SEREX法により発見した新規癌抗原遺伝子を分子標的とした食道癌の診断と治療

• 研究課題/領域番号: 16390372
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 落合 武徳 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (80114255)
• 研究分担者: 島田 英昭 千葉大学, 大学院・医学研究院, 講師 (20292691) ; 日和佐 隆樹 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (30260251) ; 朝長 毅 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80227644)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 14,100千円 (直接経費: 14,100千円); 2006年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円); 2005年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円); 2004年度: 5,900千円 (直接経費: 5,900千円)
• キーワード: serex / TRIM21 / GLUT-1 / SLC2A1 / Myomegalin / 扁平上皮癌 / 腫瘍マーカー / TROP-2 / 食道癌 / GLUT1 / myomegalin / 食道扁平上皮癌 / SEREX抗体

研究概要

【背景と目的】食道癌関連抗原を SEREX (serological identification of antigens by recombinant cDNA expression cloning)法により同定・機能解析を行い、腫瘍マーカーとしての意義を明らかにする。
【方法】食道癌細胞株T.TnよりcDNAライブラリーを作製し、食道扁平上皮癌患者血清を用いてSEREX法によるスクリーニングを施行した。 SEREX法を用い食道扁平上皮癌患者血清をスクリーニングし、新規の癌抗原としてmyomegalinを同定した。Myomegalin cDNAをGST-融合タンパク質発現ベクターpGEXに組換え、合成された融合タンパク質を精製してELISA法により血清抗体のレベルを測定した。我々はSEREX法を用い食道扁平上皮癌患者血清をスクリーニングし、計450クローン、325種類の癌抗原を同定した。得られたクローンについて、ウエスタン法により、複数の食道癌患者血清中に抗体の存在が確認された抗原クローンを選別した。次に、得られたcDNAをGST一融合タンパク質発現ベクターpGEXに組換え、合成された融合タンパク質を精製してELISA法により血清抗体のレベルを測定した。
【結果と考察】TROP-2,GLUT-1/SLC2A1,TRIM21,Myomegalin等の抗原に対する抗体価は健常者血清に比べ、患者血清において有意に高いことが判明した。また、血清TRIM21抗体の存在は予後と、血清TROP2抗体の存在は腫瘍のサイズと関係していることがわかった。従って、これらの抗原は新規の腫瘍マーカーとなり、その血清抗体の解析は食道扁平上皮癌の診断に有用であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Serum anti-myomegalin antibodies in patients with esophageal squamous cell carcinoma (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimada H., Kuboshima M., Shiratori T., Nabeya Y., Takeuchi A., Takagi H., Nomura, F., Takiguchi, M., Ochiai, T., Hiwasa, T
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 30 ページ: 97-103
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] TSerum anti-myomegalin antibodies in patients with esophageal squamous c ell carcinoma (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimada H., Kuboshima M., Shiratori T., Nabeya Y., Takeuchi A., Takagi H., Nomura, F., Takiguchi, M., Ochiai, T.Hiwasa
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 30 ページ: 97-103
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Serological identification of antigens by recombinant cDNA expression cloning (SEREX) using antibodies from patients with esophageal squamous cell carcinoma (2006)
  • 著者名/発表者名: Hiwasa, T., Shimada, H., Ochiai, T., Takiguchi
  • 雑誌名: Moleculomics and Thereafte ページ: 99-117
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Presence of serum tripartite motif-containing 21 antibodies in patients with esophageal squamous cell carcinoma (2006)
  • 著者名/発表者名: Kuboshima, M., Shimada, H., Liu, T.L., Nomura, F., Takiguchi, M., Hiwasa, T., Ochiai, T
  • 雑誌名: Cancer Science 97 ページ: 380-386
  • NAID: 10018176867
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Enhancement of chemosensitivity toward peplomycin by calpastatin-stabilized NF-kappaB p65 in esophageal carcinoma cells : possible involvement of Fas/Fas-L synergism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Liu, T.L., Shimada, H., Ochiai, T., Shiratori, T., Lin, S.E., Kitagawa, M., Harigaya, K., Maki, M., Oka, M., Abe, T., Takiguchi, M., Hiwasa, T.
  • 雑誌名: Apoptosis 11 ページ: 1025-1037
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] An essential role of alternative splicing ofc-myc suppressor FUSE-binding protein-interacting repressor in carcinogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Tomonaga, T., Shimada, H., Shioya, A., Higashi, M., Matsubara, H., Harigaya, K., Nomura, F., Libutti, D., Levens, D., Ochiai, T
  • 雑誌名: Cancer Res 66 ページ: 1409-1417
