細胞極性制御分子Densin-180の神経シナプスにおける役割の解明

• 研究課題/領域番号: 16500257
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経化学・神経薬理学
• 研究機関: 愛知県がんセンター(研究所)
• 研究代表者: 井澤 一郎 愛知県がんセンター(研究所), 発がん制御研究部, 主任研究員 (20311441)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,700千円 (直接経費: 3,700千円); 2005年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円); 2004年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: 神経科学 / 脳・神経 / 発生・分化 / シグナル伝達 / 痴呆 / Densin-180 / ERBIN / delta-catenin / 神経シナプス / PSD / LAP蛋白質 / Scribble

研究概要

Densin-180の機能を解析するために、Densin-180の種々の変異体を培養細胞に導入して、その細胞内局在を観察した。Neuro2a細胞にN末端側のleucine-rich repeatsを欠失したものを発現させると形質膜への局在がなくなり、細胞質内でvesicle状の局在を示した。また、HeLa細胞にC末端側のPDZドメインを含む部分を発現させると、アクチン・ストレスファイバー上に局在した。Densin-180と非常に高い相同性を有するERBINの細胞内局在も検討したところ、ERBINのleucine-rich repeatsドメインよりもさらにN末端の部分(1-32アミノ酸残基)を欠失させると、形質膜への局在が見られなくなり、この部分がERBINの形質膜への局在に重要である可能性を認めた。さらにいくつかのERBIN変異体を作製し、システイン14及びシステイン16がこの局在化に必須であることを見出した。これまでに、Densin-180のPDZドメインの近傍が、CaMKIIによってリン酸化されることが報告されているが、今回私共は、このリン酸化部位に対する抗リン酸化抗体を作製した。この抗体は、細胞に強制発現させたDensin-180が、イオノマイシン刺激でリン酸化されることを確認することができた。また、Densin-180と相同性を有する線虫のLET-413の変異体では、trichohyalin及びplectinと相同性を有する蛋白質であるAJM-1の局在が変化することが報告されているが、私共は、細胞骨格蛋白質ケラチンと結合する蛋白質として、trichohyalin及びplectinと相同性を有する新規蛋白質トリコプレイン(trichoplein)を同定した。

研究成果

• [雑誌論文] Regulatory mechanisims and functions of intermediate filaments : A study using site- and phosphorylation state-specific antibodies (2006)
  • 著者名/発表者名: Izawa, I.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 97・3 ページ: 167-174
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Regulatory mechanisms and functions of intermediate filaments : A study using site- and phosphorylation state-specific antibodies. (2006)
  • 著者名/発表者名: Izawa, I., Inagaki, M.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 97(3) ページ: 167-174
  • NAID: 10018177174
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification of trichoplein, a novel keratin filament-binding protein (2005)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa, M.
  • 雑誌名: J Cell Sci. 118・5 ページ: 1081-1090
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Aurora-B and Rho-kinase/ROCK, the two cleavage furrow kinases. independently regulate the progression of cytokinesis : possible existence of a novel cieavage furrow kinase phosphorylates ezrin/radixin/moesin (ERM) (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, T.
  • 雑誌名: Microbiol. Immunol. 49・4 ページ: 297-302
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] PKC_ε-mediated phosphorylation of vimentin controls integrin recycling and motility (2005)
  • 著者名/発表者名: Ivaska, J.
  • 雑誌名: EMBO J. 24・22 ページ: 3834-3845
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification of trichoplein, a novle keratin filament-binding protein. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa, M., Izawa, I., Inoko, A., Hayashi, Y., Nagata, K.-i., Yokoyama, T., Usukura, J., Inagaki, M.
  • 雑誌名: J.Cell Sci. 118(5) ページ: 1081-1090
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Aurora-B and Rho-kinase/ROCK, the two cleavage furrow kinases, independently regulate the progression of cytokinesis : possible existence of a novel cleavage furrow kinase phosphorylates ezrin/radixin/moesin (ERM). (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, T., Goto, H., Izawa, I., Mizutani, H., Inagaki, M.
  • 雑誌名: Genes Cells 10(2) ページ: 127-137
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Observation of the intracellular behavior of recombinant Yersinia pseudotuberculosis invasion protein. (2005)
  • 著者名/発表者名: Koga, H., Izawa, I., Araki, N., Saya, H., Mimori, T.
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol. 49(4) ページ: 297-302
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] PKCε-mediated phosphorylation of vimentin controls integrin recycling and motility. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ivaska, J., Vuoriluoto, K., Huovinen, T., Izawa, I., Inagaki, M., Parker, P.J.
  • 雑誌名: EMBO J. 24(22) ページ: 3834-3845
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cleavage furrow kinases and cell division. (2005)
  • 著者名/発表者名: Izawa, I., Inagaki, M.
  • 雑誌名: Signal Transduction of Cell Division (Research Signpost, India) (Miki, T.ed.) ページ: 73-92
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Observation of the intracellular behavior of recombinant Yersinia pseudotuberculosis invasion protein (2005)
  • 著者名/発表者名: Koga, H.
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol. 49・4 ページ: 297-302
• [雑誌論文] PKCε-mediated phosphorylation of vimentin controls integrin recycling and motility (2005)
  • 著者名/発表者名: Ivaska, J.
  • 雑誌名: EMBO J. 24・22 ページ: 3834-3845
• [雑誌論文] Identification of trichoplein, a novel keratin filament-binding protein (2005)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa, M, et al.
  • 雑誌名: J.Cell Sci. 118・5 ページ: 1081-1090
• [雑誌論文] Aurora-B and Rho-kinase/ROCK, the two cleavage furrow kinases, independently regulate the progression of cytokinesis : possible existence of a novel cleavage furrow kinase phosphorylates ezrin/radixin/moesin (ERM) (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, T., et al.
  • 雑誌名: Genes Cells 10・2 ページ: 127-137
• [図書] Signal Transduction of Cell Division (Miki T. ed.) (2005)
  • 著者名/発表者名: Izawa, I.
  • 総ページ数: 351
  • 出版者: Research Signpost
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より