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迅速・高精度な組織切片in situ遺伝子定量分析法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 15K15199
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 病態検査学
研究機関日本女子大学

研究代表者

佐藤 香枝  日本女子大学, 理学部, 准教授 (40373310)

連携研究者 西原 広史  北海道大学, 医学研究科, 教授 (50322805)
研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2015年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワード遺伝子分析 / マイクロデバイス / DNA / マイクロ流路 / mRNA / Padlock probe / 組織切片
研究成果の概要

微量な試料を扱うマイクロデバイスとPadlock/RCAという特異的な細胞内遺伝子定量分析法を組み合わせた方法を開発した。直線型の流路では10uLの反応液が必要だったのに対し、円径の反応容器では導入量3.5 uLと微少量の反応液で増幅産物が得られた。さらに超音波により溶液を撹拌することで蛍光プローブを作用させる時間を5分まで短縮することが出来た。ヒト妊娠性絨毛癌BeWo細胞でがん遺伝子Krasの転写産物を検出できた。

報告書

(4件)
  • 2017 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実施状況報告書
  • 2015 実施状況報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2017 2016 2015

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 謝辞記載あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Molecular crowding improves bead-based padlock rolling circle amplification2017

    • 著者名/発表者名
      N Sasaki, Y Gunji, C Kase, K Sato
    • 雑誌名

      Analytical Biochemistry

      巻: 519 ページ: 15-18

    • DOI

      10.1016/j.ab.2016.12.002

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Microdevice in Cellular Pathology: Microfluidic Platforms for Fluorescence <i>in situ</i> Hybridization and Analysis of Circulating Tumor Cells2015

    • 著者名/発表者名
      K. Sato
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 31 号: 9 ページ: 867-873

    • DOI

      10.2116/analsci.31.867

    • NAID

      130005097926

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Microfluidic-based in situ padlock probe rolling-circle amplification for mRNA analysis2017

    • 著者名/発表者名
      C. Kase, Y. Ishigaki, and K. Sato
    • 学会等名
      The 21st International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences, microTAS 2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] マイクロチップを用いた細胞内Padlock/RCA法による遺伝子分析の高効率化2016

    • 著者名/発表者名
      佐藤 香枝 ・ 石垣 有理
    • 学会等名
      日本分析化学会第65年会
    • 発表場所
      北海道大学
    • 年月日
      2016-09-16
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Optimization of microfluidic-based in situ padlock rolling circle amplification2015

    • 著者名/発表者名
      Y. Ishigaki, K. Sato
    • 学会等名
      Micro Total Analysis Systems 2015
    • 発表場所
      Gyeongju(韓国)
    • 年月日
      2015-10-26
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 国際学会

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公開日: 2015-04-16   更新日: 2019-03-29  

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