ヒト腸管上皮幹細胞における１細胞イメージング技術の開発

• 研究課題/領域番号: 15K15287
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 土屋 輝一郎 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 准教授 (40376786)
• 研究分担者: 渡辺 守 (渡邉 守) 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (10175127)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2015年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: １幹細胞可視化 / Lgr5プロモーター / １幹細胞動態

研究成果の概要

蛍光発現遺伝子を腸管上皮初代培養細胞に独自の手法で導入することにより、オルガノイド内の細胞をランダムに蛍光標識した。その中でクリプト内に１細胞のみ蛍光標識された細胞を探索し、単離した。１蛍光細胞からオルガノイドが樹立可能であったことから、幹細胞であることを確認した。そこで、１蛍光細胞の分裂能、分化細胞系譜などを３次元で経時的に観察した。さらに蛍光陰性幹細胞と蛍光幹細胞との相互関係を解析することで、一つの絨毛の形成に対する幹細胞同士の役割分担をマイクロアレイ解析にて評価した。またヒト腸管上皮初代培養を用いて１幹細胞の評価を開始しており、疾患患者由来の１幹細胞との比較検討を行う基盤を構築した。

研究成果

• [雑誌論文] Long-term inflammation transforms intestinal epithelial cells of colonic organoids. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hibiya S, Tsuchiya K, Hayashi R, Horita N, Watanabe S, Shirasaki T, Nishimura R, Kimura N, Nishimura T, Gotoh N, Oshima S, Okamoto R, Nakamura T, Watanabe M
  • 雑誌名: J Crohns Colitis. 巻: 61 ページ: 621-630
  • DOI: 10.1093/ecco-jcc/jjw186
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Reduced human α-defensin 6 in non-inflamed jejunal tissue of Crohn’s disease patients (2016)
  • 著者名/発表者名: Hayashi R , Tsuchiya K, Okamoto R,Watanabe M,et al
  • 雑誌名: Inflammatory Bowel Diseases 巻: 22 号: 5 ページ: 1119-28
  • DOI: 10.1097/mib.0000000000000707
  • 査読あり
• [雑誌論文] Atonal homolog 1 protein stabilized by tumor necrosis factor α induces high malignant potential in colon cancer cell line. (2015)
  • 著者名/発表者名: Keita Fukushima, Kiichiro Tsuchiya,Okamoto Ryuichi, Mamoru Watanabe,et al
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 106 号: 8 ページ: 1000-7
  • DOI: 10.1111/cas.12703
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Anti-Tumor Necrosis Factor Therapy in Inflammatory Bowel Disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya K
  • 雑誌名: Front Gastrointest Res. 巻: 34 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1159/000381380
  • ISBN: 9783318054736, 9783318054743
  • 査読あり
• [学会発表] 消化管幹細胞研究の最前線 (2017)
  • 著者名/発表者名: 土屋輝一郎
  • 学会等名: 第13回日本消化管学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2017-03-17
  • 招待講演
• [学会発表] 炎症関連大腸がんにおけるがん幹細胞形質獲得機構 (2016)
  • 著者名/発表者名: 土屋 輝一郎
  • 学会等名: 日本がん分子標的治療学会 第11回トランスレーショナルリサーチワークショップ
  • 発表場所: 都市センターホテル（東京都千代田区）
  • 年月日: 2016-01-15
• [学会発表] Mapping biopsy of entire small intestine revealed specific gene expression in Crohn’s disease (2015)
  • 著者名/発表者名: Kiichiro Tsuchiya, Ryohei Hayashi, Shuji Hibiya, Keita Fukushima, Nobukatsu Horita, Tomoaki Shirasaki, Eriko Okada, Akihiro Araki, Kazuo Ohtsuka, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: UEG Week 2015
  • 発表場所: バルセロナ（スペイン）
  • 年月日: 2015-10-24
  • 国際学会
• [学会発表] Acquisition of enhanced malignant potential in inflammation associated colon cancer (2015)
  • 著者名/発表者名: Kiichiro Tsuchiya, Shuji Hibiya, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
  • 招待講演
• [学会発表] Mapping biopsy of entire small intestine is useful to assess the pathogenesis of Crohn’s disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kiichiro Tsuchiya, Ryohei Hayashi Mamoru Watanabe
  • 学会等名: AOCC2015
  • 発表場所: 北京（中国）
  • 年月日: 2015-06-18
  • 国際学会 / 招待講演