新奇セカンドメッセンジャーによる輸送体のアロステリック制御メカニズムの解析

• 研究課題/領域番号: 15K14911
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 応用分子細胞生物学
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 阿部 敬悦 東北大学, 農学研究科, 教授 (50312624)
• 連携研究者: 七谷 圭 東北大学, 大学院工学研究科, 助教 (00547333) ; 小笠原 諭 東北大学, 医学系研究科, 助教 (30546685)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2015年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 輸送体 / 物質生産 / 構造解析

研究成果の概要

細菌のAspartate:Aalanine交換輸送体AspTは産業上有用な排出輸送体である。本研究では、AspTの構造解析を目指してAspTの高発現・高純度精製条件を確立した。AspT野生型および耐熱性変異体の各種リガンド共存下での熱安定条件を探索し、AspTの結晶化を試みた。結晶が得られてＸ線構造解析に着手した。現在、４Åまで分解能が上がってきている。AspTは細菌制御物質cyclic-di-AMP(c-diAMP)と相互作用することが推定されたが、輸送活性制御への大きな効果は無かった。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of EayjjPB encoding a dicarboxylate transporter important for succinate production under aerobic and anaerobic conditions in Enterobacter aerogenes (2018)
  • 著者名/発表者名: Fukui Keita、Nanatani Kei、Hara Yoshihiko、Tokura Mitsunori、Abe Keietsu
  • 雑誌名: Journal of Bioscience and Bioengineering 巻: 印刷中 号: 5 ページ: 505-512
  • DOI: 10.1016/j.jbiosc.2017.12.007
  • NAID: 40021552561
  • 査読あり
• [雑誌論文] Escherichia coli yjjPB genes encode a succinate transporter important for succinate production (2017)
  • 著者名/発表者名: Fukui Keita、Nanatani Kei、Hara Yoshihiko、Yamakami Suguru、Yahagi Daiki、Chinen Akito、Tokura Mitsunori、Abe Keietsu
  • 雑誌名: Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry 巻: 81 号: 9 ページ: 1837-1844
  • DOI: 10.1080/09168451.2017.1345612
  • 査読あり
• [雑誌論文] R76 in transmembrane domain 3 of the aspartate:alanine transporter AspT is involved in substrate transport. (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Satomi, Nanatani Kei, Abe Keietsu
  • 雑誌名: Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry 巻: 80 号: 4 ページ: 744-747
  • DOI: 10.1080/09168451.2015.1123609
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 醤油醸造微生物の温故知新 -乳酸菌を例に- (2015)
  • 著者名/発表者名: 阿部敬悦, 七谷 圭
  • 雑誌名: 醤油の研究と技術 巻: 41 ページ: 109-116
  • NAID: 40020426119
• [学会発表] Aspartate：Alanine 交換輸送体 AspT の立体構造解析に向けた高発現系・精製系の構築 (2017)
  • 著者名/発表者名: 宮本 あかり，〇國井 宏太，光岡 薫, 小笠原 諭，七谷 圭，阿部 敬悦
  • 学会等名: 酵素・補酵素研究会2017
• [学会発表] 乳酸菌由来アミノ酸トランスポーターの基質結合による熱安定化 (2017)
  • 著者名/発表者名: 金ななせ、千葉文香、小笠原諭、〇七谷圭、阿部敬悦
  • 学会等名: 第12回トランスポーター研究会年会
• [学会発表] 乳酸菌由来アミノ酸トランスポーターの基質結合によるコンフォメーション変化 (2017)
  • 著者名/発表者名: 鈴木聡美、木村拓哉、七谷圭、〇阿部敬悦
  • 学会等名: 第12回トランスポーター研究会年会
• [学会発表] 乳酸菌 Tetragenococcus halophilus 由来Aspartate : Alanine 交換輸送体 AspTの多量体構造の解明 (2017)
  • 著者名/発表者名: 宮本あかり 、國井宏太、黒野健一郎、七谷圭、〇 阿部敬悦
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会2017年度大会
• [学会発表] Aspartate:Alanine交換輸送体AspTの結晶化へ向けた熱安定変異体探索 (2017)
  • 著者名/発表者名: ○千葉文香、金ななせ、七谷圭、阿部敬悦
  • 学会等名: 生物工学会北日本支部シンポジウム2017福島
• [学会発表] 大腸菌Ala排出機能欠損株を用いた乳酸菌 Tetragenococcus halophilus 由来Aspartate : Alanine 交換輸送体 AspT の輸送評価系の構築 (2017)
  • 著者名/発表者名: 増田歩、七谷圭、勝部哲、米山裕、阿部敬悦
  • 学会等名: 生物工学会北日本支部シンポジウム2017福島
• [学会発表] 低親和性基質結合による乳酸菌Tetragenococcus halophilus 由来Aspartate:Alanine 交換輸送体(AspT)の熱安定性の向上 (2016)
  • 著者名/発表者名: 千葉文香, 金ななせ, 鈴木聡美, 七谷 圭, 阿部敬悦
  • 学会等名: 生体エネルギー研究会第42回討論会
  • 発表場所: 名古屋工業大学, 名古屋
  • 年月日: 2016-12-19
• [学会発表] 乳酸菌 Tetragenococcus halophilus 由来 Aspartate:Alanine 交換輸送体AspT の高生産系の構築およびその解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 宮本あかり, 鈴木聡美, 小笠原諭, 七谷 圭, 阿部敬悦
  • 学会等名: 生体エネルギー研究会第42回討論会
  • 発表場所: 名古屋工業大学, 名古屋
  • 年月日: 2016-12-19
• [学会発表] 基質結合による構造の安定化を用いた乳酸菌Tetragenococcus halophilus 由来AspT の基質特異性解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金ななせ、鈴木聡美、七谷圭、阿部敬悦
  • 学会等名: 日 本農芸化学会2016 年度大会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（札幌市）
  • 年月日: 2016-03-27
• [学会発表] 発酵生産とトランスポーター ：エネルギー生成に共役するトランスポーターを例に (2016)
  • 著者名/発表者名: 阿部敬悦。七谷圭
  • 学会等名: 日 本農芸化学会2016 年度大会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（札幌市）
  • 年月日: 2016-03-26
  • 招待講演
• [学会発表] L-Aspartate : L-Alanine 交換輸送体AspT の基質輸送におけるGxxxG モチーフとR76 の役割 (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴木聡美、七谷圭、阿部敬悦
  • 学会等名: 第67 回 日本生物工学会大会
  • 発表場所: 城山観光ホテル（鹿児島県鹿児島市）
  • 年月日: 2015-10-26
• [備考] 東北大学 大学院農学研究科 応用微生物学分野
  • URL: http://www.agri.tohoku.ac.jp/microbio/index-j.htm
• [備考] 東北大学農学研究科 応用微生物学分野
  • URL: http://www.agri.tohoku.ac.jp/microbio/index-j.html
• [備考] 東北大学研究者データベース 阿部敬悦
  • URL: http://db.tohoku.ac.jp/whois/detail/f19845e9d146288e45e0b5ab38851a52.html