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歯胚培養細胞による歯の再生とその再生メカニズムの解明

研究課題

研究課題/領域番号 16390578
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 外科系歯学
研究機関東京大学

研究代表者

本田 雅規  東京大学, 医科学研究所, 寄付研究部門教員 (70361623)

研究分担者 朝比奈 泉  長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (30221039)
相良 洋  東京大学, 医科学研究所, 助手 (50145041)
研究期間 (年度) 2004 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
12,800千円 (直接経費: 12,800千円)
2006年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
2005年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
2004年度: 6,100千円 (直接経費: 6,100千円)
キーワードアメロゲニン / エナメル質 / 歯胚 / 歯胚細胞 / 歯胚上皮細胞 / 組織工学 / 担体 / 培養 / 歯乳頭細胞 / 歯髄細胞 / 歯嚢細胞 / 幹細胞 / 細胞培養 / フィーダーレイヤー / 歯胚組織
研究概要

この研究において二つのことを新しく発見した。
1)歯胚中の3種類の細胞、歯胚上皮細胞、歯乳頭(歯髄細胞)および歯嚢細胞の培養条件を検討し、特に歯胚上皮細胞においては新しい培養方法を開発した。
鐘状期歯胚から無血清培地を用いて上皮細胞のみを選択し、3T3細胞をフィーダーレイヤーとして混合培養することで、長期培養に成功した。10継代した培養細胞のmRNAを採取し歯胚上皮系細胞特異的な遺伝子であるアメロジェニン、アメロブラスチン、エナメライシンの発現を確認し、前エナメル芽細胞の形質を維持していた。次に、歯乳頭(歯髄)組織中から幹細胞の特性を持つ細胞をFACSによって分離することに成功した。この細胞は従来、他の組織の幹細胞のマーカーとして報告されている遺伝子群を発現することを確認した。最後に、歯嚢組織から単細胞クローンの採取に成功し、その細胞を長期培養できる条件を見出した。また、その単細胞クローンは歯根膜の前駆細胞の特性を示すことがmRNAによるRT-PCRの解析から確認した。さらに、この単細胞クローンを歯根膜細胞に有利に分化する培養条件を見出した。
2)培養歯胚上皮細胞がin vivoにてエナメル質形成能を持つことがわかった。
3-5継代した培養歯胚上皮細胞と同時期の歯乳頭細胞をコラーゲンスポンジの担体の上で混合させて、免疫不全ヌードラットの腹部大網中に移植する。移植後4週・8週にて試料を採取して、組織学的および免疫組織化学的に評価したところ、移植後4週にて取り出した試料にエナメル質の形成が観察できた。この組織はサイトケラチン14抗体に陽性であり、アメロゲニン抗体陽性のエナメル芽細胞が観察できた。これらの結果から、われわれが開発した培養方法にて培養・増殖させた歯胚上皮細胞はアメロゲニンのタンパクを分泌し、歯髄細胞と混合させることでエナメル質を形成することがわかった。

報告書

(4件)
  • 2006 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2005 実績報告書
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (27件)

すべて 2007 2006 2005 その他

すべて 雑誌論文 (27件)

  • [雑誌論文] Side population cells expressing ABCG2 in human adult dental pulp tissue.2007

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Nakashima F, Satomura K, Shinohara Y, Tsuchiya S, Watanabe N, Ueda M
    • 雑誌名

      International Endodontic Journal (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Subcultured odontogenic epithelial cells in combination with dental mesenchymal cells produce enamel-dentin-like complexes structures.2007

    • 著者名/発表者名
      Honda, MJ, Shinohara Y, Hata KI, Ueda M
    • 雑誌名

      Cell Transplantation (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The sequential seeding of epithelial and mesenchymal cells for tissue-engineered tooth regeneration2007

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Tsuchiya S, Sumita Y, Sagara H, Ueda M.
    • 雑誌名

      Biomaterials 28

      ページ: 680-689

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Effective Bone Engineering using Periosteum-Derived Cells.2007

    • 著者名/発表者名
      Agata H, Asahina I, Yamazaki Y, Uchida M, Shinohara Y, Honda MJ, Kagami H, Ueda M.
    • 雑誌名

      J Dent Res 114

      ページ: 79-83

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The sequential seeding of epithelial and mesenchymal cells for tissue-engineered tooth regeneration2007

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Tsuchiya S, Sumita Y, Sagara H, Ueda M
    • 雑誌名

      Biomaterials 28

      ページ: 680-689

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Effective Bone Engineering using Periosteum-Derived Cells.2007

    • 著者名/発表者名
      Agata H, Asahina I, Yamazaki Y, Uchida M, Shinohara Y, Honda MJ, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      J Dent Res 86

      ページ: 79-83

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Cell proliferation in teeth reconstructed from dispersed cells of embryonic tooth germs in a three-dimensional scaffold.2006

