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ウイルスベクターによる高感度HBV複製検出系を用いたcccDNA生成機序の解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K19105
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 ウイルス学
研究機関東京大学

研究代表者

近藤 小貴  東京大学, 医科学研究所, 助教 (80451871)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2016年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2017年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2016年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワードB型肝炎ウイルス / アデノウイルスベクター / cccDNA合成阻害 / ウイルスゲノム複製
研究実績の概要

B型肝炎ウイルス(HBV)の複製ゲノムであるcccDNA(covalently closed circular DNA)は既存の治療法で標的となっていないため、HBV保因者から完全に排除することは未だ困難である。HBVは動物モデルが確立しておらず、培養細胞でのゲノム複製効率は極めて低いため解析が難しい。特にcccDNA生成過程の詳細は明らかとなっていない。本研究では、肝細胞への遺伝子導入効率が特に高いアデノウイルス(Ad)ベクターを用いて培養細胞でのゲノム複製を高効率に検出する系の確立を目指し、本系を用いて我々が既に同定しているcccDNAの生成に失敗する変異体等の変異型HBVゲノムにおけるゲノム複製を詳細に解析することでcccDNA生成に必要なゲノム領域や因子を同定し、cccDNA生成阻害薬への応用を最終目的として研究を行っている。
そのために本研究ではアデノウイルス(Ad)ベクターを用いた新たな高感度HBV複製ゲノム検出系を確立し、本年度論文として報告を行った(Suzuki et al., Sci. Rep., 2017)。この系を用いて複数の変異型HBVゲノムを用いて解析を行うことで今まで複製効率、検出感度が低く詳細が明らかとなっていないcccDNA生成のメカニズムを解明することを想定していたが、本年度は産前、産後及び育児休暇等の取得により研究を行うことが困難となったため、研究費の申請は行わなかった。

報告書

(2件)
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実施状況報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2017 2016 2015

すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 3件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Efficient genome replication of hepatitis B virus using adenovirus vector: a compact pregenomic RNA-expression unit2017

    • 著者名/発表者名
      Suzuki M., Kondo S., Yamasaki M., Matsuda N., Nomoto A., Suzuki T., Saito I., Kanegae Y.
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 3 ページ: 1-1

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Establishment of a tamoxifen-inducible Cre-driver mouse strain for widespread and temporal genetic modification in adult mice2016

    • 著者名/発表者名
      Hirotake Ichise, Akiko Hori, Seiji Shiozawa, Saki Kondo, Yumi Kanegae, Izumu Saito, Taeko Ichise, and Nobuaki Yoshida
    • 雑誌名

      Experimental Animals

      巻: 65 号: 3 ページ: 231-244

    • DOI

      10.1538/expanim.15-0126

    • NAID

      130006882370

    • ISSN
      0007-5124, 1341-1357, 1881-7122
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書 2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Preferable sites and orientations of transgene inserted in the adenovirus vector genome : The E3 site may be unfavorable for transgene position2015

    • 著者名/発表者名
      M Suzuki, S Kondo, Z Pei, A Maekawa, I Saito and Y Kanegae
    • 雑誌名

      Gene Therapy

      巻: 1 号: 5 ページ: 1-9

    • DOI

      10.1038/gt.2014.124

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Cas9高発現アデノウイルスベクター及び多数guide RNA同時発現によるゲノム編集効率の至適化とその応用2015

    • 著者名/発表者名
      前川 文、近藤 小貴、鈴木 まりこ、斎藤 泉、鐘ヶ江 裕美
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(兵庫・神戸)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] “HBV-Adシステム”を用いた効率的なHBVゲノム複製2015

    • 著者名/発表者名
      鈴木まりこ、近藤小貴、山﨑学、斎藤泉、柴崎正勝、鐘ヶ江裕美
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(兵庫・神戸)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Efficient production of the replicating HBV genome using adenovirus vector2015

    • 著者名/発表者名
      近藤小貴、鈴木まりこ、山﨑学、柴崎正勝、斎藤泉、鐘ヶ江裕美
    • 学会等名
      日本ウイルス学会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡県・福岡市)
    • 年月日
      2015-11-22
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Improvement of the method to detect the replicating HBV genome in the cells infected with adenovirus vector expressing pregenomic RNA2015

    • 著者名/発表者名
      Mariko Suzuki, Saki Kondo, Manabu Yamasaki, Yumi Kanegae, Masakatsu Shibasaki, Izumu Saito
    • 学会等名
      International meeting on the molecular biology of Hepatitis B viruses
    • 発表場所
      Dolce Bad Nauheim (Germany)
    • 年月日
      2015-10-04
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Multiplex guide RNAs targeting HBV genome expressed using adenovirus vector improve the efficiency of CRISPR/Cas9 system2015

    • 著者名/発表者名
      Aya Maekawa, Saki Kondo, Mariko Suzuki, Izumu Saito, Yumi Kanegae
    • 学会等名
      International meeting on the molecular biology of Hepatitis B viruses
    • 発表場所
      Dolce Bad Nauheim (Germany)
    • 年月日
      2015-10-04
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 国際学会

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公開日: 2015-04-16   更新日: 2018-01-16  

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