新規血小板活性化受容体CLEC-2を標的とした分子標的治療薬の開発

• 研究課題/領域番号: 15K19549
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 佐々木 知幸 山梨大学, 総合研究部, 助教 (40739124)
• 研究協力者: 白井 俊光 ; 築地 長治 ; 新森 英之 ; 井上 克枝 ; 尾崎 由基男
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2015年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 血小板 / CLEC-2 / ロドサイチン

研究成果の概要

血小板活性化受容体CLEC-2は，ある種の癌細胞表面に発現するポドプラニンと結合することで，癌の転移を促進する．それゆえに，抗CLEC-2薬は，抗血小板および抗転移効果が期待される．その創薬ソースとして蛇毒ロドサイチンに注目した．ロドサイチンのCLEC-2との結合部位および複合体の形成メカニズムを検証するために，哺乳類細胞株を用いて遺伝子組換え野生型および変異型ロドサイチンを作製した．その結果，抗CLEC-2効果のある変異型ロドサイチンを見出した．マウスモデルにおいて，この変異型ロドサイチンは，血小板凝集を惹起することなく，ポドプラニン依存性の癌転移を強く抑制した．

研究成果

• [雑誌論文] CLEC-2 promotes hematogenous tumor metastasis and prothrombotic state in tumor-bearing mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shirai, Toshiaki Inoue, Osamu Tamura, Shogo Tsukiji, Nagaharu Sasaki, Tomoyuki Endo, Hiroshi Satoh, Kaneo Osada, Makoto Sato-Uchida, Hitomi Fujii, Hideki Ozaki, Yukio Suzuki-Inoue, Katsue
  • 雑誌名: Journal of thrombosis and haemostasis 巻: 38 号: 3 ページ: 42-49
  • DOI: 10.1111/jth.13604
  • 査読あり
• [雑誌論文] Podoplanin-positive periarteriolar stromal cells promote megakaryocyte growth and proplatelet formation in mice by CLEC-2 (2016)
  • 著者名/発表者名: TAMURA Shogo, SUZUKI-INOUE Katsue, TSUKIJI Nagaharu, SHIRAI Toshiaki, SASAKI Tomoyuki, OSADA Makoto, SATOH Kaneo, OZAKI Yukio
  • 雑誌名: Blood 巻: 127 号: 13 ページ: 1701-1710
  • DOI: 10.1182/blood-2015-08-663708
  • NAID: 130007432250
  • 査読あり
• [学会発表] 変異型ロドサイチンによるポドプラニン依存性の癌細胞血行性転移の抑制 (2016)
  • 著者名/発表者名: 佐々木知幸, 白井俊光, 築地長治, 田村彰吾, 長田誠, 佐藤金夫, 尾崎由基男, 井上克枝
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城・仙台）
  • 年月日: 2016-09-25
• [学会発表] 遺伝子組換えロドサイチンを用いたCLEC-2依存性血小板凝集の制御解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 佐々木知幸，白井俊光，築地長治，田村彰吾，長田誠，佐藤金夫，尾崎由基男，井上克枝
  • 学会等名: 第38回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 奈良春日野国際フォーラム（奈良・奈良）
  • 年月日: 2016-06-16
• [学会発表] ポドプラニン結合阻害能を持つCLEC-2結合低分子化合物リガンド (2016)
  • 著者名/発表者名: 井上克枝，新森英之，長田誠，白井俊光，望月ちひろ，小嶋聡一，斎藤臣雄，佐々木知幸，井上修，尾崎由基男
  • 学会等名: 第38回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 奈良春日野国際フォーラム（奈良・奈良）
  • 年月日: 2016-06-16
• [学会発表] 血小板CLEC-2は肺中皮細胞分化を介して呼吸機能獲得に寄与する (2016)
  • 著者名/発表者名: 築地長治，井上修，田村彰吾，白井俊光，佐々木知幸，佐藤金夫，尾崎由基男，井上克枝
  • 学会等名: 第38回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 奈良春日野国際フォーラム（奈良・奈良）
  • 年月日: 2016-06-16
• [学会発表] CLEC-2依存性血小板凝集を惹起する蛇毒ロドサイチンの遺伝子組換え体の作製と機能解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 佐々木 知幸, 田村 彰吾, 白井 俊光, 築地 長治, 佐藤 金夫, 井上 克枝, 尾崎 由基男
  • 学会等名: BMB2015(第38回日本分子生物学会年会／第88回日本生化学会大会 合同大会)
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（兵庫・神戸）
