「ナノピペット」による蛍光標識したストレス顆粒の単離

• 研究課題/領域番号: 15K14707
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 金 俊達 筑波大学, 生命領域学際研究センター, 助教 (90570036)
• 連携研究者: 深水 昭吉 筑波大学, 生命領域学際研究センター, 教授 (60199172)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: ストレス顆粒 / ナノピペット

研究成果の概要

ストレス顆粒は、ストレス刺激に応答して一過性に形成される細胞質内の構造体であり、RNA結合タンパク質や mRNAを顆粒内に取り込み、翻訳を一時的に停止させることで mRNAの安定性や翻訳を調節している。近年、この顆粒の形成が細胞のストレス適応機構として重要な役割を担っていることが明らかとなったが、この顆粒が形質膜を持たないことから生化学的な単離や精製が困難であるため、形成や制御に働く全構成因子は未だ分かっていない。本研究では、生細胞から蛍光融合タンパク質をプローブとして、 先端口径が約 50 nmのナノピペットを用いて、ストレス顆粒をナノ環境から単離・精製することを目的とする。

研究成果

• [雑誌論文] Angiodysplasia in embryo lacking protein arginine methyltransferase 1 (PRMT1) in vascular endothelial cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ishimaru, T., Ishida, J., Kim, JD., Mizukami, H., Hara, K., Hashimoto, M., Yagami, KI., Sugiyama, F., and Fukamizu, A.
  • 雑誌名: Journal of Biochemistry 巻: 161 ページ: 255-258
  • DOI: 10.1093/jb/mvw095
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Novel helical assembly in arginine methyltransferase 8 (2016)
  • 著者名/発表者名: Toma-Fukai S, Kim JD, Park KE, Kuwabara N, Shimizu N, Krayukhina E, Uchiyama S, Fukamizu A, Shimizu T
  • 雑誌名: Journal of Molecular Biology 巻: 428 号: 6 ページ: 1197-1208
  • DOI: 10.1016/j.jmb.2016.02.007
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] PRMT8 as a phospholipase regulates Purkinje cell dendritic arborization and motor coordination. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kim, J.D., Park, K.E., Ishida, J., Kako, K., Hamada, J., Kani, S., Takeuchi, M., Namiki, K., Fukui, H., Fukuhara, S., Hibi, M,. Kobayashi, M., Kanaho, Y., Kasuya, Y., Mochizuki, N., Fukamizu, A.
  • 雑誌名: Sci. Adv. 巻: 1 号: 11
  • DOI: 10.1126/sciadv.1500615
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] PRMT1 v2 ノックアウトマウス由来MEFを用いたスプライシングバリアントの細胞機能解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 水上早瀬、石田純治、金 俊達、水野聖哉、杉山文博、深水昭吉
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県・横浜市）
  • 年月日: 2016-12-02
• [学会発表] PRMT8 as a phospholipase is required for Purkinje cell dendritic arborization and motor coordination (2016)
  • 著者名/発表者名: Jun-Dal Kim、Junji Ishida、 Akiyoshi Fukamizu
  • 学会等名: International meeting of the federation of Korean microbiological societies
  • 発表場所: KINTEX、 (Gyeonggi-do・Korea)
  • 年月日: 2016-11-03
  • 国際学会
• [学会発表] 生体内におけるPRMT1スプライシングバリアントの機能 (2016)
  • 著者名/発表者名: 水上早瀬、石田純治、金 俊達、水野聖哉、杉山文博、深水昭吉
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県・仙台市）
  • 年月日: 2016-09-27
• [学会発表] ナノピペットを用いた単一細胞内の下流の単離 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金 俊達、深水昭吉、ジンウイクン、トートエステル
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県・仙台市）
  • 年月日: 2016-09-26
• [学会発表] ホスホリパーゼ活性を持つアルギニンメチル化酵素の小脳機能に対する役割 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金 俊達、石田純治、加香孝一郎、濱田樹理、深水昭吉
  • 学会等名: 第10回炎症・脂質代謝・メタボリサーチフォーラム
  • 発表場所: 東京大学山上会館、東京、文京区
  • 年月日: 2016-02-13
• [学会発表] ヒスタミンのH3受容体を介した心腎病態に対する作用の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 野口和之、石田純治、石丸友博、川崎祥平、金 俊達、権 哲源、加香孝一郎、山縣邦弘、深水昭吉
  • 学会等名: Advans 研究会2015
  • 発表場所: ホテルグランドパレス、東京都、千代田区
  • 年月日: 2015-12-12
• [学会発表] 血管内皮タンパク質アルギニンメチル基転移酵素・PRMT1の機能解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 石丸友博、石田純治、金 俊達、橋本美涼、水上早瀬、杉山文博、八神健一、深水昭吉
  • 学会等名: 第19回日本心血管内分泌代謝学会学術総会
  • 発表場所: 神戸国際会議場、兵庫県、神戸
  • 年月日: 2015-12-10
• [学会発表] アルギニンメチル化酵素PRMT8のホスホリパーゼ活性と生物学的意義 (2015)
  • 著者名/発表者名: 金 俊達、石田純治、加香孝一郎、濱田樹理、深水昭吉
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド、兵庫県、神戸
  • 年月日: 2015-12-02