Toll様受容体を介したプライミング効果による脂質メディエーター産生増強機構

• 研究課題/領域番号: 16017225
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 石井 聡 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (10300815)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 6,000千円 (直接経費: 6,000千円); 2005年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 2004年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
• キーワード: 血小板活性化因子 / PAF / アセチルCoA:リゾPAFアセチル転移酵素 / プライミング / TLR4 / MyD88 / TRIF

研究概要

リゾPAF-AT活性が高い腹腔マクロファージを野生型マウス及びTLR4、MyD88、TRIFノックアウトマウスから調製した。LPSで細胞を刺激するとTLR4依存的な酵素活性の二相性の上昇が、刺激後30分にピークに達するものと8時間以降に徐々に上昇するものとして観察された。興味深いことに前期相の活性上昇はMyD88依存的なのに対し、後期相はMyD88及びTRIFに非依存的であった。さらに、リゾPAF-AT活性はLPSばかりでなく生成物のPAFで細胞を刺激することによっても1分以内にピークに達する上昇を示した。そこでLPSで予め刺激したマクロファージに対してPAFを作用させたところ、LPSとの相乗的な酵素活性の上昇が後期相にのみ認められた。しかもこのLPSのプライミング効果もまたTLR4依存的かつMyD88及びTRIF非依存的であった。このリゾPAF-ATの同定(cDNAクローニング)を目的として、ブタ脾臓から酵素活性が高いタンパク質分画を各種カラムクロマトグラフィーで精製し質量分析計によって中に含まれる分子を同定したが、現在までにリゾPAF-ATの候補と思われるタンパク質は見つかっていない。この実験と平行して、アセチル転移酵素をはじめ各種転位酵素と相同性のある機能未知のタンパク質を遺伝子データベースから検索し、そのうちの有力候補分子を動物培養細胞に発現させてリゾPAF-ATの活性を指標にスクリーニングする実験も行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Involvement of the platelet activating factor receptor in host defense against Streptococcus pneumoniae during postinfluenza pneumonia. (2006)
  • 著者名/発表者名: van der Sluijs, K.F., van Elden, L.J.R., Nijhuis, M., Schuurman, R., Florquin, S., Shimizu, T., Ishii, S., Jansen, H.M., Lutter, R., van der Poll, T.
  • 雑誌名: Am.J.Physiol. 290
• [雑誌論文] Attenuation of folic acid-induced renal inflammatory injury in platelet-activating factor receptor-deficient mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Doi, K., Okamoto, K., Negishi, K., Suzuki, Y., Nakao, A., Fujita, T., Toda, A., Yokomizo, T., Kita, Y., Kihara, Y., Ishii, S., Shimizu, T., Noiri, E.
  • 雑誌名: Am.J.Pathol. (印刷中)
• [雑誌論文] Priming effect of lipopolysaccharide on acetyl-CoA:lyso-PAF acetyltransferase is MyD88 and TRIF-independent. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shindou, H., Ishii, S., Yamamoto, M., Takeda, K., Akira, S., Shimizu, T.
  • 雑誌名: J.Immunol. 175 ページ: 1177-1183
• [雑誌論文] Staphylococcal lipoteichoic acid inhibits delayed-type hypersensitivity reactions via the platelet-activating factor receptor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Zhang, Q., Mousdicas, N., Yi, Q., Al-Hassani, M., Billings, S.D., Perkins, S.M., Howard, K.M., Ishii, S., Shimizu, T., Travers, J.B.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest. 115 ページ: 2855-2861
• [雑誌論文] Dual phase regulation of experimental allergic encephalomyelitis by platelet-activating factor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kihara, Y., Ishii, S., Kita, Y., Toda, A., Shimada, A., Shimizu, T.
  • 雑誌名: J.Exp.Med. 202 ページ: 853-863
• [雑誌論文] Recruitment of katanin p60 by phosphorylated NDEL1, a LIS1 interacting protein, is essential for mitotic cell division and neuronal migration. (2005)
  • 著者名/発表者名: Toyo-oka, K., Sasaki, S., Yano, Y., Mori, D., Kobayashi, T., Toyoshima, Y.Y., Tokuoka, S.M., Ishii, S., Shimizu, T., Muramatsu, M., Hiraiwa, N., Yoshiki, A., Wynshaw-Boris, A., Hirotsune, S.
  • 雑誌名: Hum.Mol.Genet. 14 ページ: 3113-3128
• [雑誌論文] Identification of T cell death-associated gene 8 (TDAG8) as a novel acid sensing G-protein-coupled receptor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ishii, S., Kihara, Y., Shimizu, T.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 280 ページ: 9083-9087
• [雑誌論文] Stimulation of erythrocyte ceramide formation by platelet activating factor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Lang, P.A., Kempe, D.S., Tanneur, V., Eisele, K., Klarl, B.A., Myssina, S., Jendrossek, V., Ishii, S., Shimizu, T., Waidmann, M., Hessler, G., Huber, S.M., Lang, F., Wieder, T.
  • 雑誌名: J.Cell Sci. 118 ページ: 1233-1243
• [雑誌論文] Platelet activating factor receptor deficient mice have an improved host defense against pneumococcal pneumonia. (2004)
  • 著者名/発表者名: Rijneveld, A.W., Weijer, S., Florquin, S., Speelman, P., Shimizu, T., Ishii, S., van der Poll, T.
  • 雑誌名: J.Infect.Dis. 189 ページ: 711-716
• [雑誌論文] Trophic signals acting via phosphatidylinositol-3 kinase are required for normal pre-implantation mouse embryo development. (2004)
  • 著者名/発表者名: Lu, P., Chandrakanthan, V., Cahana, A., Ishii, S., O'Neill, C.
  • 雑誌名: J.Cell Sci. 117 ページ: 1567-1576
• [雑誌論文] Platelet-activating factor receptor develops airway hyperresponsiveness independently of airway inflammation in a murine asthma model. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ishii, S., Nagase, T., Shindou, H., Takizawa, H., Ouchi, Y., Shimizu, T.
  • 雑誌名: J.Immunol. 172 ページ: 7095-7102
• [雑誌論文] Absence of platelet-activating factor receptor protects mice from osteoporosis following ovariectomy. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hikiji, H., Ishii, S., Shindou, H., Takato, T., Shimizu, T.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest. 114 ページ: 85-93
• [雑誌論文] Dyslipidemia associated with atherosclerotic disease systemically alters dendritic cell mobilization. (2004)
  • 著者名/発表者名: Angeli, V, Llodra, J., Rong, J.X., Satoh, K, Ishii, S., Shimizu, T., Fisher, E.A., Randolph, G.J.
  • 雑誌名: Immunity 21 ページ: 561-574
• [雑誌論文] Platelet-activating factor receptor deficient mice show an unaltered clearance of Haemophilus influenzae from their respiratory tract. (2004)
  • 著者名/発表者名: Branger, J., Wieland, C.W., Florquin, S., Maris, N.A., Pater, J.M., Speelman, P., Shimizu, T., Ishii, S., van der Poll, T.
  • 雑誌名: Shock 22 ページ: 543-547