血管梗塞・炎症などにともなう血管損傷の定量的検査法の開発

• 研究課題/領域番号: 16390161
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 若宮 伸隆 旭川医科大学, 医学部, 教授 (20210867)
• 研究分担者: 福澤 純 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40333695) ; 鈴木 定彦 北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 教授 (90206540) ; 吉田 逸朗 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (20041816) ; 小笠原 正洋 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40185492) ; 大谷 克城 旭川医科大学, 医学部, 助手 (90396367)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 14,400千円 (直接経費: 14,400千円); 2006年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2005年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2004年度: 7,400千円 (直接経費: 7,400千円)
• キーワード: コレクチン / 血管損傷 / 定量解析 / 梗塞 / 炎症 / 定量的解析

研究概要

血管内皮細胞に主に存在する膜型コレクチンCL-P1は常在性蛋白である。我々は、平成14年度〜16年度の文部科学省科学研究補助金(基盤研究(B)(2)課題番号13470139)による研究の過程で、本遺伝子を世界で初めて同定した(JBC 2001)。本研究では、CL-P1の分泌型分子の測定システム樹立による、血管損傷の定量的検査法を開発するための基盤研究を行うことを目的とした。
前年までは、分泌型CL-P1作成とCL-P1単クローン抗体の作成を行い、その反応性について比較検討を行った。得られた8種類のCL-P1の単クローン細胞から、腹水化を行い、精製抗体を作成した。抗原をプレートに固層化しての反応性を、ELISA法で測定した結果、すべての抗体は、免疫抗原であるCL-P1CRDと高い反応性を示した。さらに変性条件下での反応を、SDS-PAGE,ウエスタンブロット法にて解析した。その結果、抗体はいくつかのグループに分類できることが明らかになり、それらを組み合わせたプロトタイプ測定系の作成を行った。
平成18年度は、動物やヒト組織での免疫組織染色では血管内皮部分に一致する染色像を認めた。しかしながら、その発現は均一ではなかった。さらに、血中には、上記抗体で染色される分子量の低い分子が存在することを見出した。しかしながら、上記のサンドイッチELISAを用いても、本分子を定量できず、血中分子の定量測定化については、今後の課題となった。さらに、微量測定系については、再度単クローンとポリクローナル抗体を用いて、高感度測定システムの樹立を試行錯誤しながら進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Anti-influenza A virus activities of mannan-binding lectins and bovine conglutinin (2007)
  • 著者名/発表者名: Kawai T, Kase T, Suzuki Y, Eda S, Sakamoto T, Ohtani K, Wakamiya N
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 69(2) ページ: 221-224
  • NAID: 110006201244
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Anti-influenza A virus activities of mannan-binding lectins and bovine conglutinin. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kawai T, Kase T, Suzuki Y, Eda S, Sakamoto T, Ohtani K, Wakamiya N.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 69(2) ページ: 221-4
  • NAID: 110006201244
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Anti-influenza A virus activities of mannan-binding lectins and bovine conglutinin (2007)
  • 著者名/発表者名: Kawai T, Kase T, Suzuki Y, Eda S, Sakamoto T, Ohtani K, Wakamiya N.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 69(2) ページ: 221-224
  • NAID: 110006201244
• [雑誌論文] Specific recognition of the collagen triple helix by chaperone HSP47. II. Tne HSP47-binding structural motif in collagens and related proteins (2006)
  • 著者名/発表者名: Koide T, Nishikawa Y, Asada S, Yamazaki CM, Takahara Y, Homma DL, Otaka A, Ohtani K, Wakamiya N, Nagata K, Kitagawa K
  • 雑誌名: J Biol Chem. 281 ページ: 11177-11185
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification and characterization of a novel human collectin CL-K1 (2006)
  • 著者名/発表者名: Keshi H, Sakamoto T, Kawai T, Ohtani K, Katoh T, Jang S-J, Motomura W, Yoshizaki T, Fukuda M, Koyama S, Fukuzawa J, Fukuoh A, Yoshida I, Suzuki Y, Wakamiya N
  • 雑誌名: Microbiol. Immunol. 50(12) ページ: 1001-1013
  • NAID: 10018639470
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] コレクチンとその免疫応答における役割 (2006)
  • 著者名/発表者名: 大谷克城, 鈴木定彦, 若宮伸隆
  • 雑誌名: 臨床免疫 43(3) ページ: 266-274
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 薬剤耐性菌と院内感染対策 (2006)
  • 著者名/発表者名: 吉田逸朗, 張成宰, 若宮伸隆
  • 雑誌名: 北海道医報 7 道医シリーズ第45編 感染症 第45編 ページ: 71-74
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification and characterization of a novel human collectin CL-K1. (2006)
  • 著者名/発表者名: Keshi H, Sakamoto T, Kawai T, Ohtani K, Katoh T, Jong S-J, Motomura W, Yoshizaki T, Fukuda M, Koyama S, Fukuzawa J, Fukuoh A, Yoshida I, Suzuki Y, Wakamiya N.
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol. 50(12) ページ: 1001-1013
  • NAID: 10018639470
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Specific recognition of the collagen triple helix by chaperone HSP47. II. The HSP47-binding structural motif in collagens and related proteins. (2006)
  • 著者名/発表者名: Koide T, Nishikawa Y, Asada S, Yamazaki CM, Takahara Y, Homma DL, Otaka A, Ohtani K, Wakamiya N, Nagata K, Kitagawa K.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 281(16) ページ: 11177-85
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Specific recognition of the collagen triple helix by chaperone HSP47.II. The HSP47-binding structural motif in coll agens and related proteins (2006)
  • 著者名/発表者名: Koide T, Nishikawa Y, Asada S, Yamazaki CM, Takahara Y, Homma DL, Otaka A, Ohtani K, Wakamiya N, Nagata K, Kitagawa K.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 281 ページ: 11177-11185
