結核菌由来ヒトT細胞エピトープの同定とマルチエピトープDNAワクチンの開発

• 研究課題/領域番号: 16390130
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 細菌学(含真菌学)
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 永田 年 浜松医科大学, 医学部, 教授 (90275024)
• 研究分担者: 小出 幸夫 浜松医科大学, 医学部, 教授 (30126809) ; 内嶋 雅人 浜松医科大学, 医学部, 助手 (20252174) ; 青枝 大貴 浜松医科大学, 医学部, 助手 (10324344)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 14,000千円 (直接経費: 14,000千円); 2006年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 2005年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 2004年度: 8,000千円 (直接経費: 8,000千円)
• キーワード: DNAワクチン / 結核 / MPT51 / CTLエピトープ / HLAトランスジェニックマウス / Thエピトープ / HLA-Aトランスジェニックマウス

研究概要

1)H2クラスIKO/HLA-A^*2402トランスジェニックマウスの作製 日本人に多いHLA-A^*2402を発現するH2クラスI KO/HLA-A^*2402トランスジェニックマウスを作製中である。HLA-A^*2402発現プラスミドをβ2-ミクログロブリンKOマウス胚に導入し、PCR法によりHLA-A^*2402トランスジェニックマウスのスクリーニングをし、遺伝子の導入を確認した1系統を維持している。そのマウスに現在MPT51遺伝子を免疫している。
2)MPT51 CTLエピトープの検索 MPT51については、HLA-A^*0201トランスジェニックマウスへのMPT51 DNAワクチン投与により、MPT51 p51-60ペプチド特異的IFN-γ産生を認め、このペプチドがHLA-A^*0201拘束性CTLエピトープである可能性を示した。このことは、この実験系がCTLエピトープの同定に有効であることを示すものである。
3)HLA-A^*0201陽性の健常者末梢血中のMPT51 p51-60ペプチド特異的T細胞の検出 そこで、BCG接種履歴のあるHLA-A^*0201陽性の健常者末梢血中のMPT51 p51-60ペプチド特異的メモリーT細胞の検出を試みた。その結果、2人のHLA-A^*0201陽性健常者末梢血を1週間このペプチドで刺激した後、MPT51 p51-60ペプチド/HLA-A^*0201テトラマー陽性CD8^+T細胞の増殖を認めた。また、1人のHLA-A^*0201陽性健常者末梢血をこのペプチドで刺激したところ、高いIFN-γの産生を認めた。これらのことは、このペプチドがHLA-A^*0201拘束性CD8^+T細胞エピトープであることを示している。

研究成果

• [雑誌論文] Immunization with dendritic cells retrovirally transduced with mycobacterial antigen 85A gene elicits the specific cellular immunity including cytotoxic T-lymphocyte activity specific to a dominant epitope on antigen 85A. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakano, H., Nagata, T., Suda, T., Tanaka, T., Aoshi, T., Uchijima, M., Chida, K., Nakamura, H., Okada, M., Koide, Y.
  • 雑誌名: Vaccine 24 ページ: 2110-2119
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Immunization with gene encoding granulocyte-macrophage colony-stimulating factor inserted with a single helper T-cell epitope of an intracellular bacterium induces a specific T-cell subset and protective immunity. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagata, T., Uchijima, M., Uchiyama, H., Yamada, T., Aoshi, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Vaccine 24 ページ: 4538-4553
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Curcumin maintenance therapy for ulcerative colitis : Randomized multicenter double blind placebo-controlled clinical trial. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hanai, H., Iida, T., Takeuchi, K., Watanabe, F., Maruyama, Y., Andoh, A., Tsujikawa, T., Fujiyama, Y., Mitsuyama, K., Sata, M., Yamada, M., Iwaoka, Y., Kanke, K., Hiraishi, H., Hirayama, K., Arai, H., Yoshii, S., Uchijima, M., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Clin. Gastroenterol. Hepatol. 4 ページ: 1502-1506
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Immunization with dendritic cells pulsesd with α-galactocylceramide and a dominant CTL epitope elicits effective protective immunity against intracellular bacteria infection. (2006)
  • 著者名/発表者名: Enomoto, N., Nagata, T., Suda, T., Uchijima, M., Chida, K., Nakamura, H., Koide, Y.
  • 雑誌名: Int. J. Infect. Dis. 10
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Intratracheal administration of third-generation lentivirus vector encoding Mpt51 from M. tuberculosis induces lung-homing specific T cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Koide, Y., Hashimoto, D., Uchijima, M., Suda, T., Chida, K., Nagata, T.
  • 雑誌名: Int. J. Infect. Dis. 10
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Curcumin maintenance therapy for ulcerative colitis : Randomized multicenter double blind placebo-controlled clinical trial. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hanai, H., Iida, T., Takeuchi, K., Watanabe, F., Maruyama, Y., Andoh, A., Tsujikawa, T., Fujiyama, Y., Mitsuyama, K., Sata, M., Yamada, M., Iwaoka, Y., Kanke, K., Hiraishi, H., Hirayama, K., Arai, H., Yoshii, S., Uchijima, M., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Clinical Gastroenterol. Hepatol. 4 ページ: 1502-1506
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Immunization with dendritic cells pulsesd with a-galactocylceramide and a dominant CTL epitope elicits effective protective immunity against intracellular bacteria infection. (2006)
  • 著者名/発表者名: Enomoto, N., Nagata, T., Suda, T., Uchijima, M., Chida, K., Nakamura, H., Koide, Y.
  • 雑誌名: Int. J. Infect. Dis. 10
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Intratracheal administration of third-generation lentivirus vector encoding Mpt51 from M tuberculosis induces lung-homing specific T cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Koide, Y., Hashimoto, D., Uchijima, M., Suda, T., Chida, K., Nagata, T.
  • 雑誌名: Int. J. Infect. Dis. 10
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Immunization with gene encoding granulocyte-macrophage colony-stimulating factor inserted with a single helper T-cell epitope of an intracellular bacterium induces a specific T-cell subset and protective immunity. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagata T., Uchijima, M., Uchiyama, H., Yamada, T., Aoshi, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Vaccine 24 ページ: 4538-4553
• [雑誌論文] Curcumin Maintenance Therapy for Ulcerative Colitis : Randomized Multicenter Double Blind Placebo-Controlled Clinical Trial. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hanai, H., Iida, T., Takeuchi, K., Watanabe, F., Maruyama, Y., Andoh, A., Tsujikawa, T., Fujiyama, Y., Mitsuyama, K., Sata, M., Yamada, M., Iwaoka, Y., Kanke, K., Hiraishi, H., Hirayama, K., Arai, H., Yoshii, S., Uchijima, M., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Clinical Gastroenterology and Hepatology 4・12 ページ: 1502-1506
• [雑誌論文] Immunization with gene encoding granulocyte-macrophage colony-stimulating factor inserted with a single helper T-cell epitope of an intracellular bacterium induces a specific T-cell subset and protective immunity. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagata, T., Uchijima, M., Uchiyama, H., Yamada, T., Aoshi, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Vaccine (in press)
• [雑誌論文] Interferon-γ overcomes low responsiveness of myeloid dendritic cells to CpG-DNA. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uchijima, M., Nagata, T., Aoshi, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Immunol. Cell Biol. 83 ページ: 92-95
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Expression mapping by retroviral vector for CD8+ T cell epitopes : definition of a Mycobacterium tuberculosis peptide presented by H2-D^d. (2005)
  • 著者名/発表者名: Aoshi, T., Suzuki, M., Uchijima, M., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: J. Immunol. Methods 298 ページ: 21-34
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Effects of oxygen radicals in low-pressure surface-wave plasma on sterilization. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nagatsu, M., Terashita, F., Nonaka, H., Xu, L., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Appl. Phys. Letters 86
  • NAID: 120000796467
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Interferon-y overcomes low responsiveness of myeloid dendritic cells to CpG-DNA. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uchijima, M., Nagata, T., Aoshi, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Immunol. Cell Biol. 83 ページ: 92-95
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Expression mapping by retroviral vector for CD8+ T cell epitopes : definition of a Mycobacterium tuberculosis peptide presented by H2-Dd. (2005)
  • 著者名/発表者名: Aoshi, T., Suzuki, M., Uchijima, M., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: J. Immunol. Methods. 298 ページ: 21-34
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Effects of oxygen radicals in low-pressure surface-wave plasma on sterilization. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nagatsu, M., Terashita, F., Nonaka, H., Xu, L., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Appl. Phys. Letters. 86
  • NAID: 120000796467
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Interferon-γ overcomes low responsiveness of myeloid dendritic cells to CpG-DNA. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uchijima M, Nagata T, Aoshi T, Koide Y.
  • 雑誌名: Immunolgy and Cell Biology 83 ページ: 92-95
• [雑誌論文] Expression mapping by retroviral vector for CD8^+ T cell epitopes : definition of a Mycobacterium tuberculosis peptide presented by H2-D^d. (2005)
  • 著者名/発表者名: Aoshi T, Suzuki M, Uchijima M, Nagata T, Koide Y.
  • 雑誌名: Journal of Immunological Methods 298 ページ: 21-34
• [雑誌論文] Effects of oxygen radicals in low-pressure surface-wave plasma on sterilization. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nagatsu, M., Terashita, F., Nonaka, H., Xu, L., Nagata.T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Applied Physical Letters 86
  • NAID: 120000796467
• [雑誌論文] Interferon-y overcomes low responsiveness of myeloid dendritic cells to CpG-DNA. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uchijima M, Nagata T, Aoshi T, Koide Y.
  • 雑誌名: Immunolgy and Cell Biology 83 ページ: 92-95
• [雑誌論文] Expression mapping by retroviral vector for CD8^+ T cell epitopes : definition of a Mycobacterium tuberculosis peptide presented by H2-D^d. (2005)
  • 著者名/発表者名: Aoshi T, Suzuki M, Uchijima M, Nagata T, Koide Y.
  • 雑誌名: Journal of Immunological Methods (in press)
• [雑誌論文] Induction of protective cellular immunity against Mycobacterium tuberculosis by recombinant attenuated self-destructing Listeria monocytogenes strains harboring eukaryotic expression plasmids for Ag85 complex and MPB/MPT51. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miki, K., Nagata, T., Tanaka, T., Kim, Y.-H., Uchijima, M., Ohara, N., Nakamura, S., Okada, M., Koide, Y.
  • 雑誌名: Infect. Immun. 72・4 ページ: 2014-2021
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification of MHC-restricted T-cell epitopes on a novel protective antigen, MPT51, of Mycobacterium tuberculosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Koide, Y., Suzuki, M., Aoshi, T., Nagata, T.
  • 雑誌名: Int. J. Infect. Dis. 8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Plasmid encoding interleukin-4 in the amelioration of murine collagen-induced arthritis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kageyama, Y., Koide, Y., Uchijima, M., Nagata, T., Yoshida, A., Aoshi, T., Miura, T., Nagafusa, T., Nagano, A.
  • 雑誌名: Arthritis Rhumat. 50 ページ: 968-975
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification of H2-D^d- and H2-A^b-restricted T-cell epitopes on a novel protective antigen, MPT51, of Mycobacterium tuberculosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, M., Aoshi, T., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Infect. Immun. 72・7 ページ: 3829-3837
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Butyrate suppresses hypoxia-inducible factor-1 activity in intestinal epithelial cells under hypoxic conditions. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miki, K., Unno, N., Nagata, T., Uchijima, M., Konno, H., Koide, Y., Nakamura, S.
  • 雑誌名: Shock 22・5 ページ: 446-452
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] α-Galactosylceramide, a ligand of natural killer T cells, inhibits allergic airway inflammation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Matsuda, H., Suda, T., Sato, J., Nagata, T., Koide, Y., Chida, K., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 33・1 ページ: 22-31
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Cytokine and antibody production during the course of resolution in Plasmodium yoelii 17XL-infected BALB/c mice treated with febrifugine and isofebrifugine mixture from leaves of Hydrangea macrophylla var. Otaksa. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ishih, A., Nagata, T., Kobayashi, F., Miyase, T., Terada, M.
  • 雑誌名: Parasitol. Res. 94・3 ページ: 176-182
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Cytotoxic T-lymphocyte-, and helper T-lymphocyte-oriented DNA vaccine. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagata, T., Aoshi, T., Uchijima, M., Suzuki, M., Koide, Y.
  • 雑誌名: DNA Cell Biol. 23・2 ページ: 93-106
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Attenuated bacteria as transfer vehicles of DNA vaccines. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagata, T., Miki, K., Koide, Y.
