| 研究課題/領域番号 |
15K20332
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 研究分野 |
救急医学
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| 研究機関 | 秋田大学 |
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研究代表者 |
佐久間 稔惠 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10732620)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| 研究課題ステータス |
中途終了 (2016年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
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| キーワード | インフルエンザウイルス / ヒストン修飾 / 感染 / ChIP-seq / ChIP-seq解析 |
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| 研究実績の概要 |
ヒストンのN末端のアミノ残基は、さまざまな修飾を受け遺伝子発現の制御を行う。ヒストンの修飾変化をかいした遺伝子発現の制御は、さまざまな疾患の発症に関与しているが、インフルエンザウイルス感染とエピジェネティクス制御の関与は、ほとんど明らかにされていない。本研究では、ヒストンメチル化を介したエピジェネティクス制御に着目し、インフルエンザウイルス感染によって生じるヒストンメチル化修飾の変化を解析し、ヒストンメチル化により制御されている遺伝子の同定、さらに修飾に関わる酵素や関連分子の機能を解析することにより、インフルエンザの病態におけるヒストン修飾制御昨日の役割を明らかにすることを研究目的とした。
1. ヒストンメチル化修飾の標的となる遺伝子をメチル化ヒストン抗体を用いたクロマチン免疫沈降ー高速大量シークエンス法（ChIP-Seq）により同定した。
2. メチル化酵素が核内のどの様な宿主あるいはウイルスタンパク質と結合しているかを解明するため、FLAGタグ付きメチル化酵素発現させた細胞を作成し免疫沈降法、銀染色、質量分析を行い結合タンパクの同定を行った。さらにGSTのタグを付けたタンパクを作成しウエスタンブロット法により結合タンパクの同定をおこなった。
3. メチル化酵素欠損マウスを用いてインフルエンザウイルス感染後の病態変化を解析した。マウスにインフルエンザウイルスを感染させ、体重の変化、生存率、ウイルスの増殖能、肺における病理所見を野生型とメチル化酵素欠損マウスにおいて比較し、解析を行った。
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