• [雑誌論文] Lack of relationship between mannose- binding lectin variant alleles and risk of arterial thrombosis in Japanese patients with systemic lupus erythematosus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi R, Tsutsumi A, Ohtani K, Wakamiya N. Sumida T.
  • 雑誌名: Mod.Rheumatol. 15 ページ: 459-460
  • NAID: 10016914822
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Kato, S. : Preparation of monoclonal antibodies cross- reactive with Orthopoxviruses and their application for direct immunofluorescence test. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, N., Kobayashi, T., Kato, Y., Wakamiya, N, Ikuta, K., Tanaka, T., Ueda, S., Miyamoto, H.
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol. 49(3) ページ: 219-225
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Association of mannose-binding lectin (MBL) gene polymorphism and serum MBL concentration with characteristics and progression of systemic lupus erythematosus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, R.Tsutsumi, A.Ohtani, K.Mukai, Y.Goto, D.Matsumoto, I.Wakamiya, N Sumida, T.
  • 雑誌名: Ann.Rheum.Dis. 64 ページ: 311-314
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Association of mannose-binding lectin (MBL) gene polymorphism and serum MBI concentration with characteristics and progression of systemic lupus erythematosus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, R., Tsutsumi, A., Ohtani, K., Mukai, Y., Goto, D., Matsumoto, I., Wakamiya, N, Sumida, T
  • 雑誌名: Ann.Rheum.Dis. 64 ページ: 311-314
• [雑誌論文] Possibility of rapid detection for Variola virus using monoclonal antibody cross-reacted with Orthopoxviruses. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, N., Kobayashi, T., Kato, Y., Wakamiya, N., Ikuta, K., Tanaka, T., Miyamoto, H., Kato, S
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol 49 ページ: 219-225
• [雑誌論文] Lack of relationship between mannosebinding lectin variant alleles and risk of arterial thrombosis in Japanese patients with systemic lupus erythematosus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi R, Tsutsumi A, Ohtani K, Wakamiya N, Sumida, T.
  • 雑誌名: Mod.Rheumatol.. 15 ページ: 459-460
• [雑誌論文] 補体系異常と感染 (2005)
  • 著者名/発表者名: 大谷克城, 若宮伸隆
  • 雑誌名: 臨床と微生物 32(3) ページ: 261-267
  • NAID: 10015687392
• [雑誌論文] Association of mannose-binding lectin (MBL) gene polymorphism and serum MBL concentration with characteristics and progression of systemic lupus erythematosus (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, R., Tsutsumi, A., Ohtani, K., Mukai, Y., Goto, D., Matsumoto, I., Wakamiya, N., Sumida, T.
  • 雑誌名: Ann.Rheum.Dis. 64 ページ: 311-314
• [雑誌論文] Anti- mannose binding lectin antibodies in sera of Japanese patients with systemic lupus erythematosus. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takahashi R, Tsutsumi A, Ohtani K, Goto D, Matsumoto I, Ito S, Wakamiya N, Sumida T.
  • 雑誌名: Clin Exp Immunol. 136(3) ページ: 585-90
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Anti-mannose binding lectin antibodies in sera of Japanese patients with systemic lupus erythematosus. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takahashi R, Tsutsumi A, Ohtani K, Goto D, Matsumoto I, Ito S, Wakamiya N, Sumida T.
  • 雑誌名: Clin Exp Immunol. 136(3) ページ: 585-590
• [雑誌論文] 生体防御レクチンとしてのコレクチンファミリー (2004)
  • 著者名/発表者名: 若宮伸隆, 吉田逸朗, 小笠原正洋, 福澤純, 大谷克城, 小山聡
  • 雑誌名: 北海道医学雑誌 79(1) ページ: 3-7
  • NAID: 110000339839
• [雑誌論文] 自然免疫におけてMBLはどのような役割を果たすのか (2004)
  • 著者名/発表者名: 若宮伸隆
  • 雑誌名: 分子消化器病 1(2) ページ: 149-155
• [雑誌論文] Collagen- related lectins in innate immunity, : The novel collectins, CL-L1,CL-P1,CL-K1..
  • 著者名/発表者名: Suzuki, Y., Ohtani, K., Wakamiya, N.
  • 雑誌名: (In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Specific recognition of the collagen triple helix by chaperone HSP47 II
  • 著者名/発表者名: Koide, T., Nishikawa, Y., Asada, S., Yamazaki, C.M., Takahara, Y., Homma, D.L., Otaka, A., Ohtani, K., Wakamiya, N., Nagata, K., Kitagawa, K
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. (印刷中)
• [雑誌論文] コレクチンとその免疫応答における役割
  • 著者名/発表者名: 大谷克城, 鈴木定彦, 若宮伸隆
  • 雑誌名: 臨床免疫 (印刷中)
• [雑誌論文] Possibility of rapid detection for Variola virus using monoclonal antibody cross-reacted with Orthopoxviruses.
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, N., Kobayashi, T., Kato, Y., Wakamiya, N., Ikuta, K., Tanaka, T., Miyamoto, H., Kato, S.
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol. (印刷中)
• [図書] シンプル微生物学 (2006)
  • 著者名/発表者名: 東匡伸, 小熊恵二編集(分担執筆)
  • 総ページ数: 409
  • 出版者: 南山堂
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] シンプル微生物学 (2006)
  • 著者名/発表者名: 東匡伸, 小熊恵二編集, 分担執筆
  • 出版者: 南山堂(印刷中)