蛍光超遠心分析法の開発

• 研究課題/領域番号: 15K14457
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 内山 進 大阪大学, 工学研究科, 准教授 (90335381)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2016年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2015年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
• キーワード: 抗体 / 複合体 / 蛋白質医薬 / 免疫原性 / 超遠心分析 / 質量分析 / 免疫複合体 / TNF / 抗体医薬 / バイオ医薬品 / 定量評価 / 蛍光ラベル化 / 蛍光超遠心

研究成果の概要

蛍光超遠心沈降速度法を用いて、血清中における抗原と抗体の相互作用様式の決定を試みた。その結果、抗体の種類によって形成される複合体のサイズが異なっており、各抗体の複合体サイズの形成傾向についてはインフリキシマブはアダリムマブやエタネルセプトよりも抗原と大きな複合体を形成することが分かった。一方、形成される免疫複合体の大きさとFc受容体を介した免疫細胞内における信号伝達の程度との関係を評価した結果、蛍光超遠心分析法で確認された免疫複合体サイズの大きさと、Fc受容体を介した信号伝達との間には高い相関が観測され、特に大きな免疫複合体を形成する抗体では、強い信号伝達が観測された。

研究成果

• [雑誌論文] Analytical ultracentrifugation with fluorescence detection 1 system reveals differences in complex formation between recombinant human TNFα and different biological TNFα antagonists in various environments. (2017)
  • 著者名/発表者名: Krayukhina, E., Noda, M., Ishii, K., Maruno, T., Wakabayashi, H., Tada, M., Suzuki, T., Ishii-Watabe, A., Kato, M., Uchiyama, S.
  • 雑誌名: mabs 巻: 9 号: 4 ページ: 664-679
  • DOI: 10.1080/19420862.2017.1297909
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり