitro培養で作製する技術の開発に取り組んだ。その結果、卵子のもととなる未分化な卵原細胞の凍結保存、培養による増殖が可能であることを明らかにした。
さらに卵母細胞の培養による細胞質サイズの成長、卵子の培養液中への放出も確認された。本研究は、琵琶湖固有種ホンモロコにおいてin vitro培養による卵子形成に必要な卵原細胞の凍結保存、分化培養の技術基盤を確立し、その可能性を示した。一方で、そのサイズは正常卵子より小さかったことから卵子成熟に関して、今後さらに検討が必要であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] In vitro differentiation of fertile sperm from cryopreserved spermatogonia of the endangered endemic cyprinid honmoroko (Gnathopogon caerulescens) (2017)
  • 著者名/発表者名: Higaki, S., Shimada, M., Kawamoto, K., Todo, T., Kawasaki, T., Tooyama, I., Fujioka, Y., Sakai, N., Takada, T.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 7 号: 1 ページ: 42852-42852
  • DOI: 10.1038/srep42852
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] DNA methylation dynamics in mouse preimplantation embryos revealed by mass spectrometry (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshinori Okamoto, Naoko Yoshida, Toru Suzuki, Nobuhiro Shimozawa, Maki Asami, Tomonari Matsuda, Nakao Kojima, Anthony C. F. Perry & Tatsuyuki Takada
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 該当しない 号: 1 ページ: 19134-19134
  • DOI: 10.1038/srep19134
  • NAID: 120005822766
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] In vitro production of fertile sperm from cryopreserved spermatogonia of the endangered endemic cyprinid honmoroko (Gnathopogon caerulescens) (2017)
  • 著者名/発表者名: Tatsuyuki Takada, Manami Shimada, Kazuaki Kawamoto, Takaaki Todo, Toshihiro Kawasaki, Ikuo Tooyama, Yasuhiro Fujioka, Noriyoshi Sakai, Shogo Higaki
  • 学会等名: 4th World Congress of Reproductive Biology
  • 発表場所: Okinawa convention center,Ginowan, Okinawa, Japan
  • 年月日: 2017-09-27
  • 国際学会
• [学会発表] In vitro differentiation of fertile sperm from cryopreserved spermatogonia of the endangered endemic cyprinid honmoroko (Gnathopogon caerulescens) (2017)
  • 著者名/発表者名: Tatsuyuki Takada, Manami Shimada, Kazuaki Kawamoto, Takaaki Todo, Toshihiro Kawasaki, Ikuo Tooyama, Yasuhiro Fujioka, Noriyoshi Sakai, Shogo Higaki
  • 学会等名: The Society for the Study of Reproduction 2017 Annual Meeting
  • 発表場所: Marriott Wardman Park, Washington D.C. USA
  • 年月日: 2017-07-13
  • 国際学会
• [学会発表] 琵琶湖固有魚のin vitro精子分化系を用いた化学物質の影響解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高田達之, 藤東貴昭、小野友梨子、檜垣彰吾、小丸愛香
  • 学会等名: 日本内分泌撹乱化学物質学会
  • 発表場所: 文部科学省研究交流センター（茨城県、つくば市）
  • 年月日: 2016-12-08
• [学会発表] 琵琶湖固有種ホンモロコ(Gnathopogon caerulescens)における雌雄生殖細胞低温保存の試み (2016)
  • 著者名/発表者名: 檜垣彰吾、藤東貴昭、手島黎子、島田愛美, 酒井則良,高田達之
  • 学会等名: 日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 麻布大学（神奈川県、相模原市）
  • 年月日: 2016-09-12
• [学会発表] 生殖細胞特異的にVenusを発現する琵琶湖固有種ホンモロコ(Gnathopogon caerulescens)作出の試み (2016)
  • 著者名/発表者名: 檜垣彰吾、藤東貴昭、手島黎子、島田愛美, 酒井則良,高田達之
  • 学会等名: 日本水産学会
  • 発表場所: 近畿大学（奈良県、奈良市）
  • 年月日: 2016-09-10
• [学会発表] DNA methylation dynamics in mouse preimplantation embryos revealed by mass spectrometry (2016)
  • 著者名/発表者名: Okamoto Y, Yoshida N, Asami M Shimozawa N, Matsuda T, Kojima N, Perry A.F.P., Takada T
  • 学会等名: International Symposium on Epigenome Dynamics and Regulation in Germ Cells
  • 発表場所: 京都大学、京都府京都市
  • 年月日: 2016-02-18
  • 国際学会
• [学会発表] Flow Cytometric Analysis of Testicular Cells in Endangered Endemic Cyprinid Honmoroko (Gnathopogon caerulescens) (2015)
  • 著者名/発表者名: Takaaki Todo, Shogo Higaki, Reiko Teshima, Ikuo Tooyama, Yasuhiro Fujioka, Noriyoshi Sakai, Tatsuyuki Takada
  • 学会等名: 21st Japanese Medaka and Zebrafish Meeting
  • 発表場所: 大阪大学、大阪府池田市
  • 年月日: 2015-09-19
• [学会発表] フローサイトメトリーによる琵琶湖固有種ホンモロコ(Gnathopogon caerulescens)精巣細胞の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 高田達之, 手島黎子、檜垣彰吾、島田愛美, 酒井則良, 藤東貴昭
  • 学会等名: 第108回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 宮崎大学、宮崎県宮崎市
  • 年月日: 2015-09-17
• [学会発表] 琵琶湖固有種ホンモロコ(Gnathopogon caerulescens)における全精巣ガラス化低温保存の試み (2015)
  • 著者名/発表者名: 檜垣彰吾、藤東貴昭、手島黎子、島田愛美, 酒井則良,、高田達之
  • 学会等名: 第108回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 宮崎大学、宮崎県宮崎市
  • 年月日: 2015-09-17
• [備考] 立命館大学 R-GIRO
  • URL: http://www.ritsumei.ac.jp/research/r-giro/projects/environment/biosensor.html/
• [備考] 立命館大学 R-GIRO
  • URL: http://www.ritsumei.ac.jp/research/r-giro/projects/environment/biosensor.html/