| 研究概要 |
本研究は,筋ジストロフィー(DMD)の原因遺伝子であるジストロフィン遺伝子(全長2.5M)を転座させた人工染色体ベクターを作成し,それをマウス胚幹細胞に導入するという新しいアプローチから,DMDの究極的なモデル動物を作成することを目的としたものである。本研究により,ジストロフィン遺伝子を含む人工染色体ベクターHAC-DMDを保持したES細胞株を作成し,このES細胞を用いたキメラマウスの作成に成功し,さらに,HAC-DMDが次世代へ伝達されることを確かめた。一方,ヒトジストロフィン遺伝子だけが発現するマウスを作成するために,Cre-loxPシステムを用いてマウスジストロフィン遺伝子全長2.4Mbを完全に除去したDm-null ES細胞株を樹立し,このES細胞を用いてジストロフィン遺伝子領域が完全に欠失したDMD-nullマウスを作成した。このマウスの表現型を詳細に解析し,筋ジストロフィーと同様の激しい筋崩壊が生じることを確認した。ジストロフィンアイソフォームの生体内における機能についての新しい知見を得ることができた。さらに,このDMD-null ES細胞にHAC-DMDを導入した後,このES細胞を用いてキメラマウスを作成することに成功し,このキメラマウスから次世代の子孫を得ることにも成功した。このマウスでは,マウスのジストロフィンの代わりにヒトジストロフィンが機能していることが予想され,現在,その発現を詳細に解析しているところである。
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