    • 著者名/発表者名
      Iwatsuki S, Honda MJ, Harada H, Ueda M.
    • 雑誌名

      European Journal of Oral Sciences 114

      ページ: 310-317

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Tooth-Tissue Engineering.2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Sumita Y, Shinohara Y, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      The Inflammation and Regeneration Journal. 26

      ページ: 169-174

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Performance of collagen sponge as a scaffold for tooth-tissue engineering.2006

    • 著者名/発表者名
      Sumita Y, Honda MJ, Ohara T, Tsuchiya S, Sagara H, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      Biomaterials. 27

      ページ: 3238-3248

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Shear stress facilitate tissue-engineered odontogenesis2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Shinohara Y, Sumita Y, Tonomura A, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      Bone 39

      ページ: 169-174

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] A Novel Culture System for Porcine Odontogenic Epithelial Cells Using a Feeder Layer.2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Shimodaira T, Ogaeri T, Shinohara Y, Hata K, Ueda M
    • 雑誌名

      Archives of Oral Biology 51

      ページ: 282-290

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Preliminary Study of Tissue-Engineered Odontogenesis in the Canine Jaw.2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Ohara T, Sumita Y, Ogaeri T, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      J Oral Maxillofac Surg 64

      ページ: 283-289

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Cell proliferation in teeth reconstructed from dispersed cells of embryonic tooth germs in a three-dimensional scaffold.2006

    • 著者名/発表者名
      Iwatsuki S, Honda MJ, Harada H, Ueda M
    • 雑誌名

      European Journal of Oral Sciences. 114

      ページ: 310-317

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Shear stress facilitate tissue-engineered odontogenesis.2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ., Shinohara Y., Sumita Y., Tonomura A., Kagami H., Ueda M.
    • 雑誌名

      Bone 39

      ページ: 125-33

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Cell proliferation in teeth reconstructed from dispersed dells of embryonic tooth germs in three-dimensional scaffold2006

    • 著者名/発表者名
      Iwatsuki S, Honda MJ, Harada H, Ueda M
    • 雑誌名

      European Journal of Oral Sciences 114

      ページ: 310-317

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Tooth-Tissue Engineering2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Sumita Y, Shinohara Y, Kagami H, et al.
    • 雑誌名

      The Inflammation and Regeneration Journal 26

      ページ: 169-174

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] A novel culture system for porcine odontogenic epithelial cells using a feeder layer.2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Shimodaira T, Ogaeri T, Shinohara Y, Hata K, Ueda M.
    • 雑誌名

      Archives of Oral Biology 51

      ページ: 282-290

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Preliminary study of tissue-engineered odontogenesis in the canine jaw2006

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Ohara T, Sumita Y, Ogaeri T, Kagami H, Ueda M.
    • 雑誌名

      Journal of Oral & Maxillofacial Surgery 64

      ページ: 283-289

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Histological and immunohistochemical studies of tissue engineered odontogenesis.2005

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Sumita Y, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      Archives of Histology and cytology. 68(2)

      ページ: 89-101

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Histological and immunohistochemical studies of tissue engineered odontogenesis.2005

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Sumita Y, Kagami H, Ueda M
    • 雑誌名

      Archives of Histology and cytology 68(2)

      ページ: 89-101

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Histological and immunohistochemical studies of tissue engineered odontogenesis.2005

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ., Sumita Y, Kagami H, Ueda M.
    • 雑誌名

      Archives of Histology and cytology 68

      ページ: 89-101

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Tissue-engineered odontogenesis2005

    • 著者名/発表者名
      Iwatsuki S, Honda MJ, Harada H, Ueda M.
    • 雑誌名

      Journal of Hard Tissue Biology 14

      ページ: 178-179

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Histological and immunohistochemical studies of tissue engineered odontogenesis2005

    • 著者名/発表者名
      Masaki H, Yoshinori S., et al.
    • 雑誌名

      Archives of Histology and Cytology (発表予定)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Subcultured odontogenic epithelial cells in combination with dental mesenchymal cells produce enamel-dentin-like complexes structures

    • 著者名/発表者名
      Honda, MJ, Shinoharu Y, Hata KI, Ueda M
    • 雑誌名

      Cell Transplantation (in press)

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Side population cells expressing SBDG2 in human adult dental pulp tissue

    • 著者名/発表者名
      Honda.M, Nakashima F, Satomura K, Shinohara Y, et al.
    • 雑誌名

      International Endodontic Journal (in press)

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Shear stress facilitate tissue-engineered odontogenesis.

    • 著者名/発表者名
      Honda MJ, Shinohara Y, Sumita Y, Tonomura A, Kagami H, Ueda M.
    • 雑誌名

      BONE (印刷中)

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Performance of collagen sponge as a scaffold for tooth-tissue engineering

    • 著者名/発表者名
      Sumita Y, Honda MJ, Ohara T, Tsuchiya S, Sagara H, Kagami H, Ueda M.
    • 雑誌名

      Biomaterials (印刷中)

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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