チロシンキナーゼSykの新規な機能の解明

• 研究課題/領域番号: 16390095
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態医化学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 山村 博平 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90030882)
• 研究分担者: 通山 由美 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70362770) ; 定 清直 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (10273765)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 15,000千円 (直接経費: 15,000千円); 2005年度: 6,500千円 (直接経費: 6,500千円); 2004年度: 8,500千円 (直接経費: 8,500千円)
• キーワード: がん / 感染症 / シグナル伝達 / 生体分子 / Syk / チロシンキナーゼ / ファゴサイトーシス / 補体 / 発がん / 白血病 / 細胞骨格 / 発がん抑制 / CXCR4 / 食作用

研究概要

チロシンキナーゼSykの未知の機能として、1)白血病の発症制御機構、および2)初期感染の防御機能の解明に取り組んた。
1)白血病を正常造血の破綻としてとらえ、Sykが正常造血にどのように関わるのか、マウスプロB細胞株BAF3および骨髄性細胞株32Dを用い、細胞外マトリックス(BAF3;フィブロネクチン、32D;ヒアルロン酸)を塗布したプレート上で、ケモカインCXCL12で刺激し、細胞接着、運動性および細胞形態を解析した。両細胞株は、速やかに細胞極性を伴う細胞移動を開始した。そこで両細胞株にdominant negative(DN)-Sykを導入した。BAF3では細胞極性とuropod(細胞後方の収縮構造)が消失、細胞接着も減少し、かつCXCL12依存性のRhoA活性化が抑制された。この結果はSykがRhoA上流で、CXCL12刺激による細胞接着と極性化に必須の役割を果たしている事を示している。さらに32Dを用いて解析した。CXCL12刺激依存性に細胞骨格系アダプタータンパク質、モエシン、エズリンのチロシンリン酸化が上昇し、DN-Sykの発現によりそのリン酸化が抑制された。Sykがヒアルロン酸受容体であるCD44下流においても細胞接着に重要である事を示した。これらの結果よりSykは正常造血に必須の細胞接着や極性化を介して白血病の発症を阻止している事が示唆された。
2)自然免疫に重要な補体依存性の食作用に着目して分子機構の解明に取り組んできた。食細胞としてマクロファージ様に分化したヒト白血病細胞株HL60、感染微生物モデルとしてZymosanを血清中で処理して補体活性化成分C3biと結合させて用いた。その結果、補体依存性のファゴサイトーシスにおいてチロシンキナーゼSykが補体受容体CR3を介した食胞の形成と輸送に必須の役割を果たし、その下流でRhoAが活性化する事を明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk is required for pathogen engulfment in complement-mediated phagocytosis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shi, Y.
  • 雑誌名: Blood (未定)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk is required for pathogen engulfment in complement-mediated phagocytosis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shi, Y., Tohyama, Y., Kadono, T., He, J., Miah, S.M.S., Hazama, R., Tanaka, C., Tohyama, K., Yamamura, H.
  • 雑誌名: Blood (in Press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk is required for pathogen engulfment in complement-mediated phagocytosis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yuhong Shi
  • 雑誌名: Blood 未定
• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk, is required for CXCLl2-induced polarization of B cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka, S.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 328・4 ページ: 1163-1169
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Lysosome is a primary organelle in B cell receptor-mediated apoptosis : an indispensable role of Syk in lysosomal function. (2005)
  • 著者名/発表者名: He, J.
  • 雑誌名: Genes to Cells 10・1 ページ: 23-35
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk, is required for CXCL12-induced polarization of B cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka, S., Tohyama, Y., He, J., Shi, Y., Hazama, R., Kadono, T., Kurihara, R., Tohyama, K., Yamamura, H.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 328 ページ: 1163-1169
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Lysosome is a primary organelle in B cell receptor-mediated apoptosis : an indispensable role of Syk in lysosomal function. (2005)
  • 著者名/発表者名: He, J., Tohyama, Y., Yamamoto, K., Kobayashi, M., Shi, Y., Takano, T., Noda, C., Tohyama, K., Yamamura, H.
  • 雑誌名: Genes Cells. 10 ページ: 23-35
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk, is required for CXCL12-induced polarization of B cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka, S.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 328・4 ページ: 1163-1169
• [雑誌論文] Lysosome is a primary organelle in B cell receptor-mediated apoptosis : an indispensable role of Syk in lysosomal function. (2005)
  • 著者名/発表者名: He, J.
  • 雑誌名: Genes to Cells 10,1 ページ: 23-35
• [雑誌論文] Critical role of CRMP-associated molecule CRAM for filopodia and growth cone development in neurons. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hotta, A.
  • 雑誌名: Mol.Biol.Cell 16,1 ページ: 32-39
• [雑誌論文] Protein-tyrosine kinase, Syk, is required for CXCL12-induced polarization of B cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka, S.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 328,4 ページ: 1163-1169
• [雑誌論文] Tyrosine phosphorylation of adaptor protein 3BP2 induces T cell receptor-mediated activation of transcription factor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Qu, X.
  • 雑誌名: Biochemistry 44,10 ページ: 3891-3898
• [雑誌論文] Phosphorylation and recruitment of syk by immunoreceptor tyrosine-based activation motif-based phosphorylation of tamalin (2004)
  • 著者名/発表者名: Hirose, M.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 279 ページ: 32308-32315
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] B cell responses to oxidative stress (2004)
  • 著者名/発表者名: Tohyama, Y.
  • 雑誌名: Curr. Pharm. Des. 10 ページ: 835-839
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Activation of Syk protein tyrosine kinase in response to osmotic stress requires interaction with p21-activated protein kinase Pak2/γ-PAK. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miah, S.M.S.
  • 雑誌名: Mol. Cell. Biol. 24 ページ: 71-83
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Phosphorylation and recruitment of syk by immunoreceptor tyrosine-based activation motif-based phosphorylation of tamalin. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hirose, M., Kitano, J., Nakajima, Y.Moriyoshi, K., Yanagi, S., Yamamura, H., Muto, T., Jingami, H., Nakanishi, S.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 279 ページ: 32308-32315
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] B cell responses to oxidative stress. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tohyama, Y., Takano, T., Yamamura, H.
  • 雑誌名: Curr.Pharm.Des. 10 ページ: 835-839
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Activation of Syk protein tyrosine kinase in response to osmotic stress requires interaction with p21-activated protein kinase Pak2γ-PAK. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miah, S.M.S., Sada, K., Tuazon, P.T., Ling, J., Maeno, K., Kyo, S., Qu, X., Tohyama, Y., Traugh, J.A., Yamamura, H.
  • 雑誌名: Mol.Cell.Biol. 24 ページ: 71-83
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Point Mutations of 3BP2 Identified in Human Inherited Disease Cherubism Results in the loss of Function. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miah, S.M.
  • 雑誌名: Genes to Cells 9,11 ページ: 993-1004