| 研究課題/領域番号 |
16370098
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
発生生物学
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| 研究機関 | 独立行政法人理化学研究所 |
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研究代表者 |
西脇 清二 独立行政法人理化学研究所, 細胞移動研究チーム, チームリーダー (30342827)
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| 研究分担者 |
久保田 幸彦 独立行政法人理化学研究所, 細胞移動研究チーム, 研究員 (70333325)
伊原 伸治 独立行政法人理化学研究所, 細胞移動研究チーム, 基礎科学特別研究員 (70373272)
大蔵 清貴 独立行政法人理化学研究所, 細胞移動研究チーム, 研究員
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
15,600千円 (直接経費: 15,600千円)
2005年度: 7,500千円 (直接経費: 7,500千円)
2004年度: 8,100千円 (直接経費: 8,100千円)
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| キーワード | 細胞移動 / MIG-17 / ADAM family / fibulin / 抑圧変異体 / C.elegans / 変異体 |
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| 研究概要 |
1.fbl-1遺伝子の解析
線虫C.elegansの分泌型ADAMプロテアーゼMIG-17は生殖巣の前後両端のDistal Tip cells(DTCs)に生殖巣の外部から働きかけ、その移動をコントロールすることにより、生殖巣の形態形成を促進する。我々はカルシウム結合細胞外基質分子fibulin-1(FBL-1)の優性変異が、MIG-17欠損によるDTCsの移動異常を抑圧できることを発見した。哺乳類ではfibulin-1はカルシウムに依存して基底膜分子nidogenに強く結合することがin vitroの実験から分かっている。そこでfbl-1変異によるmig-17変異体のDTC移動異常の抑圧にnidogenが関与するかどうかを解析した。C.elegansのnidogen欠損変異体nid-1はDTC移動異常を示さなかった。そこでmig-17;fbl-1二重変異体にさらにnid-1変異を導入したところ、fbl-1によるmig-17のDTC移動異常の抑圧は完全にキャンセルされ、mig-17単独と同様の表現型を示した。この結果から変異型FBL-1はNID-1/nidogenに依存してMIG-17の欠損を抑圧することが分かった。
2.let-2異遺伝子の解析
2つ目の抑圧変異遺伝子であるlet-2遺伝子はIV型コラーゲンα2鎖をコードすることが分かった。我々が分離した2株の抑圧変異体でのLET-2蛋白質の分布を抗体染色により解析した結果、変異型LET-2が正常に分泌され、生殖巣基底膜に取り込まれていることが分かった。変異型LET-2蛋白質は基底膜の構造あるいは機能に何らかの変化をもたらし、MIG-17の欠損をバイパスできると考えられる。
3.新規抑圧変異体の分離
本研究ではmig-17変異体のEMSで処理により、さらに21株の抑圧変異体を分離した。これらは少なくとも6個の遺伝子座に分類された。
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