| 研究課題/領域番号 |
16022201
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| 研究種目 |
特定領域研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
清水 宏 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00146672)
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| 研究分担者 |
秋山 真志 北海道大学, 病院・講師 (60222551)
芝木 晃彦 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40291231)
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| 研究期間 (年度) |
2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,900千円)
2004年度: 3,900千円 (直接経費: 3,900千円)
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| キーワード | 遺伝子 / 癌 / 細胞・組織 / マイクロアレイ / 臨床 |
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| 研究概要 |
本研究では,若年期から転移、浸潤能の高い皮膚癌を発症しやすい表皮水疱症(EB)患者から得られたヒトの組織、細胞を用いることで、表皮皮膚接着分子の変異、欠損がヒト癌細胞の浸潤、転移においてどのように働いているかを直接的に検証した。
方法と結果:
1.EB患者由来表皮角化細胞培養シート移植時のin vivoにおける浸潤性、走化性の解析
SV40にてトランスフォームしたEB患者由来角化細胞から培養表皮シートを作成、ヌードラットに移植し、局所浸潤、転移の動態について検討した。その結果患者由来の皮膚シートでは,表皮細胞の配列に乱れがみられたが、真皮内への明らかな浸潤を示す像は認められなかった。
2.リコンビナントヒトVII型コラーゲンによる基底膜再構成
SV40にてトランスフォームしたEB患者由来角化細胞から培養表皮シートを作成、ヌードラットに移植した後に、同部にリコンビナントヒトVII型コラーゲンタンパクを皮下注射し、ヒトVII型コラーゲンの動態について免疫組織学的に検討した。結果、ヒトVII型コラーゲンタンパクは皮下注射ご表皮、真皮の接合部、基底膜部に局在していることが確認された。
考案:
VII型コラーゲンタンパクを遺伝的に欠損するEB患者由来の変異ケラチノサイトを用いて浸潤、転移能について検討したが、VII型コラーゲンタンパクの欠損と変異ケラチノサイトの浸潤、転移能の間に有意な相関は認められなかった。今後は、TPAを用いた化学発ガンモデルにて、癌化を誘発した際の浸潤、転移の動態について検討する。また、免疫不全ラットに合成VII型コラーゲンタンパクを皮下注射することによって、VII型コラーゲンタンパクが機能的なタンパクとして働くことが示唆された。この結果に基づき、リコンビナントタンパク皮下注射によるVII型コラーゲン導入を行った場合との差異について検討を行う予定である。
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