研究課題/領域番号 |
16380071
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研究種目 |
基盤研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
応用生物化学
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研究機関 | 神戸大学 |
研究代表者 |
山形 裕士 神戸大学, 農学部, 教授 (00159203)
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研究分担者 |
金丸 研吾 神戸大学, 農学部, 助教授 (90260025)
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研究期間 (年度) |
2004 – 2006
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研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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配分額 *注記 |
15,700千円 (直接経費: 15,700千円)
2006年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2005年度: 4,800千円 (直接経費: 4,800千円)
2004年度: 8,900千円 (直接経費: 8,900千円)
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キーワード | 光シグナル伝達機構 / cGMP / ヘテロ三量体Gタンパク質 / ELIP / 紫外光応答性遺伝子 / 遺伝子発現調節 / グアニル酸シクラーゼ / NO / 光シグナル伝達 / フィトクローム / ヘテロ三量体タンパク質 |
研究概要 |
植物の光シグナル伝達因子の同定とシグナル伝達ネットワークの解析を行い新たな知見を得た。 1.フィトクロームシグナル伝達の特定経路変異株の単離と解析 Phy Aシグナル伝達特異的な変異株を単離し、戻し交配を進行中である。 2.シロイヌナズナのグアニル酸シクラーゼ(AtGC1)欠損変異株の解析 AtGC1欠損変異株の表現型と組織中のcGMP含量を野生株と比較したが差は認められなかった。 3.シロイヌナズナ三量体Gタンパク質αサブユニット(GPA1)と相互作用するタンパク質の解析 GPA1のエフェクター候補として単離した完全長のGIP1(GPA1 interacting proteinl)とGPA1を大腸菌中で可溶性タンパク質として発現・精製し、GPA1とGIP1の相互作用を検討し、GIP1の酵素活性が活性型GPA1により強く阻害されることを明らかにした。 4.cGMPによって発現が調節されるダイズフラボノイド合成系酵素遺伝子の解析 ダイズSB-P細胞を用いるノーザン解析の結果、多くのフラボノイド合成系酵素遺伝子の発現がcGMP,NO,および細胞の光照射で誘導された。また、NOによる誘導はLY83583によって阻害されたことからGCの関与が推察された。 5.ダイズELIP遺伝子の紫外光応答性発現機構の解析 ELIP遺伝子のプロモーター中のBoxII様配列とG-boxの組み合わせが青色光/UV-A応答に必要かつ十分であることを明らかにした。また、これらのシス配列に結合するダイズGT1遺伝子(GmGT1)をクローニングし、大腸菌で発現・精製し、GmGT1のELIPプロモーターへの結合を詳細に解析した。
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