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] Construction of expression system for biologically functional recombinant rhodocytin. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tomoyuki Sasaki, Shogo Tamura, Toshiaki Shirai, Nagaharu Tsukiji, Kaneo Satoh, Katsue Suzuki-Inoue, Yukio Ozaki
  • 学会等名: ISTH 2015 第25回国際血栓止血学会議
  • 発表場所: トロント（カナダ）
  • 年月日: 2015-06-20
  • 国際学会
• [学会発表] Unexpected role of platelets in lung development depending on a platelet activation receptor, CLEC-2. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nagaharu Tsukiji, Osamu Inoue, Shogo Tamura, Toshiaki Shirai, Tomoyuki Sasaki, Kaneo Satoh, Katsue Suzuki-Inoue, Yukio Ozaki
  • 学会等名: ISTH 2015 第25回国際血栓止血学会議
  • 発表場所: トロント（カナダ）
  • 年月日: 2015-06-20
  • 国際学会
• [学会発表] A novel function of CLEC-2 in megakaryopoiesis: CLEC-2/PDPN microenvironment facilitates expansion and maturation of magakaryocytes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shogo Tamura, Katsue Suzuki-Inoue, Nagaharu Tsukiji, Toshiaki Shirai, Tomoyuki Sasaki, Makoto Osada, Kaneo Satoh, Yukio Ozaki
  • 学会等名: ISTH 2015 第25回国際血栓止血学会議
  • 発表場所: トロント（カナダ）
  • 年月日: 2015-06-20
  • 国際学会
• [学会発表] 血小板活性化受容体CLEC-2結合蛇毒ロドサイチンの機能を保持したリコンビナント体発現系の構築 (2015)
  • 著者名/発表者名: 佐々木知幸，田村 彰吾，白井 俊光，築地 長治，佐藤 金夫，井上 克枝，尾崎由基男
  • 学会等名: 第37回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 甲府市総合市民会館（山梨・甲府）
  • 年月日: 2015-05-21
• [学会発表] CLEC-2/PDPN axisによる骨髄内微小環境の可能性：CLEC-2は巨核球造血を促進させる (2015)
  • 著者名/発表者名: 田村 彰吾，井上 克枝，白井 俊光，築地 長治，佐々木知幸，佐藤 金夫，尾崎由基男
  • 学会等名: 第37回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 甲府市総合市民会館（山梨・甲府）
  • 年月日: 2015-05-21
• [学会発表] 血小板は肺発生に必須である：血小板CLEC-2の機能解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 築地 長治，井上 修，田村 彰吾，白井 俊光，佐々木知幸，佐藤 金夫，井上 克枝，尾崎
  • 学会等名: 第37回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 甲府市総合市民会館（山梨・甲府）
  • 年月日: 2015-05-21
• [備考] 山梨大学医学部臨床検査医学講座
  • URL: http://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical/clin0lab/
• [産業財産権] CLEC-2拮抗剤，血小板凝集抑制剤，抗血栓薬，及び抗転移薬，並びにポルフィリン骨格を有する化合物，及びその製造方法 (2017)
  • 発明者名: 井上克枝，佐々木知幸，白井俊光，長田誠，新森英之
  • 権利者名: 国立大学法人山梨大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2017-01-04
  • 外国
• [産業財産権] CLEC-2拮抗剤，血小板凝集抑制剤，抗血栓薬，及び抗転移薬，並びにポルフィリン骨格を有する化合物，及びその製造方法 (2016)
  • 発明者名: 井上克枝，佐々木知幸，白井俊光，長田誠，新森英之
  • 権利者名: 国立大学法人山梨大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2016-000267
  • 出願年月日: 2016-01-04
• [産業財産権] 機能抑制型の遺伝子組換えロドサイチン変異体 (2016)
  • 発明者名: 佐々木知幸，白井俊光，井上克枝
  • 権利者名: 国立大学法人山梨大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2016-094203
  • 出願年月日: 2016-05-09