  • 雑誌名: Recent Res. Devel. Biophys. Biochem. 4 ページ: 189-207
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of protective cellular immunity against Mycobacterium tuberculosis by recombinant attenuated self-destructing Listeria monocytogenes strains harboring eukaryotic expression plasmids for Ag85 complex and MPB/MPT51. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miki, K., Nagata, T., Tanaka, T., Kim, Y.-H., Uchijima, M., Ohara, N., Nakamura, S., Okada, M., Koide, Y.
  • 雑誌名: Infect. Immun. 72(4) ページ: 2014-2021
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Plasmid encoding interleukin-4 in the amelioration of murine collagen-induced arthritis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kageyama, Y., Koide, Y., Uchijima, M., Nagata, T., Yoshida, A., Aoshi, T., Miura, T., Nagafusa, T., Nagano, A.
  • 雑誌名: Arthritis Rheumat. 50 ページ: 968-975
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification of H2-Dd-and H2-Ab-restricted T-cell epitopes on a novel protective antigen, MPT51, of Mycobacterium tuberculosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, M., Aoshi, T., Nagata, T., Koide, Y.
  • 雑誌名: Infect. Immun. 72(7) ページ: 3829-3837
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Butyrate suppresses hypoxia-inducible factor-1 activity in intestinal epithelial cells under hypoxic conditions. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miki, K., Unno, N., Nagata, T., Uchijima, M., Konno, H., Koide, Y., Nakamura, S.
  • 雑誌名: Shock 22(5) ページ: 446-452
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] a-Galactosylceramide, a ligand of natural killer T cells, inhibits allergic airway inflammation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Matsuda, H., Suda, T., Sato, J., Nagata, T., Koide, Y., Chida, K., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 33(1) ページ: 22-31
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cytokine and antibody production during the course of resolution in Plasmodium yoelii 17XL-infected BALB/c mice treated with febrifugine and isofebrifugine mixture from leaves of Hydrangea macrophylla var. Otaksa. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ishih, A., Nagata, T., Kobayashi, F., Miyase, T., Terada, M.
  • 雑誌名: Prasitol. Res. 94(3) ページ: 176-182
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cytotoxic T-lymphocyte-, and helper T-lymphocyte-oriented DNA vaccine. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagata, T., Aoshi, T., Uchijima, M., Suzuki, M., Koide, Y.
  • 雑誌名: DNA Cell Biol. 23(2) ページ: 93-106
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of protective immunity against Mycobacterium tuberculosis by recombinant attenuated self-destructing Listeria monocytogenes strains harboring eukaryotic expression plasmids for Ae85 complex and MPB/MPT51. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miki K, Nagata T, Tanaka T, Kim Y-H, Uchijima, M, Ohara N, Nakamura S.
  • 雑誌名: Infection and Immunity 72(4) ページ: 2014-2021
• [雑誌論文] Plasmid encoding interleukin-4 in the amelioration of murine collagen-induced arthritis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kageyama Y, Koide Y, Uchijima M, Nagata T, Yoshida A, Aoshi T, Miura T, Nagafusa T, Nagano A.
  • 雑誌名: Arthritis and Rheumatitis 50 ページ: 968-975
• [雑誌論文] Identification of H2-D^d- and H2-A^d-restricted T-cell epitopes on a novel protective antigen, MPT51, of Mycobacterium tuberculosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M, Aoshi T, Nagata T, Koide Y.
  • 雑誌名: Infection and Immunity 72(7) ページ: 3829-3837
• [雑誌論文] Cytotoxic T-lymphocyte-, and helper T-lymphocyte-oriented DNA vaccine. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagata T, Aoshi T, Uchijima M, Suzuki M, Koide Y.
  • 雑誌名: DNA and Cell Biology 23 ページ: 93-106
• [雑誌論文] Butyrate suppresses hypoxia-inducible factor-1 activity in intestinal epithelial cells under hypoxic conditions. (2004)
  • 著者名/発表者名: Milk K, Unno N, Nagata T, Uchijima M Konno H, Koide Y, Nakamura S.
  • 雑誌名: Shock 22 ページ: 446-452
• [雑誌論文] Attenuated bacteria as transfer vehicles of DNA vaccines. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagata T, Miki K, Koide Y.
  • 雑誌名: Recent Research Development of Biophysics and Biochemstry 4 ページ: 189-207