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Proteomic analysis of primary esophageal squamous cell carcinoma reveals downregulation of a cell adhesion protein, periplakin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nishimori, T., Tomonaga, T., Matsushita, K., Oh-Ishi, M., Kodera, Y., Maeda, T., Nomura, F., Matsubara, H., Shimada, H., Ochiai
  • 雑誌名: Proteomics 6 ページ: 1011-1018
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Enhancement of chemosensitivity toward peplomycin by calpastatin-stabilized NF-kappaB p65 in esophageal carcinoma cells : possible involvement of Fas/Fas-L synergism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Liu, T.L., Shimada, H., Ochiai, T., Shiratori, T., Lin, S.E., Kitagawa, M., Harigaya, K., Maid, M., Oka, M., Abe, T., Takiguchi, M., Hiwasa, T.
  • 雑誌名: Apoptosis 11 ページ: 1025-1037
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] An essential role of alternative splicing ofc-myc suppressor FUSE-binding protein-interacting repressor in carcinogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Tomonaga, T., Shimada, H., Shioya, A., Higashi, M., Matsubara, H., Harigaya, K., Nomura, F., Libutti, D., Levens, D.Ochiai, T
  • 雑誌名: Cancer Res 66 ページ: 1409-1417
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Proteomic analysis of primary esophageal squamous cell carcino ma revealsdownregulation of a cell adhesion protein, periplakin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nishimori, T., Tomonaga, T., Matsushita, K., Oh-Ishi, M., Kodera, Y., Maeda, T., Nomura, F., Matsubara, H., Shimada, H., Ochiai
  • 雑誌名: Proteomics 6 ページ: 1011-1048
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Enhancement of chemosensitivity toward peplomycin by calpastatin-stabillized NF-kappaB p65 in esophageal carcinoma cells : possible involvement of Fas/Fas-L synergism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Liu, T.L., Shimada, H., Ochiai, T., Shiratori, T., Lin, S.E., Kitagawa, M., Harigaya, K., Maki, M., Oka, M., Abe, T., Takiguchi, M., Hiwasa, T.
  • 雑誌名: Apoptosis 11 ページ: 1025-1037
• [雑誌論文] An essential role of alternative splicing of c-myc suppressor FUSE-blinding protein-interacting repressor in carcinogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Tomonaga, T., Shimada, H., Shioya, A., Higashi, M., Matsubara, H., Harigaya, K., Nomura, F., Libutti, D., Levens, D., Ochiai, T
  • 雑誌名: Cancer Res 66 ページ: 1409-1417
• [雑誌論文] An essential role of alternative splicing of c-myc suppressor FUSE-binding protein-interacting repressor in carcinogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita K, Tomonaga T, Shimada H, Shioya A, Higashi M, Matsubara H, Harigaya K, Nomura F, Libutti D, Levens D, Ochiai T.
  • 雑誌名: Cancer Res. 66(3) ページ: 1409-1417
• [雑誌論文] Proteomic analysis of primary esophageal squamous cell carcinoma reveals down regulation of a cell adhesion protein, periplakin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nishimori T, Tomonaga T, Matsushita K, Oh-Ishi M, Kodera Y, Maeda T, Nomura F, Matsubara H, Shimada H, Ochiai T.
  • 雑誌名: Proteomics 6(3) ページ: 1011-1018
• [雑誌論文] Identification of a novel SEREX antigen, SLC2A1/GLUT1, in esophageal squamous cell carcinoma. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kuboshima M, Shimada H, Liu TL, Nakashima K, Nomura F, Takiguchi M, Hiwasa T, Ochiai T.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 28(2) ページ: 463-468
• [雑誌論文] Serological identification of tumor antigens of esophageal squamous cell carcinoma. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shimada H, Nakashima K, Ochiai T, Nabeya Y, Takiguchi M, Nomura F, Hiwasa T.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 26 ページ: 77-86
  • NAID: 130004436321
• [雑誌論文] Serological identification of TROP2 by recombinant cDNA expression cloning using sera of patients with esophageal squamous cell carcinoma. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakashima K, Shimada H, Ochiai T, Kuboshima M, Kuroiwa N, Okazumi S, et al.
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 112 ページ: 1029-1035